一种饲用复合小肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种饲用复合小肽的制备方法，包括如下步骤：1）将蛋白原料、碳源和水配制成培养液，灭菌；2）将芽孢菌和蛋白酶接到灭菌后的培养液中，酶解发酵或发酵酶解，得到小肽发酵液；3）将小肽发酵液干燥，得到饲用复合小肽。本发明专利技术方法制备得到的复合小肽分子量主要集中在238～568Da，约2～5肽。小肽得率占蛋白质含量的35%以上。复合小肽风味独特、口感好，可用作饲料添加剂，提高动物动物体的生产性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
小肽(P印tides)是由两个以上的氨基酸组成，有二肽到多肽之分。小肽作为蛋白质的主要消化产物，在氨基酸消化、吸收以及动物营养代谢中起着重要的作用。研究表明，小肽和氨基酸的混合物在人体的吸收率和吸收速度都比单纯氨基酸佳，不仅如此，小肽还能在肠道内保护易被破坏的氨基酸。此外，单纯的氨基酸在体内根据需要新组成肽和蛋白质，而小肽和氨基酸的混合物可省去一部分重新组合的过程，因此，它的生物效价更高。小肽可促进动物对矿物元素的吸收利用，其促进作用主要来源于酪蛋白肽的水解产物，由酶解酪多聚谷蛋白获得的肽可结合和运输二价矿物离子。小肽的氨基酸残基可与金属离子螯合，可以避免肠腔中颉颃因子及其他影响因子对矿物元素的沉淀或吸附作用，直接到达小肠刷状缘，并在吸收位点处发生水解，从而增加矿物质元素的吸收。小肽具有生理调节作用。它可以通过诱导小肠中一些酶活性的提高，而使小肠消化功能发育提前，促进动物体对营养物质的消化吸收，从而提高动物体的免疫机能和生产性能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供。本专利技术所采用的技术方案是 ，包括如下步骤 1)将蛋白原料、碳源和水配制成培养液，灭菌； 2)将芽孢菌接种到灭菌后的培养液中，30 37°C下振荡培养18 30h后，加入蛋白酶，35 50°C，pH6. O 7. 5，继续酶解6 12h，得到小肽发酵液；或者是往培养液中加入蛋白酶，35 50°C，pH6. O 7. 5，酶解6 12h后，接种芽孢菌，30 37°C下继续振荡培养18 30h，得到小肽发酵液； 3)将小肽发酵液干燥，得到饲用复合小肽。蛋白原料为豆柏、大米蛋白粉、小麦蛋白粉、玉米蛋白粉、棉柏、花生柏、马铃薯蛋白、菜柏、大豆浓缩蛋白中的至少一种或几种组合。碳源为葡萄糖、蔗糖、淀粉中的至少一种。以上原料均可在原料市场购得。每IOOml培养液中，含有蛋白原料20 30g、碳源O. I lg。 芽孢菌为地衣芽孢杆菌QBaciIlus Iicheniformis)或/和枯草芽孢杆菌{BeilIus subtilis、或 I 和纳豆芽抱杆菌Cfeci77w5· natto、。芽孢菌的接种浓度为5 X IO7 IOX 107cfu/ml培养液。蛋白酶为中性蛋白酶。蛋白酶的加入量为400 700U/g蛋白原料。本专利技术的有益效果在于 本专利技术方法制备得到的复合小肽分子量主要集中在238 568Da，约2 5肽，小肽得率占蛋白质含量的35%以上。复合小肽风味独特、口感好，可用作饲料添加剂，提高动物动物体的生产性能。附图说明图I是蛋白含量与吸光度值标准曲线 图2是标准蛋白的分子量和出峰时间曲线3是小肽发酵液凝胶G-15洗脱图谱。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，但并不仅限于此。以下实施例中所用到的菌液按以下方法制备 从斜面试管培养基中刮取一环地衣芽孢杆菌Iicheniformis)或枯草芽孢杆菌iBcillus或纳豆芽孢杆菌{Bacillus菌种加入到液体培养基中,摇 瓶培养。摇瓶种子培养基与培养条件为葡萄糖1%、酵母膏O. 5%、蛋白胨O. 5%、牛肉膏O. 5%、食盐O. 05%、磷酸二氢钾O. 1%，ρΗ=7. 0-7. 2、121°C灭菌18分钟。于32°C恒温摇床中，200r/min振荡培养24h，得到菌种液。以上三个菌种购自广东省微生物菌种保藏中心，地衣芽孢杆菌(McilliisIi cheni formi s )和枯草芽抱杆菌 C5ci77w5· subtil is、的编号分别为 GIM1. 8=AS1. 518,GIM1. 19=AS1. 210。以下实施例中所用到的中性蛋白酶购自肇东市日成酶制剂有限公司，商品型号为AS. 1398，酶活力为 50000U/g。实施例I 小肽复合物的制备方法1，包括如下步骤 O培养液的制备将IOOkg粗蛋白含量为46%的豆柏，IOOkg粗蛋白含量为60%的大米蛋白粉，IOOkg粗蛋白含量为65%的大豆浓缩蛋白，4kg鹿糖,4kg葡萄糖,用水定容到1000L，用盐酸或氢氧化钠调整反应液pH值到6. 8，121°C灭菌18分钟； 2)小肽发酵液制备将在32°C恒温摇床中，200r/min振荡培养24h后的地衣芽孢杆菌菌种液接入上述灭菌后的1000L培养液中，使培养液中菌体浓度约为5X107cfu/ml，30°C培养24小时后，加入盐酸或氢氧化钠调节培养基pH值为7.0，加入3kg中性蛋白酶(500U/g蛋白原料)，45°C继续酶解10h，得到小肽发酵液； 3)将小肽发酵液置于80°C烘箱烘干至水分低于10%，粉碎，过40目筛，得饲用复合小肽。实施例2 小肽复合物的制备方法2，包括如下步骤 I)培养液的制备将IOOkg粗蛋白含量为46%的豆柏，IOOkg粗蛋白含量为60%的大米蛋白粉，IOOkg粗蛋白含量为65%的大豆浓缩蛋白，8kg蔗糖，用水定容到1000L，用盐酸或氢氧化钠调整反应液PH值到6. 8，121°C灭菌18分钟； 2)小妝发酵液制备将在32C恒温摇床中，200r/min振汤培养24h后的枯早牙抱杆囷菌种液接入上述灭菌后的IOOOL培养液中，使培养液中菌体浓度约为5X 107cfu/ml，30°C培养24小时后，加入盐酸或氢氧化钠调节培养基pH值为6. 8，加入2. 4kg中性蛋白酶(400U/g蛋白原料)，43°C继续酶解12h，得到小肽发酵液； 3)将小肽发酵液置于80°C烘箱烘干至水分低于10%，粉碎，过60目筛，得饲用复合小肽。实施例3 小肽复合物的制备方法3，包括如下步骤 1)培养液的制备将IOOkg粗蛋白含量为46%的豆柏，IOOkg粗蛋白含量为60%的大米 蛋白粉，IOOkg粗蛋白含量为65%的大豆浓缩蛋白，6kg葡萄糖，用水定容到1000L，用盐酸或氢氧化钠调整反应液PH值到6. 8，121°C灭菌18分钟； 2)小肽发酵液制备将在32°C恒温摇床中，200r/min振荡培养24h后的纳豆芽孢杆MiMcilliis aaiio)菌种液接入上述灭菌后的1000L培养液中，使培养液中菌体浓度约为5X107cfu/ml，32°C培养24小时后，加入盐酸或氢氧化钠调节培养基pH值为6. 8，加入3.6kg中性蛋白酶(600U/g蛋白原料)，43°C继续酶解12h，得到小肽发酵液； 3)将小肽发酵液置于80°C烘箱烘干至水分低于10%，粉碎，过60目筛，得饲用复合小肽。实施例4 小肽复合物的制备方法4，包括如下步骤 I)培养液的制备将IOOkg粗蛋白含量为46%的豆柏，IOOkg粗蛋白含量为60%的大米蛋白粉，IOOkg粗蛋白含量为65%的大豆浓缩蛋白，4kg蔗糖，4g葡萄糖，用水定容到1000L，用盐酸或氢氧化钠调整反应液pH值到6. 8，121°C灭菌18分钟； 2)小肽发酵液制备将在32°C恒温摇床中，200r/min振荡培养24h后的地衣芽孢杆菌菌种液和枯草芽孢杆菌菌种液接入上述灭菌后的1000L培养液中，使培养液中地衣芽孢杆菌菌体浓度约为5X 107cfu/ml，枯草芽孢杆菌菌体浓度约为5X 107cfu/ml，32°C培养24小时后，加入盐酸或氢氧化钠调节培养基pH值为6. 8，然后本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种饲用复合小肽的制备方法，包括如下步骤：1）将蛋白原料、碳源和水配制成培养液，灭菌；2）将芽孢菌接种到灭菌后的培养液中，30～37℃下振荡培养18～30h后，加入蛋白酶，35～50℃，pH6.0～7.5，继续酶解6～12h，得到小肽发酵液；或者是：往培养液中加入蛋白酶，35～50℃，pH6.0～7.5，酶解6～12h后，接种芽孢菌，30～37℃下继续振荡培养18～30h，得到小肽发酵液；3）将小肽发酵液干燥，得到饲用复合小肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：潘军，张伟强，王瑞平，苏全，马春平，
申请(专利权)人：广州市博善生物饲料有限公司，
类型：发明
国别省市：