一种用于体外测定牙齿充填修复材料细胞毒性的装置制造方法及图纸

一种用于体外测定牙齿充填修复材料细胞毒性的装置，包括培养井及与其对应的嵌入井，所述培养井内盛放营养液，所述嵌入井上面有保护盖、底部为屏障片且活动嵌入所述培养井内，待测材料放置在所述嵌入井内腔底部。本实用新型专利技术的嵌入井活动嵌入培养井中，培养井内的营养液通过嵌入井底部屏障片中的微小孔隙渗入嵌入井内与待测材料接触，可测定培养液中靶细胞的增殖率及观察细胞形态，判断待测材料的细胞毒性，与在体实验有更好的相关性，能更好的测定牙齿修复材料的生物相容性，且结构简单，使用方便，实验试验结果重复性好。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及ー种用于体外測定牙齿充填修复材料细胞毒性的装置。
技术介绍
牙齿修复材料是口腔医学应用最广的生物材料，随着科学技术的发展，毎年都有许多新型牙齿修复材料出现。这些材料能被临床接受的先决条件是必须经过安全性和有效性的检测与评价，其中，生物相容性的測定是确保材料能安全地应用于人体的重要保证。生物相容性是指在特定应用中，材料产生适当的宿主反应的能力。这一定义的内在含义是指某ー单个材料并不是在所有应用中均是生物可接受的。例如氢氧化钙水门汀材料作为牙齿盖髓材料是可接受的，但作为植入材料就不可接受。 在牙齿修复材料的生物相容性评价中应用了许多体外试验，其目的是尽量减少昂贵且影响因素众多的动物试验和在体试验。其中应用细胞培养技术进行的细胞毒性试验是ー项应用最广泛的体外试验方法，也是口腔材料生物相容性评价体系中重要的检测指标。该试验让培养细胞与被测材料通过一定方式接触后，測定细胞的生长数量、生长情况及活性状态来评价被测材料的细胞毒性。该试验容易实施，速度快，费用比动物试验和在体试验低很多，可以高度标准化和实验控制，结果的重复性好，并且可以严格控制以针对特定科学问题。现有用于体外測定牙齿充填修复材料细胞毒性的试验方法有3种直接接触法或浸提液法、琼脂扩散(agar diffusion)法和滤膜扩散(millipore filter)法。在直接接触法或浸提液法中，被测材料或其浸提液直接与培养细胞接触。琼脂扩散法和滤膜扩散法分别是以琼脂层和纤维素滤膜为屏障的间接接触方法，被测材料通过琼脂层或滤膜与培养细胞间接接触，材料释放的物质通过滲透、扩散的方式穿过琼脂层或滤膜，作用于其下的细胞。上述标准细胞毒性试验方法測定牙齿修复材料的细胞毒性时存在缺陷，最典型的是被测材料与细胞的接触方式与实际情况差异很大，而接触方式又是影响測定结果的重要因素。在体时，绝大多数的牙齿修复材料并不与组织细胞(主要是牙髓组织细胞)直接接触，而是被ー层牙本质隔开。因此，一般认为直接接触法所得结果并不能反映或预测材料在在体时的生物相容性。在琼脂扩散法和滤膜扩散法中，虽然被测材料与培养细胞间有屏障隔开，但这两种方法的屏障是模拟口腔黏膜，而非牙本质。在琼脂扩散法中，材料释放的物质中，只有水溶性成分可以扩散通过琼脂层，作用于其下的细胞。如果材料中的成分不能扩散过琼脂，则不能测出，尽管在体证明了其刺激性。琼脂的滲透特性与牙本质的相差太大，远不能模拟牙本质。另外，琼脂扩散法的结果是等级的半量化指标，受观察者主观性影响较大，客观性不高。滤膜扩散法所用的滤膜实际上是由醋酸纤维制成的纤维网膜，其厚度、孔隙度及滲透性均与牙本质相去甚远，而且滤膜能被ー些牙齿修复材料中的成分溶解，其适用測定的材料有限。因此，以此两种方法測定牙齿修复材料的细胞毒性结果与动物试验及在体观察差别较大，相关性较小，表现在许多牙齿修复材料体外细胞毒性试验显示较强的细胞毒性，但动物试验及在体观察却显示无刺激性。以临床上常用的氧化锌丁香油水门汀为例，现有的体外细胞毒性试验结果显示该材料有严重的细胞毒性，而动物试验和长期临床应用表明，该材料对牙髓组织刺激性小，而且还具有安抚收敛作用。导致体外细胞毒性试验结果与动物试验或在体观察相关性差的重要原因之ー是体外细胞毒性试验中材料和靶细胞的接触方式及牙本质屏障的缺失。因为牙本质能形成材料成分必须通过才能到达牙髓组织的屏障，研究表明，厚度为O. 5^2mm的牙本质屏障，能有效调节材料对牙髓的影响。为了模拟在体情况，许多学者用离体牙制备牙本质片作为屏障用于体外细胞毒性试验中，所得结果与动物试验及在体研究的相关性有明显的提高。但是，由于人离体牙本质的通透性因牙齿不同而变化很大，甚至同一颗牙齿不同部位的牙本质的渗透性也不同，因此，在用牙本质片作为屏障时，需要广泛收集并测定牙本质片的滲透性，以筛选滲透率相近的牙本质片来进行试验。然而，由于符合要求的新鲜人离体牙越来越难以获得，获得足够数量且渗透率相近的牙本质片更不易得到。若采用易于获得的动物牙齿(如牛牙)，也存在动物牙本质与人牙本质在结构和渗透性方面差异大的问题。这些原因使得以离体牙本质片作为屏障的体外细胞毒性试验难以推广。·
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种用于体外測定牙齿充填修复材料细胞毒性的装置，能够模拟牙齿充填材料与牙髓细胞的接触状态，解决现有技术难以有效预测牙齿修复材料生物相容性的问题。本技术的目的是这样实现的，一种用于体外測定牙齿充填修复材料细胞毒性的装置，包括培养井及与其对应的嵌入井，所述培养井内盛放营养液，所述嵌入井上面有保护盖、底部为屏障片且活动嵌入所述培养井内，待测材料放置在所述嵌入井内腔底部。所述嵌入井底部位于培养井下四分之ー处。所述培养井的壁厚为l_2mm。所述培养井底部为底盘，所述底盘上有多个培养井且为一体。所述屏障片为离体人牙本质片或者离体牛牙本质片或者与人牙本质相同通透性的陶瓷片。所述陶瓷片为有孔隙的羟基磷灰石陶瓷片，所述孔隙的平均直径为O. Γδμπι.进ー步，所述孔隙的平均直径为O. 2^2 μ m。再进ー步，所述孔隙的平均直径为O. 5^1 μ m。所述屏障片通过无毒粘结剂与嵌入井底部粘接。所述底盘、培养井、嵌入井及保护盖均为光学级聚苯こ烯树脂材料。本技术具有如下有益效果，本技术的嵌入井活动嵌入培养井中，培养井内的营养液通过嵌入井底部屏障片中的微小孔隙渗入嵌入井内与待测材料接触，待测材料中的可析出成分析出，再通过嵌入井底部屏障片中的微小孔隙渗透或扩散进入细胞培养井内作用于营养液中的靶细胞，即可測定培养液中靶细胞的増殖率及观察细胞形态，判断待测材料的细胞毒性。本技术与在体实验有更好的相关性，能更好的測定牙齿修复材料的生物相容性，且结构简单，使用方便，实验试验结果重复性好。附图说明图I为本技术实施例结构示意图；图2为本技术实施例保护盖结构示意图；图3为本技术实施例嵌入井结构示意图；图4为本技术实施例培养井结构示意图。图中，I.底盘、2.嵌入井、3.保护盖、4.培养井、5.屏障片、6.待测材料、7.营养液。具体实施方式实施例1，一种用于体外測定牙齿充填修复材料体外细胞毒性的装置，包括用于培养细胞的培养井4、培养井4下面的底盘I、嵌入井2和保护盖3，底盘I位于装置底部，底盘I上有24个培养井4，分3排排列，每排6个，共3排。嵌入井为24，其分布及位置关系与培养井4 对应。嵌入井2嵌入培养井4内，保护盖3覆盖于嵌入井2上。培养井4与底盘I是一体的，培养井4的壁厚为I. 5mm，嵌入井2是活动的，当其嵌入培养井4内吋，其底部位于培养井4内下四分之ー处。嵌入井2的底部为屏障片5，屏障片5为具有与人牙本质相同通透性的陶瓷片，陶瓷片上有孔隙，孔隙的平均直径为3 μ m。屏障片5通过粘接剂粘接到嵌入井2的底部，所用的粘接剂具有非常小的细胞毒性，可选用的粘接剂有纤维蛋白类医用粘接剂、氰基丙烯酸酯类医用粘接剂。培养井4的底盘I上可以制作多个培养井4，例如24个，48个，这些培养井4均与底盘I为一体。每个培养井4对应的嵌入井2可以是单个的，嵌入井2也可以连接为一体，成为嵌入井盘，嵌入井2的数量及位置分布与培养井4相对应。嵌入井2嵌入培养井4后，其底部与培养井本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于体外测定牙齿充填修复材料细胞毒性的装置，其特征在于：包括培养井（4）及与其对应的嵌入井（2），所述培养井（4）内盛放营养液（7），所述嵌入井（2）上面有保护盖（3）、底部为屏障片(5)且活动嵌入所述培养井(4)内，待测材料（6）放置在所述嵌入井（2）内腔底部。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵信义，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学口腔医院，
类型：实用新型
国别省市：