产生针对结核病的免疫应答的方法技术

本文公开了产生针对结核分枝杆菌(Mycobacterium?tuberculosis)(Mtb)的免疫应答的方法。在几个实例中，所述免疫应答是保护性免疫应答。在其他实施方案中，公开了抑制Mtb感染、预防Mtb感染或治疗Mtb感染的方法。还公开了用于抑制、预防和/或治疗结核病的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及免疫学领域，更具体地涉及在受试者中产生针对结核病抗原的免疫应答的方法。_4] 政府资助声明本专利技术是在国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的基金No.HSSN266200400081C的美国政府资助下完成的。美国政府在本专利技术中享有某些权利。·
技术介绍
分枝杆菌属于好氧细胞内细菌生物属，在感染宿主后，存活于单核细胞和巨噬细胞的内体区室中。人分枝杆菌疾病包括结核病(由结核分支杆菌(M. tuberculosis)引起)、麻风病(由麻风分枝杆菌(M. leprae)引起)、Bairnsdale溃瘍病(由溃瘍分枝杆菌(M. ulcerans)引起)，以及由海鱼分枝杆菌(M. marinum)、堪萨斯分枝杆菌(M. kansasii)、瘰疬分枝杆菌(M. scrofulaceum)、苏尔加分枝杆菌(M. szulgai )、蟾蜍分枝杆菌(M. xenopi)、偶发分枝杆菌(M. fortuitum)、龟分枝杆菌(M. chelonei)、嗜血分枝杆菌(M. haemophilum)和胞内结核杆菌(M. intracellulare)引起的多种感染(参见Wolinsky,《微生物学包括免疫学和分子遗传学》(第三版)(Microbiology: Including Immunology and MolecularGenetics, 3rd Ed. , Harper&Row, Philadelphia, 1980)中的第 37 章)。世界人口中的三分之一携带有结核分枝杆菌，处在患结核病(TB)的风险中。在免疫受损的患者中，结核病几乎以对数速率增加，并出现了多药耐受菌株。此外，以前被认为是非病原性菌株的分枝杆菌菌株(例如鸟分枝杆菌(M. avium))，现在已经变成了免疫抑制的AIDS患者的主要杀手。此外，目前的分枝杆菌疫苗或者不充分(例如用于结核分枝杆菌的BCG疫苗)，或者尚不存在(例如对于麻风分枝杆菌)(Kaufmann, Microbiol.Sci. 4:324-328, 1987 ；美国国会技术评估办公室(U. S. Congress, Office ofTechnology Assessment)的《结核病的持续挑战》(The Continuing Challenge ofTuberculosis, 0TA-H-574, U. S. Government Printing Office, Washington, D. C. , 1993)第62-67 页)。抑制结核病的传播需要有效的疫苗接种和精确、早期诊断该疾病。目前，用活菌细进行的疫苗接种是诱导保护性免疫的最有效方法。用于该目的的最常见的分枝杆菌是卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)-一种牛型分枝杆菌(Mycobacterium bovis))的无毒菌株。然而，BCG的安全性和效力存在争议，并且一些国家，例如美国，并不用于接种大众。结核分枝杆菌(Mtb)特异性⑶4+和⑶8+T细胞对于有效控制Mtb感染是关键的。在小鼠模型中，将CD4+T细胞被动转移到被亚致死辐射的动物中，使得它们对Mtb感染的易感性降低了 (Orme, J Immunol. 140:3589-3593，1988)。其中 CD4 基因或 II 类 MHC 分子的基因被破坏的小鼠以及CD4+T细胞被剥夺的野生型小鼠，证明了对Mtb感染的易感性增加(Flory等，JLeukoc Biol. 51:225-229，1992)。在人类中，人类免疫缺陷病毒感染的个体在暴露于Mtb之后非常容易发展出结核病(TB)，支持了⑶4+T细胞的重要作用(Hirsch等，JInfect Dis. 180:2069 - 2073，1999)。CD8+T细胞对于有效的T细胞免疫也是重要的(参见 Lazarevic 和 Flynn, Am J Respir Crit Care Med. 166:1116-1121，2002)。在人类中，Mtb特异性⑶8+T细胞已经在Mtb感染的个体中被鉴定，并包括经典的HLA-Ia限制的(参见例如 Lewinsohn 等，J Immunol. 165:925-930，2000)和非经典的 HLA-Ib 分子 HLA-E 限制的(Lewinsohn 等，J Exp Medl87:1633-1640，1998)CD8+T 细胞。但是，没有有效诱导针对Mtb的免疫应答例如CD8应答的疫苗或治疗策略。
技术实现思路
因此，本领域需要能够产生针对Mtb的免疫应答、可以用于治疗和/或防护Mtb感染的药剂。 本文公开了产生针对结核分枝杆菌(Mtb)的免疫应答的方法。本文还提供了在受试者中治疗Mtb感染、抑制Mtb感染或预防Mtb感染的方法。Mtb感染可以是潜伏性或活动性的。在几个实施方案中，所述方法包括给予所述受试者治疗有效量的多肽或编码该多肽的多核苷酸，其中所述多肽含有SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6、SEQID NO:7, SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9, SEQ ID NO: 10, SEQID NO: IUSEQ ID NO: 12,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO: 14,SEQ ID NO: 15,SEQ ID NO: 16,SEQID NO: 17或SEQ ID NO: 18中显示的至少一个氨基酸序列。在其他实施方案中，所述方法包括了给予所述受试者治疗有效量的多肽，该多肽含有SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2,SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:8,SEQ ID NO:9、SEQ ID NO: 10,SEQ ID NO: IUSEQ ID NO: 12,SEQ ID NO: 13,SEQ ID NO: 14,SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17或SEQ ID NO: 18中显示的至少一个氨基酸序列的至少9到20个连续的氨基酸，其中所述9到20个连续氨基酸特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)。在一些实例中，所述多肽包含所述多肽的保守变体(例如，一个或多个保守氨基酸置换)。在几个实例中，所述免疫应答是保护性免疫应答。在其他实施方案中，公开了抑制或预防Mtb感染或者治疗Mtb感染的方法。本文描述了分离的包含SEQ ID NO: 1-18中显示的至少一个氨基酸序列的9到20个连续的氨基酸的多肽，其中9到20个连续的氨基酸特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)，其中所述分离的多肽不包含SEQ ID NO: 1-18中显示的全长氨基酸序列的任一个。还公开了编码这些多肽的核酸、包含这些核酸的载体、包含这些核酸的宿主细胞以及包含这些多肽、核酸和/或宿主细胞的免疫原性组合物。还描述了包含治疗有效量的这些多肽、核酸和/或宿主细胞的药物组合物。根据下面的几个实施方案的详细描述并同时参考附图，本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.11.20 US 61/263,2061.包含治疗有效量的多肽或编码所述多肽的多核苷酸的组合物用于在受试者中产生对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的免疫应答的用途,其中所述多肽包含(a)SEQ ID NO: 6,SEQ ID NO: 2,SEQ ID NO: USEQ ID NO: 3,SEQ ID NO: 4,SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ IDN0:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID N0:11、SEQ ID NO:12,SEQID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15 或 SEQ ID NO: 16 显示的氨基酸序列的至少一个；或(b)SEQID N0:6、SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:USEQ ID NO:3,SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ IDN0:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID N0:11、SEQ ID NO:12,SEQID NO: 13,SEQ ID NO: 14,SEQ ID NO: 15或SEQ ID NO: 16显示的氨基酸序列的至少一个中至少9到20个连续氨基酸，其中所述9到20个连续氨基酸可特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)。2.权利要求I的用途，包括给予所述受试者治疗有效量的所述多肽。3.权利要求I的用途，其中所述多肽共价连接至载体。4.权利要求I的用途，其中所述多肽包含下述氨基酸或由下述氨基酸组成SEQIDNO:2的氨基酸1-15或SEQ ID NO:2的氨基酸141-149。5.权利要求I的用途，其中所述多肽由下述组成 (a)SEQ ID NO: 1-16显示的氨基酸序列的至少一个；或 (b)SEQID NO: 1-16显示的氨基酸序列的至少一个中至少9个连续氨基酸，其中所述至少9个连续氨基酸可特异性结合I类MHC。6.权利要求I至5任一项的用途，还包括给予治疗有效量的佐剂。7.权利要求I至5任一项的用途，其中所述免疫应答是保护性免疫应答。8.权利要求I至5任一项的用途，其中所述受试者有感染Mtb的风险。9.权利要求I至5任一项的用途，其中所述受试者感染Mtb。10.权利要求9的用途，其中所述受试者具有潜伏性Mtb感染。11.一种分离的多肽，其包含SEQ ID NO: 1-16显示的氨基酸序列的至少一个中的9到20个连续氨基酸，其中所述9到20个连续氨基酸可特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)，其中所述分离的多肽不包含SEQ ID NO: 1-16显示的任一氨基酸序列。12.权利要求10的分离的多肽，由SEQID NO: 1-16显示的氨基酸序列的至少一个中9到20个连续氨基酸组成，其中所述9到20个连续氨基酸可特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)。13.权利要求11的分离的多肽，其中所述多肽包含SEQID NO: 2的氨基酸1_15或SEQID NO:2 的氨基酸 141-149。14.一个分离的多核苷酸,其编码权利要求11至13任一项的多肽。15.权利要求14的多核苷酸，其与启动子可操作地连接。16.—种载体,其包含权利要求15的多核苷酸。17.权利要求16的载体，其中所述载体是质粒载体。18.权利要求17的载体，其中所述质粒载体在酵母中表达。19.权利要求16的载体,其中所述载体是病毒载体。20.权利要求19的载体，其中所述载体是逆转录病毒、正痘病毒、鸟痘病毒、禽痘病毒、羊痘病毒、猪痘病毒、腺病毒、疱疹病毒、α -病毒、杆状病毒、辛德比斯病毒、牛痘病毒或脊髓灰质炎病毒载体。21.—种分离的宿主细胞，其包含权利要求16-20任一项的载体。22.权利要求21的分离的宿主细胞，其中所述宿主细胞是分枝杆菌。23.一种药物组合物，其包含权利要求11-13任一项的多肽和可药用载体。24.一种药物组合物，其包含在可药用载体中的治疗有效量的权利要求21的宿主细胞。25.一种药物组合物，其包含在可药用载体中的治疗有效量的权利要求14的多核苷酸。26.治疗有效量的多肽或编码所述多肽的多核苷酸用于治疗被结核分枝杆菌感染的受试者的用途，其中所述多肽包含(a)SEQID NO:6、SEQ ID NO:2,SEQ ID NO: USEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:ll、SEQ ID NO:12,SEQID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15 或 SEQ ID NO: 16 显示的氨基酸序列的至少一个；或(b)SEQID NO:6,SEQ ID NO:2,SEQ ID NO: USEQ ID NO:3,SEQ ID N0:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:ll、SEQ ID NO:12,SEQID NO: 13,SEQ ID NO: 14,SEQ ID NO: 15或SEQ ID NO: 16显示氨基酸序列的至少一个中至少9到20个连续氨基酸，其中所述9到20个连续氨基酸可特异性结合I类主要组织相容性复合物(MHC)。27.权利要求26的用途，其中所述多肽包含下述氨基酸或由下述氨基酸组成SEQIDNO:2的氨基酸1-15或SEQ ID NO:2的氨基酸141-149。28.权利要求26或27的用途，其中所述被结核分枝杆菌感染的受试者没有结核病的症状。29.权利要求28的用途，其中治疗所述受试者包括抑制所述受试者中结核病的发展。30.治疗有效量的多肽或编码所述多肽的多核苷酸用于抑制受试者的结核分枝杆菌感染的用途，其中所述多肽包含(a)SEQ ID NO:6,SEQ ID NO: 2,SEQ ID NO: USEQ ID NO:3,SEQ ID N0:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:ll、SEQ ID NO:12,SEQID NO: 13、SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15 或 SEQ ID NO: 16 显示的氨基酸序列的至少一个；或(b)SEQID NO:6,SEQ I...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·M·乐文索恩，D·A·乐文索恩，
申请(专利权)人：俄勒冈健康科学大学，由退伍军人事务部代表的美国政府，
类型：
国别省市：