一种芯片、制备方法、用途及筛选药物的方法技术

本发明专利技术涉及药物筛选领域，具体涉及一种芯片、制备方法、用途及筛选药物的方法。本发明专利技术提供的芯片，具有很好的抗蛋白质非特异性吸附能力，能够并行固定多种小分子物质，进而用于筛选具有复杂组分的药物，仅仅需要微量的化合物就能够有效地分析小分子化合物与具体疾病靶标的生物活性，灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物筛选领域，特别涉及。
技术介绍
中药是我国几千年来的文化沉淀，具有悠久的历史和文化渊源。然而，中药的开发仍然依赖于多年来的传统方法，并以原料药为基础，缺乏系统的现代科学的基础研究。大多数的中药的作用机制不清楚、中药药方的关键组分不明确，而且可能存在无法意料的副作用。这些因素阻碍了中药进军国际天然药物市场的主流。中药要走向世界，进入国际市场，必须实现中药现代化，与世界现代医学接轨。研究人员希望寻找出治疗特定疾病的中药配方中的某种关键组分，解开传统中医的潜在功效之谜，为传统中药的发展开辟新的道路。例 如采用超临界萃取等技术对中药成分的提取，然后通过生物实验(如细胞实验)确认某一种馏分中是否含有有效活性成分，作为下一步细分、提纯的决策依据。这种方法操作繁琐、耗时费力、效率低。经济快速的高通量筛选已成为当今药物筛选的主流。在过去的几年中，世界上著名的制药公司纷纷与以高通量药物筛选技术为核心的中小型生物科技公司结盟或合作，采用高通量或超高通量药物筛选技术进行先导物分子的筛选。其中以小分子阵列芯片技术的应用最为广泛。哈佛大学Schreiber课题组首次报道了小分子化合物微阵列芯片，主要用于筛选能与特定蛋白质特异性结合的化合物。他们将玻片表面进行化学处理，使其衍生化产生活性基团，然后采用高精度点样仪吸取约InL的溶于合适有机溶剂(例如DMS0)样品点样于玻片特定的区域，利用表面活性基团与小分子特定基团的相互作用将小分子共价固定于芯片表面。通过这种方式，可以实现小分子阵列，而且满足高密度地固定于玻片表面。虽然这种特异性固定策略非常适合于固定合成化合物，但是天然化合物的结构通常是多样性，如果采用单一的固定方式难以将多种小分子固定于同一张芯片中，尤其是部分环状小分子并没有连接臂用于固定。因此，天然化合物的固定是小分子阵列的技术瓶颈。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供。本专利技术提供的芯片，具有很好的抗蛋白质非特异性吸附能力，能够并行固定多种小分子物质，进而用于筛选具有复杂组分的药物，仅仅需要微量的化合物就能够有效地分析小分子化合物与具体疾病靶标的生物活性，灵敏度高。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案本专利技术提供了一种芯片，包括固体支持物、两端修饰的聚乙二醇和光交联剂；两端修饰的聚乙二醇为一端由铆定基团修饰、另一端由结合基团修饰的聚乙二醇；固体支持物与铆定基团连接、光交联剂与结合基团连接；铆定基团选自-SH、-S-S-、-SiCl3；结合基团选自-C00H、-OH、-NH2、-OCH3。本专利技术提供的芯片在固体支持物表面通过两端修饰的聚乙二醇引入光交联剂，在紫外光(波长365nm，能量4J/cm2)照射下转化为反应活性较高的中间体卡宾，卡宾基团能以多种方式结合小分子而无需小分子带有特定功能基团。作为优选,光交联剂选自苯基叠氮类化合物、B丫丙唳类化合物、二苯甲酮类化合物。优选地，光交联剂选自苯基叠氮类化合物。作为优选，光交联剂与结合基团经酸胺缩合反应偶联。在本专利技术的一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为100 5000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 1000 4000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 1500 3400。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 2000 2800。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 100 500。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 500 1000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 1000 2000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 2000 5000。在本专利技术的一些实施例中，本专利技术提供的芯片中，固体支持物为玻璃基片或镀金玻璃基片。本专利技术还提供了一种芯片的制备方法，包括如下步骤步骤I :取聚乙二醇分别与铆定基团、结合基团连接，获得两端修饰的聚乙二醇；步骤2 :取固体支持物经预处理后与铆定基团连接；步骤3 :活化结合基团后，与光交联剂经酸胺缩合反应偶联，即得；铆定基团选自-SH、-S-S-、-SiCl3；结合基团选自-C00H、-OH、-NH2。作为优选，光交联剂选自苯基叠氮类化合物、吖丙啶类化合物、二苯甲酮类化合物。优选地，光交联剂选自苯基叠氮类化合物。在本专利技术的一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇 的分子量为100 5000。 在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片中两端修饰的聚乙二醇的分子量为 1000 4000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇的分子量为1500 3400。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇的分子量为2000 2800。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇的分子量为100 500。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇的分子量为500 1000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇的分子量为1000 2000。在本专利技术的另一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中两端修饰的聚乙二醇的分子量为2000 5000。在本专利技术的一些实施例中，本专利技术提供的芯片的制备方法中，固体支持物为玻璃基片或镀金玻璃基片。本专利技术还提供了上述制备方法制得的芯片。本专利技术还提供了上述芯片用于筛选药物的应用。本专利技术还提供了一种基于芯片筛选药物的方法，包括如下步骤步骤I :取待测物与芯片混合，干燥后置于紫外光下，洗去未结合的待测物，获得第一芯片，灭活未结合位点后与靶标混合，经表面等离子体共振检测获得第一响应值；步骤2 :取不与靶标结合的配体作为阴性对照物与芯片混合，干燥后置于紫外光下曝光，洗去未结合的所述阴性对照物，获得第二芯片，灭活未结合位点后与靶标混合，经表面等离子体共振检测获得第二响应值；步骤3 :获得第一响应值与第二响应值的比值，根据比值判断待测物与靶标是否结合；比值不小于3时，待测物为与靶标结合的药物；比值小于3时，待测物为不与靶标结合的配体；芯片包括固体支持物、两端修饰的聚乙二醇和光交联剂；两端修饰的聚乙二醇为一端由铆定基团修饰、另一端由结合基团修饰的聚乙二醇；固体支持物与铆定基团连接，光交联剂与结合基团连接；铆定基团选自-SH、-S-S-、-SiCl3；结合基团选自-C00H、-OH、-NH2、-OCH3。具体可以为，本专利技术提供的一种基于芯片筛选药物的方法，包括如下步骤步骤I :采用高精度点样仪将待测物点样于芯片的特定区域，干燥后置于紫外光进行光交联，洗去未结合的待测物，灭活未结合位点后与靶标混合，获得小分子阵列，经表面等离子体共振检测获得第一响应值；步骤2 :采用高精度点样仪将阴性对照物点样于芯片的特定区域，干燥后置于紫外光进行光交联，洗去未结合的阴性对照物，灭活未结合位点后与靶标混合，获得小分子阵列，经表面等离子体共振检测获得第二响应值本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种芯片，其特征在于，包括固体支持物、两端修饰的聚乙二醇和光交联剂；所述两端修饰的聚乙二醇为一端由铆定基团修饰、另一端由结合基团修饰的聚乙二醇；所述固体支持物与所述铆定基团连接，所述光交联剂与所述结合基团连接；所述铆定基团选自？SH、？S？S？、？SiCl3；所述结合基团选自？COOH、？OH、？NH2、？OCH3。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱劲松，何建安，陈新颖，彭开美，
申请(专利权)人：广州高通生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：