一种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用，以黄芪和当归作为原料，通过水提醇沉、树脂分离纯化、有机溶媒萃取、层析分离得到的具有药用活性的有效部位。该有效部位能够作为药用成分制成适宜的中成药制剂，方便使用，提高药用的安全性。本发明专利技术提供的具有促血管新生作用的中药提取物，可应用于一系列血管新生不足或低下所引起的疾病，也可用于通过调整机体或组织的血管新生及其功能状态达到预防或治疗疾病的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物药用活性成分
，涉及ー种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
血管新生是指在原有毛细血管基础上通过血管内皮细胞的増殖与迁移，从先前存在的血管处生成新的毛细血管的过程。血管新生在胚胎发育、创伤愈合、子宮内膜周期性增殖、肿瘤、増殖性视网膜病变等生理、病理状态中起着重要作用。调节机体血管新生的失衡过程，已成为某些疾病治疗的新策略。通过促进血管新生，可治疗许多存在血管新生不足性疾病，如冠心病、创伤和骨折延迟愈合、闭塞性脉管炎等。由于目前尚未有促进血管新生 的有效治疗药物，因此从中药及经典复方中筛选提取是新药研究的重要途径。
技术实现思路
本专利技术解决的问题在于提供ー种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备方法和应用，是从中药经典名方当归补血汤中跟踪提取筛选得到有效部位，可应用于促血管形成和/或新生。本专利技术是通过以下技术方案来实现ー种具有促血管新生作用的中药提取物，该中药提取物的提取原料药为黄芪和当归，其提取是将黄芪和当归按质量比为5:1混合，经水提醇沉后回收こ醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用体积浓度30 90%的こ醇溶液洗脱，收集洗脱馏分后回收こ醇，然后用有机溶剂萃取，再将有机溶剂萃取液回收溶剂后进行固定相层析分离，收集流动相洗脱所得馏分后干燥，得到当归补血汤有效部位。所述中药提取物以黄芪甲苷、阿魏酸和毛蕊异黄酮苷的质量分数计，所含黄芪甲苷不少于5%、所含阿魏酸不少于2%、所含毛蕊异黄酮苷不少于2%。—种具有促血管新生作用的中药提取物的制备方法，包括以下步骤将黄芪和当归按质量比为5:1混合，经水提醇沉后回收こ醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再体积浓度30 90%的こ醇溶液洗脱，收集洗脱馏分后回收こ醇，然后用有机溶剂萃取，再将有机溶剂萃取液回收溶剂后进行固定相层析分离，收集流动相洗脱所得馏分后干燥，得到当归补血汤有效部位。所述的具有促血管新生作用的中药提取物的制备方法，包括以下步骤I)将黄芪和当归按质量比为5:1分别粉碎后混合，用水浸泡后，煎煮提取或加热回流提取，提取完成后收集提取液，减压浓缩得到浓缩液；浓缩液加こ醇至含醇体积浓度达10 95%，搅拌均匀后常温或冷藏条件下静置，待沉淀完全后过滤得上清液，上清液回收こ醇至无味，得到醇沉液；2)将醇沉液回收こ醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，先用水洗脱至流出液无色，然后再用体积浓度30 90%的こ醇溶液洗脱，收集洗脱馏分，回收洗脱馏分中的こ醇，得到二次浓缩液；3)将二次浓缩液加水充分搅拌后加入有机溶剂萃取，分离有机相提取液并浓缩回收溶剂，得到三次浓缩液；4)三次浓缩液进行固定相层析分离，固定相为非极性固定相或三氧化ニ铝，流动相为水和与水互溶的有机溶剂的混合液，三次浓缩液上样于固定相后经流动相洗脱，收集洗脱馏分，真空或常温干燥后得到粉状的具有促血管新生作用的中药提取物。所述的将黄芪和当归粉碎混合后，用其质量5 10倍的水浸泡I 5h后，煎煮提取I. 5 5h或加热回流提取I 5h，提取完成后收集提取液，减压浓缩得到浓缩液； 所述的大孔吸附树脂为D-101、HPD722、AB-8、DA-201、DS401、DM-301、HPD-100,DM130或H-103，用水洗至无色后再用体积浓度为30 90%的こ醇溶液洗脱，洗脱的流速为I.0 2. Oml/min,收集醇洗脱液；所述的萃取的有机溶剂为こ酸こ酷、氯仿或正丁醇；所述的非极性固定相为C18、CS或大孔硅胶等，所述的与水互溶的有机溶剂为甲醇、こ臆、异丙醇、丙酮或四氢呋喃，与水互溶的有机溶剂的加入以调节在固定相中的保留时间；固定相层析分离流动相的流速为I. O 100ml/min。所述的浓缩液或二次浓缩液的相对密度为I. 06 I. 10g/ml，第三次浓缩液的相对密度为0. 90 0. 95g/ml ；所述的水与水互溶的有机溶剂的体积比为85:15 20:80。所述的具有促血管新生作用的中药提取物在制备促血管形成和/或新生药物中的应用；或者在制备改善血管新生不足或低下的药物的应用；或者在制备调整机体或组织的血管新生及状态的药物的应用。所述的药物包括抗心肌缺血、抗脑组织缺血、抗外周组织缺血的药物；抗溃疡、抗闭塞性脉管炎、抗糖尿病并发症的药物；促进伤ロ愈合、改善骨折愈合延迟的药物。以所述中药提取物为药用成分，将其制备成固体、半固体或液体形式的制剂。所述的固体形式为片剂、散剤、颗粒剂、粉针剂或胶囊剂；半固体形式为乳剂、霜齐U、软膏剂、糊剂；液体形式为以水或有机溶媒制成的注射剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂或喷雾剂，有机溶媒包括但不仅限于こ醇、丙ニ醇、植物油。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果本专利技术提供的具有促血管新生作用的中药提取物，是以黄芪和当归作为原料，通过水提醇沉、树脂分离纯化、有机溶媒萃取、层析分离得到的具有药用活性的有效部位。该有效部位能够作为药用成分制成适宜的中成药制剂，方便使用，提高药用的安全性。本专利技术提供的具有促血管新生作用的中药提取物，是经过对多种中草药和复方制剂进行筛选，并对筛选所得的当归补血汤结合多种分离方法逐步进行活性跟踪、最后确定的具有较强促血管新生活性的提取部位。在鸡胚尿囊膜模型上，相当于原生药Ig mL-1当归补血汤有效部位表现出了明显的促进血管新生作用，其作用强于所含的阿魏酸和黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷等主要成分。本专利技术提供的具有促血管新生作用的中药提取物，可应用于一系列血管新生不足或低下所引起的疾病，也可用于通过调整机体或组织的血管新生及其功能状态达到预防或治疗疾病的目的。说明书附1-1 1-9为不同中药组CAM血管形态比较结果图；图2为黄芪甲苷的固定相检测图谱；图3为阿魏酸的固定相检测图谱。具体实施方式 本专利技术提供ー种具有促血管新生作用的中药提取物及其制备和应用，从当归补血汤提取出具有药用效果的有效部位。下面结合具体的实施例和促血管新生的效果验证对本专利技术做进ー步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。实施例I中药及中药复方促血管新生作用的筛选以中药材或中药复方的药理作用为依据，选择可能具有促血管新生作用的中药黄芪、丹參、当归、三七以及中药复方归补血汤、桃红四物汤和血府逐瘀汤为对象，采用鸡胚尿囊膜模型(CAM)为测试手段，筛选评估其中作用最強的中药或中药复方。I、仪器与材料裕丰全自动孵化机(山东德州科裕孵化设备有限公司)；超净工作台(北京昌平长城空气精华工程公司)；重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液(bFGF，63000IU/15mL，珠海亿胜生物制药有限公司，批号20110908);中药饮片(西安中药集团南郊公司，经西安交通大学医学院药学系生药教研室鉴定)；种蛋购自陕西省军区农副业生产基地，每枚重50-60g，种蛋产出一周内用于实验；明胶海绵(金陵药业股份有限公司南京金陵制药厂，规格:6cmX2cmX0. 5cm)。2、方法2. I样品制备按方分别称取当归补血汤(黄芪90g、当归18g)、桃红四物汤(桃仁9g，红花6g，熟地12g，川芎6g，白芍9g，当归9g)、血府逐瘀汤(当归9g，桃仁12g，红花9g，生地9g，枳壳6g，赤芍6g，柴胡3g，甘草6g，桔梗4. 5g，川芎4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有促血管新生作用的中药提取物，其特征在于，该中药提取物的提取原料药为黄芪和当归，其提取是将黄芪和当归按质量比为5:1混合，经水提醇沉后回收乙醇所得的浓缩液上样于大孔吸附树脂，用水洗脱至流出液无色后再用体积浓度30～90%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱馏分后回收乙醇，然后用有机溶剂萃取，再将有机溶剂萃取液回收溶剂后进行固定相层析分离，收集流动相洗脱所得馏分后干燥，得到当归补血汤有效部位。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：封卫毅，肖志强，魏友霞，杨建刚，董海燕，孟祥海，郭晨，倪亚会，
申请(专利权)人：陕西新药技术开发中心，
类型：发明
国别省市：