SPARC 血管生成结构域和使用方法技术

本发明专利技术提供了组合物和方法，其利用了SPARC羧基血管生成结构域的发现。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】SPARC血管生成结构域和使用方法相关申请的交叉参考本专利申请要求2010年3月11日提交的美国临时专利申请号61/313，050和2010年3月11日提交的61/313，047的权益，二者通过引用方式全文并入本文。
技术介绍
分泌的、酸性的、富含半胱氨酸的蛋白(SPARC)，也被称作骨结合素(osteonectin)，是286个氨基酸的糖蛋白。SPARC具有针对多种配体的亲和性，包括阳离子(例如Ca2+，Cu2+，Fe2+)，生长因子(例如血小板衍生的生长因子(PDGF)和血管内皮生长因子(VEGF))，细胞外基质(ECM)蛋白(例如胶原I-V和胶原IX，玻连蛋白和凝血酶敏感蛋白-1)，内皮细胞，血小板，白蛋白和羟磷灰石。SPARC的表达是发育调节的，并且主要在正常发育或响应于损伤而经历重塑的组织中表达(见，例如Laneet a I.，FASEBJ.，8，163-173(1994))。在发育中的骨和牙齿中有高水平的SPARC蛋白表达。SPARC在数种攻击性癌症中上调，但是在大多数正常组织中不存在(Porter etal. , J. Histochem. Cytochem. , 43, 791 (1995)以及见下文)。在多种肿瘤(例如，膀胱、肝、卵巢、肾、肠和乳腺)中SPARC的表达被诱导。例如，在膀胱癌中，已经表明SPARC的表达与晚期癌相关。已经表明T2阶段或更高阶段的侵袭性膀胱肿瘤表达比Tl阶段的膀胱肿瘤(或较低表面的肿瘤)更高水平的SPARC,并具有更差的预后(见,例如Yamanaka et al.，J.Urology, 166，2495-2499 (2001))。在脑膜瘤中，已经表明SPARC的表达仅与侵袭性肿瘤相关(见，例如 Rempel et al. , ClincalCancer Res.，5，237-241 (1999))。也已经在 74. 5% 的原位侵袭性乳腺癌损伤(见，例如 Bellahcene, et al. , Am. J. Pathol. , 146, 95-100 (1995))和54. 2% 的浸润性乳腺导管癌(见，例如Kim et al.，J. Korean Med. Sci.，13，652-657(1998))中检测到SPARC表达。也已经表明SPARC的表达与乳腺癌中的常见的微钙化相关(见，例如Bellahcene et al.，见上文)，这说明SPARC的表达可能对于乳腺转移酶对于骨的亲和性起作用 ο 还已知 SPARC 结合白蛋白(见，例如 Schnitzer, J. Biol. Chem.，269，6072 (1994))。因此，利用SPARC在疾病中的作用、例如SPARC在一些癌症中的作用的组合物和方法是需要的。特别地，利用SPARC的结构域特异性活性、例如SPARC羧基血管生成结构域的特异性活性的组合物和方法是需要的。
技术实现思路
本专利技术提供了分离的“SPARC血管生成结构域多肽”，所述多肽的用途，以及检测和定量所述多肽的方法。此外，本专利技术提供了 “SPARC血管生成结构域多肽”的用途和检测及定量包含该结构域的多肽的方法。本专利技术提供了使用治疗法治疗患有SPARC依赖性疾病的动物的方法，包括(a)定量所述动物的疾病位点处的SPARC血管生成结构域多肽的量，以及，任选地，定量包含SPARC血管生成结构域的全长SPARC的量；(b)在一个或多个患有相同的SPARC依赖性病况或疾病的、已知响应于所述治疗法的其它动物的疾病位点处定量SPARC血管生成结构域多肽的量，以及，任选地，定量包含SPARC血管生成结构域的全长SPARC的量；(c)计算(b)中测定的SPARC血管生成结构域多肽的量的平均值，如果包括的话，计算(b)中测定的包含SPARC血管生成结构域的全长SPARC的量的平均值；(d)将(a)中测定的所述量与(c)中测定的所述平均值相比较；和(e)如果(a)中测定的所述量大于或等于(C)中测定的所述平均值，则施用所述治疗法。"SPARC依赖性疾病”意思是需要一定水平的SPARC以维持疾病或病况的疾病或病况。“一个或多个患有SPARC依赖性病况或疾病的、已知响应于所述治疗法的其它动物”意思是至少一个动物，但是也包括产生与(a)中的动物相比的统计上的显著性的任何数目。存在于疾病位点生物活组织检查材料中的SPARC血管生成结构域和SPARC血管生成结构域多肽可以通过本领域普通技术人员已知的任何适宜的方式来检测和定量，包括例如，用于常规免疫组织化学和基于溶液的测定法(例如ELISA)的针对SPARC血管生成结构域的抗体和质谱法。“疾病位点”意思是疾病为活性的解剖位置。本专利技术提供了分离的多肽，其包含缺失SEQ ID NO: I的连续氨基酸的全长SPARC 多肽，和分离的、羧基截短的SPARC多肽，其为全长SPARC多肽的羧基末端的酶消化产物并且其保留不超过5%的SEQID NO: I的血管生成活性。本专利技术提供了治疗动物中的肿瘤的方法，包括施用治疗有效量的本文公开的缺乏血管生成活性的任意一种或多种SPARC多肽，包括例如，分离的、羧基截短的SPARC多肽，其为全长SPARC多肽的羧基末端的酶消化产物并且其保留不超过5%的SEQ ID NO: I的血管生成活性、特别是SEQ ID NO:2。本专利技术提供了预测患有SPARC依赖性疾病的动物对于治疗法的阳性应答的方法，包括Ca)定量疾病位点处的SPARC血管生成结构域多肽和包含SPARC血管生成结构域的全长SPARC多肽的量；(b)将SPARC的所述量与患有SPARC依赖性疾病的、已知对该治疗法有应答的动物中存在的SPARC的量进行比较；和(0)如果包含SEQ ID NO: I的多肽的量高于或低于阈值水平，则预测对于该治疗法的阳性应答。本专利技术提供了治疗患有SPARC依赖性病况或疾病的动物的方法，包括使用免疫有效量的(即引发免疫应答的量的)包含SPARC血管生成结构域多肽的免疫原接种所述动物。本专利技术提供了治疗患有SPARC依赖性病况或疾病的动物的方法，包括向所述动物施用治疗有效量的多肽，所述多肽结合SPARC血管生成结构域、抑制SPARC血管生成结构域的活性并在疾病位点处聚集。合适的SPARC血管生成结构域结合性肽包括，例如，其中多肽缀合于化疗、放射或生物试剂。合适的SPARC血管生成结构域结合性多肽包括抗体和抗体片段。附图说明图I是显示在PC3模型中与Abraxane和Sutent —起施用的外源SPARC的效果的数据的示意图。图2图示了 HUVEC 3-D管形成测定法的结果，其表征了 SPARC的血管生成活性。图3图示了 SDS-PAGE测定法的结果，其中野生型SPARC与SPARC_d (2种C末端截短的SPARC蛋白的混合物)并排跑胶。图4是获自HUVEC 3_D管形成测定法的数据的示意图，其表征了野生型SPARC和SPARC-d。具体实施例方式人SPARC基因编码303个氨基酸的SPARC蛋白(SEQ ID NO: I)。其主要翻译产物是通过切割氨基末端信号序列而被加工的，产生SPARC的成熟形式即285个氨基酸的糖蛋白(统称“全长SPARC”形式)。切割氨基末端信号序列之后，产生了 32-kD的分泌形式，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·特里鲁，D·克瑙尔，N·德塞，
申请(专利权)人：阿布拉西斯生物科学有限责任公司，
类型：
国别省市：