一株诱导降香黄檀形成降香的真菌制造技术

本发明专利技术公开了一株能够诱导降香黄檀形成中药降香的真菌菌株，它是保藏编号为CGMCC?No.6379的镰孢属真菌JXMFC-5（Fusariumsp.）；它的培养特性是：在PDA培养基上菌落为白色，气生菌丝为毡状，菌落背面为微黄色，生长1周菌落直径为6~8cm，小型分生孢子单孢，椭圆形或长圆形，稍弯曲，（7.92~10.64）×（2.1~3.76）μm。该菌株接种到降香黄檀树的树干，能够诱导植物形成中药降香。该菌株的应用，既能够快速解决降香资源紧缺矛盾；又利于合理开发降香黄檀树资源，具有重要的经济、社会和生态效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
，具体地说涉及一株能够诱导降香黄檀形成降香的真菌。
技术介绍
降香黄檀odor if era T. Chen,又名降香、花梨母(海南),豆科蝶形花亚科黄檀属常绿乔木，是我国5属8类34种珍贵红木品种之一，也是海南省特有的濒危树种，属国家二级保护植物，其树干和根的干燥心材为名贵中药“降香”。降香具有行气活血，止痛、止血的功效，可用于脘腹疼痛，肝郁肋痛，胸痹刺痛，跌打损伤，外伤出血等病症，入药始见于我国唐代，在传统中医学和藏医学中已有上千年的历史。《中华人民共和国药典》从 1985年版开始，规定降香黄檀为降香的基源植物。由于降香价格高,市场需求极大,近年来降香黄檀遭到掠夺式砍伐，野生资源趋于枯竭。近年来，为保护濒危的降香黄檀自然资源，并实现对资源的可持续利用，除产区海南省外，在广东、广西、云南等省已成功引种降香黄檀，并建成了一些规模化的人工种植基地。自然条件下，降香的产生过程十分缓漫，一般生长71年的降香黄檀主干开始形成心材，二十年左右才能积累到一定数量以供药用，结香过程往往长达几十年甚至上百年，不能满足社会的用药需求。目前，生产上主要靠降香黄檀自然生长形成药材，生产周期过长是其最大的缺陷。因此，充分利用降香黄檀资源，提高结香效率，加快结香过程，增加产量，缓解药材供需矛盾，是当前降香生产上亟待解决的关键问题。经文献检索，尚未见到利用真菌诱导降香黄檀生产中药降香的相关公开报道。利用微生物来提高降香产量，改善品质，缩短生产周期，是最有应用前景的途径之一，适用于大规模标准化、商品化生产，对降香黄檀资源的保护、开发和利用提供有效的途径，具有重要的经济、社会和生态效益。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株能够诱导降香黄檀形成降香的真菌，该株真菌菌株是从降香黄檀的结香部位分离得到的，它能诱导降香黄檀树干分泌形成中药降香。为实现上述目的，本专利技术采用的技术步骤是先培养真菌，再将真菌接种到降香黄檀树的树干上。经过一段时间后，在接种部位的周围会产生中药降香，该物质燃烧时能产生降香燃烧特有的辛辣香气。本专利技术采用的一株真菌经鉴定为镰孢ipusarium sp.),保藏编号CGMCCNo. 6379。这株真菌于2012年7月17日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏单位地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所。真菌JXMFC-5的培养特性为在PDA培养基上菌落为白色，气生菌丝为毡状，菌落背面为微黄色，生长I周菌落直径为6 8cm，小型分生孢子单孢，椭圆形或长圆形，稍弯曲，(7. 92 10. 64) X (2. I 3. 76) μ m。具体地说，本专利技术的培养技术步骤如下 将由降香黄檀莖干结香部位分离得到的镰孢(Fusarium邓·~)属真菌JXMFC-5自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接于PDA培养基的平皿中，25°C恒温培养Γ7天，然后转接于锯末-麦麸固体培养基中，恒温培养15 35天；锯末-麦麸培养温度为22 28°C。将上述培养的菌种接种到锯末-麦麸复合固体培养基中进行培养，待菌丝长到培养基三分之二之后就可以作为接菌菌株使用；锯末-麦麸复合固体培养基中锯末-麦麸的体积比为1:1。具体实施例方式一株诱导降香黄檀形成降香的真菌，其培养方法为先将这株真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接于PDA培养基的平皿中，25°C恒温培养Γ7天，然后转接于锯末-麦麸固体培养基中，恒温培养15 35天,培养温度为22 28°C ;锯末-麦麸复合固体培 养基中锯末-麦麸的体积比为1:1，待菌丝长到培养基三分之二之后就可以作为接菌菌株使用。实施例I PDA培养基平皿中培养的真菌JXMFC-5接种在锯末-麦麸复合固体培养基上生长15天，备用。选取树龄为5年的降香黄檀树，用直径为Icm的钻头在树干上钻孔3个，孔深为2 3cm，各个孔洞上下间的间隔约为10cm，左右间隔约为7cm，每个孔洞各接入O. 8^1. 2g上述培养15天的真菌JXMFC-5。接种4个月后进行观察接入真菌JXMFC-5的孔洞周围均有紫褐色的降香产生，从孔洞周围取下的木料燃烧时，产生浓烈的独特的降香香味，且其醇溶性固形物含量达到10%以上，符合药典规定要求。比较例I PDA培养基平皿中培养的真菌JXMFC-5接种在锯末-麦麸复合固体培养基上生长20天，备用。选取树龄为6年的降香黄檀树，用直径为Icm的钻头在树干上钻孔6个，孔深为2 3cm，各个孔洞上下间的间隔约为15cm，左右间隔约为6cm，其中3个孔洞各接入O. 8^1. 2g上述培养20天的真菌JXMFC-5，另外3个孔洞各注射5%硫酸锌5ml。接种4个月后进行观察接入真菌JXMFC-5的孔洞周围均有紫褐色的降香产生；注射5%硫酸锌的孔洞周围有浅黄色的降香产生。从孔洞周围取下木料燃烧时，JXMFC-5形成的紫褐色的降香产生较浓烈的独特的降香香味。按照2010年版药典规定的热浸法测定降香醇溶性浸出物，各称取接种真菌JXMFC-5 4个月形成的降香、5%硫酸锌诱导形成的降香和市售降香O. 3g，精密称定(准确至O. OOOlg)，每个样做三个重复，置IOOml的锥形瓶中，精密加乙醇30ml，密塞，称定重量，静置I小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸I小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液10ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105°C干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量(％)。其测定结果如下表表I不同处理诱导形成的降香与市售降香的醇溶性浸出物含量权利要求1.一株诱导降香黄檀形成降香的真菌，它是保藏编号为CGMCC No. 6379的镰孢属真菌JXMFC-5 (.Fusarium sp.);它的培养特性是在PDA培养基上菌落为白色，气生菌丝为毡状，菌落背面为微黄色，生长I周菌落直径为6 8cm，小型分生孢子单孢，椭圆形或长圆形，稍弯曲，(7. 92 10. 64) X (2. I 3. 76 ) μ m。2.如权利要求I所述的真菌，其培养方法为先将这株真菌自低温保藏的斜面试管菌种活化后，转接于PDA培养基的平皿中，25°C恒温培养Γ7天，然后转接于锯末-麦麸固体培养基中，恒温培养15 35天，培养 温度为22 28°C ;待菌丝长满培养基三分之二之后就可以作为接菌菌株使用。3.如权利要求I所述的真菌，其特征在于它能诱导降香黄檀树产生中药降香。全文摘要本专利技术公开了一株能够诱导降香黄檀形成中药降香的真菌菌株，它是保藏编号为CGMCC No.6379的镰孢属真菌JXMFC-5(Fusariumsp.)；它的培养特性是在PDA培养基上菌落为白色，气生菌丝为毡状，菌落背面为微黄色，生长1周菌落直径为6~8cm，小型分生孢子单孢，椭圆形或长圆形，稍弯曲，(7.92~10.64)×(2.1~3.76)μm。该菌株接种到降香黄檀树的树干，能够诱导植物形成中药降香。该菌株的应用，既能够快速解决降香资源紧缺矛盾；又利于合理开发降香黄檀树资源，具有重要的经济、社会和生态效益。文档编号C12R1/77GK102827779SQ2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株诱导降香黄檀形成降香的真菌，它是保藏编号为CGMCC？No.6379的镰孢属真菌JXMFC？5（Fusarium？sp.）；它的培养特性是：在PDA培养基上菌落为白色，气生菌丝为毡状，菌落背面为微黄色，生长1周菌落直径为6~8cm，小型分生孢子单孢，椭圆形或长圆形，稍弯曲，（7.92~10.64）×（2.1~3.76？）μm。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张霖，郭顺星，孙思胜，吴育槟，翁飞鹏，陈晓梅，吴俊强，陈德丰，
申请(专利权)人：广东志康药业股份有限公司，中国医学科学院药用植物研究所，
类型：发明
国别省市：