有利于超声介导基因转染的操作平台制造技术

本实用新型专利技术公开了一种有利于超声介导基因转染的操作平台，包括可温控水槽，还包括超声发生器、与超声发生器相连的超声探头、设置在超声探头正上方的放置平台、在放置平台上放置的培养板，超声探头固定在可温控水槽内，培养板上设有培养孔，培养孔对准超声探头中心，培养孔的底部与超声探头密封贴合。本实用新型专利技术的结构简单合理，整个过程在可温控水槽内完成，可以有效地保证细胞不受污染，为高效转染提供可靠的基础。超声探头与培养板上的培养孔的底部密封贴合，可以有效防止不同孔之间的干扰和使用不同的辐射条件，有效地降低细胞死亡率、提高基因的转染率，为非侵袭性、高效、靶向基因治疗提供坚实的基础。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及医学中使用的器具领域，具体涉及ー种有利于超声介导基因转染的操作平台。
技术介绍
基因治疗领域不断取得进展，其在肿瘤和基因疾病的治疗上有广阔的应用前景，其主要障碍并非由于缺少理想的目的基因，而是缺乏安全有效地基因传输方法，将DNA载体有效地导入组织和器官。基因传输是生物医学研究的ー个有力工具，高效的基因转移方式对于基础和临床研究都很重要，具有很大的潜力。现今，基因疗法成功的关键是将基因导入各种不同的细胞、组织和器官，但面临的主要挑战是研制安全有效地载体，而不引起任何与此有关的致病性影响。 目前，较广泛使用的基因传输方法包括重组病毒、磷酸钙共沉淀、脂质体和高分子阳离子聚合物。病毒载体可实现较高的转染效率，然而最关注的仍然是其临床安全性和长期疗效。ー些非病毒的基因传输方已用于基因转染，如电穿孔、显微注射、高压注射等。而且，由于其低毒性和能装载大分子DNA，可能更具有发展应用的前景。电穿孔可有效地转移基因，但在临床上用于基因转染的电脉冲仍不够安全。但非病毒载体的基因转染率不高，在体内尤为明显，其安全性、有效性有待验证。因此，病毒载体的潜在危险或非病毒载体的低转染率使基因疗法的临床应用受到限制。近年来，超声因其具有靶向传输基因至细胞和组织的潜能而倍受关注，已成为一种新型、简单、有效地基因输送方式，研究表明，超声辐照可诱发空化效应，利用声能诱导细胞膜短暂性开放，使膜通透性増加，有利于大分子物质的胞内传输，且可避免其他转染方法的副作用，是很有前景的非病毒基因传输方法；同时，超声可靶向聚焦于组织或器官，可能是体内基因转染的首选方法。为提高该输送系统的转染率，可利用超声祀向微泡破坏(Ultrasound-targetedmicrobubble destruction, UTMD)方法运送特异性药物或基因，或诱导产生有一定治疗作用的生物学效应是迅速发展起来的研究領域，在许多研究中，基因转染效率提高的同时也伴随着细胞存活率大幅度的下降，导致实验结论缺乏一致。另外，转染方法各异、參数多祥，超声作用于粘附在培养板的细胞时可导致细胞脱离。尚未有关细胞脱离对超声介导基因转染、细胞存活等方面影响的方法优化。为获得较高基因转染效率和促使这项技术接近临床，需要对有关UTMD參数与细胞培养方法进行系统研究，以减少对细胞活力和DNA完整性的影响。解决这些问题对UTMD介导的基因治疗及其实际应用有深远的意义。
技术实现思路
为解决上述问题，本技术的目的是提供ー种有利于超声介导基因转染的操作平台，其可以有效地降低细胞死亡率、提高基因的转染率，为非侵袭性、高效、靶向基因治疗提供坚实的基础。实现本技术目的的技术方案是提供ー种有利于超声介导基因转染的操作平台，包括可温控水槽，还包括超声发生器、与所述超声发生器相连的超声探头、设置在所述超声探头正上方的放置平台、在所述放置平台上放置的培养板，所述超声探头固定在所述可温控水槽内，所述放置平台设置在所述可温控水槽内、所述超声探头的正上方，所述培养板上设有培养孔，所述培养孔对准所述超声探头中心，所述培养孔的底部与所述超声探头密封贴合。进ー步，所述超声探头固定在所述可温控水槽的底部。进ー步，还设有让所述培养板做缓慢圆周移动的圆周移动控制装置。进ー步，所述可温控水槽的内壁上设有吸声层。 进ー步，还包括測量所述可温控水槽内水温的温度计。进ー步，所述培养板上设有24个培养孔。本技术具有积极的效果本技术的结构简单合理，包括可温控水槽，还包括超声发生器、与所述超声发生器相连的超声探头、设置在所述超声探头正上方的放置平台、在所述放置平台上放置的培养板，所述超声探头固定在所述可温控水槽内，所述放置平台设置在所述可温控水槽内、所述超声探头的正上方，所述培养板上设有培养孔，所述培养孔对准所述超声探头中心，所述培养孔的底部与所述超声探头密封贴合。整个过程在可温控水槽内完成，可以有效地保证细胞不受污染，为高效转染提供可靠的基础。超声探头与培养板上的培养孔的底部密封贴合，可以有效防止不同孔之间的干扰和使用不同的辐射条件，有效地降低细胞死亡率、提高基因的转染率，为非侵袭性、高效、靶向基因治疗提供坚实的基础。本技术中，述超声探头固定在所述可温控水槽的底部，方便细胞的培养。还设有让所述培养板做缓慢圆周移动的圆周移动控制装置。可以在辐射过程中，使培养板在与超声探头紧贴合后，能够相对探头表面做缓慢圆周移动，使细胞受照均匀，避免混杂反射和驻波，为细胞培养提高良好环境条件，可以有效地降低细胞死亡率、提高基因的转染率。本技术中，可温控水槽的内壁上设有吸声层。可以吸收向外辐射的超声波，降低了环境污染，还包括測量所述可温控水槽内水温的温度计，可以精确的測量出可温控水槽内的水温，保证了细胞培养所需的环境条件。附图说明为了使本技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据具体实施例并结合附图，对本技术作进ー步详细的说明，其中图I为本技术的结构示意图。图2为图I所示有利于超声介导基因转染的操作平台的培养板的结构示意图。图3为图I所示有利于超声介导基因转染的操作平台的超声探头与培养孔贴合处分离示意图。具体实施方式(实施例I)图I至图3显示了本技术的ー种具体实施方式，其中图I为本技术的结构示意图，图2为图I所示有利于超声介导基因转染的操作平台的培养板的结构示意图，图3为图I所示有利于超声介导基因转染的操作平台的超声探头与培养孔贴合处分离示意图。见图I至图3，ー种有利于超声介导基因转染的操作平台，包括可温控水槽1，还包括超声发生器2、与超声发生器2相连的超声探头3、设置在超声探头3正上方的放置平台4、在放置平台4上放置的培养板5，超声探头3固定在可温控水槽I内，放置平台4设置在可温控水槽I内、超声探头3的正上方，培养板5上设有培养孔6，培养孔6对准超声探头3中心，培养孔6的底部与超声探头3密封贴合。超声探头3固定在可温控水槽I的底部。还设有让培养板5做缓慢圆周移动的圆周移动控制装置7。可温控水槽I的内壁上设有吸声层8。还包括測量可温控水槽I内水温的温度计9。培养板5上设有24个培养孔。在辐照前Id用O. 25%胰酶消化细胞，将其间隔交叉接种在24孔培养板，细胞密度为I X IO6个/ml，培养24小时将达到80% 90%融合。将细胞用PBS冲洗后，每孔加无血清培养基 300 μ 1，加入 DsRed 质粒(30 μ g/ 孔)与 SonoVue 微泡(5 μ g/ μ 1，100 μ I/ 孔)的混合液后辐照。超声辐照后，部分贴壁细胞可从培养孔上脱离。超声处理后4h，存活细胞仍粘附在培养板底部，通过更换培养基(含10% FCS)，PBS洗涤细胞，清除非存活细胞和细胞碎片，使死亡、脱离的细胞与存活细胞分离。显然，本技术的上述实施例仅仅是为清楚地说明本技术所作的举例，而并非是对本技术的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而这些属于本技术的实质精神所引伸出的显而易见的变化或变动仍属于本技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种有利于超声介导基因转染的操作平台，包括可温控水槽，其特征在于：还包括超声发生器、与所述超声发生器相连的超声探头、设置在所述超声探头正上方的放置平台、在所述放置平台上放置的培养板，所述超声探头固定在所述可温控水槽内，所述放置平台设置在所述可温控水槽内、所述超声探头的正上方，所述培养板上设有培养孔，所述培养孔对准所述超声探头中心，所述培养孔的底部与所述超声探头密封贴合。

【技术特征摘要】
1.一种有利于超声介导基因转染的操作平台，包括可温控水槽，其特征在于还包括超声发生器、与所述超声发生器相连的超声探头、设置在所述超声探头正上方的放置平台、在所述放置平台上放置的培养板，所述超声探头固定在所述可温控水槽内，所述放置平台设置在所述可温控水槽内、所述超声探头的正上方，所述培养板上设有培养孔，所述培养孔对准所述超声探头中心，所述培养孔的底部与所述超声探头密封贴合。2.根据权利要求I所述的有利于超声介导基因转染的操作平台，其特征在于所述超声探头...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈智毅，梁琨，邱日想，林雁，杨凤，
申请(专利权)人：陈智毅，
类型：实用新型
国别省市：