酵母培养方法技术

本发明专利技术涉及包括将酵母在柠檬酸浓度为20mM以上的液体培养基中进行培养的酵母培养方法；培养开始时的液体培养基的柠檬酸浓度为小于20mM，且包括在酵母的生长状态为延滞期或对数生长期时将液体培养基的柠檬酸浓度调整至20～200mM的前述酵母培养方法；以及包括前述任一项所述的酵母的培养方法培养得到的酵母抽提酵母提取物的酵母提取物的制造方法；包括使用选自前述中任一项所述的酵母的培养方法培养得到的酵母、以及从所述酵母制备得到的酵母提取物中的1种以上的制造物作为原料的饮食品的制造方法。根据本发明专利技术，提供能够不实施遗传修饰而提高菌体中的谷胱甘肽含量的酵母的培养方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及能够提高菌体中的谷胱甘肽含量的，以及从所述培养方法培养得到的酵母制造酵母提取物的方法。本申请要求2010年3月26日于日本申请的特愿2010-073818号的优先权，其内容在此并入。
技术介绍
以啤酒酵母、面包酵母为代表的属于酵母属(Saccharomyces)菌的酵母平衡良好地含有天然的B族维生素、氨基酸、以及矿物质等，除了用于啤酒、面包的制造以外，也有有 效应用。例如，干燥酵母在日本长期作为医药品、食品原料以及调味料等使用，其被认为是营养价值和安全性高的原材料。此外，近年来作为酵母提取物的原料酵母也有广泛应用。酵母提取物是从酵母的培养物制备的，其含有丰富的氨基酸等，传统上作为诸如用于赋予美味、厚味的调味料等食品添加剂而使用。特别是目前崇尚天然的情趣高涨，对作为调味料的酵母提取物的需求有增加的倾向。从富含呈味成分的酵母制备的酵母提取物可以期待作为更优良的调味料使用，因而更多含有呈味成分的酵母的开发盛行。作为酵母菌体内的代表性含硫化合物，可以列举出谷胱甘肽和S-腺苷甲硫氨酸。谷胱甘肽是具有肝机能恢复、以及抗氧化活性等的极其有用的物质，近年来期待其作为调味料、健康食品等饮食品的添加剂、化妆品基材等，有着广泛的用途。另一方面，已知S-腺苷甲硫氨酸在各种生物体反应中作为甲基的供体发挥作用。此外，还报告有抗抑郁作用、关节病的缓和、以及肝机能恢复等效果，已知这些含硫化合物对生物体起到重要的作用。含硫化合物通常是使用甲硫氨酸、半胱氨酸等含硫氨基酸，通过以MET基因(甲硫氨酸合成基因)群为代表的许多基因的转录及翻译产物来合成。因而，为了得到更高生产含硫化合物的酵母，广泛地对酵母具有的与这些含硫化合物的合成相关的基因实施突变，制造含硫化合物富含酵母突变株。例如、作为制造富含谷胱甘肽的酵母的方法，已经公开了(I)通过对因突变处理而能够在同时含乙硫氨酸和亚硫酸盐的培养基中生长的假丝酵母属(Candida)酵母的突变株进行需氧性培养，提高菌体中的谷胱甘肽含量的方法(参照例如专利文献I)。现有技术文献专利文献专利文献I :特开昭59-151894号公报
技术实现思路
专利技术所要解决的问题为了能够更低成本且高效率地工业上量产谷胱甘肽本身、富含谷胱甘肽的酵母提取物等，利用谷胱甘肽含量高的酵母是重要的。如专利文献I所述的方法，通过从进行突变处理等而实施了遗传修饰的酵母中筛选谷胱甘肽含量更高的酵母的方法，虽然能够获得富含谷胱甘肽的酵母，但是突变处理以及筛选需要时间和劳力，此外，很多情况下未必能够得到富含谷胱甘肽的酵母。此外，有些情况下，与重组体相比，更需要天然酵母(野生株)，因而希望开发不进行突变处理、而提高酵母中的谷胱甘肽含量的方法。例如，在将酵母本身、酵母提取物用于食用的情况下，有些情况下野生株比重组体更为理想。本专利技术的目的是提供能够不实施遗传修饰而提高菌体中的谷胱甘肽含量的酵母的培养方法。解决问题的方法本专利技术人对上述课题进行了深入研究，结果发现在培养酵母属菌等的酵母时，通过在液体培养基中添加一定量以上的柠檬酸，能够提高该酵母的谷胱甘肽含量，从而完成了本专利技术。 S卩，本专利技术提供(I) 一种,其包括将酵母在朽1檬酸浓度为20mM以上的液体培养基中进行培养。(2)上述(I)所述的，其中，所述液体培养基的柠檬酸浓度为200mM以下。(3)上述⑴或⑵所述的,其中，培养开始时的液体培养基的朽1檬酸浓度为20mM以上。(4)上述(I)所述的，其中，培养开始时的液体培养基的柠檬酸浓度为小于20mM，且包括在酵母的生长状态为延滞期或对数生长期时，将液体培养基的柠檬酸浓度调整至2(T200mM。(5)上述(I)所述的,其中，培养开始时的液体培养基的朽1檬酸浓度为小于20mM，且包括在培养开始后9小时以内将液体培养基的柠檬酸浓度调整至20 200mM。(6)上述(1) (5)中任一项所述的，其中，所述酵母为酵母属(Saccharomyces)菌或假丝酵母属(Candida)菌。(7)上述(1Γ(5)中任一项所述的，其中，所述酵母为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或产I元假丝酵母(Candida utilis)。(8)提高酵母的谷胱甘肽含量的方法，其包括将酵母在柠檬酸浓度为20mM以上的液体培养基中进行培养。(9)酵母的制造方法，其包括回收采用上述(1Γ(7)中任一项所述的进行培养而得到的酵母。(10)酵母提取物的制造方法，其包括从采用上述(1Γ(7)中任一项所述的进行培养而得到的酵母抽提酵母提取物。(11)饮食品的制造方法，其包括使用选自下组中的I种以上的制造物作为原料采用上述(I广(7)中任一项所述的酵母的培养方法培养得到的酵母、以及从所述酵母制备得到的酵母提取物。(12)酵母提取物，其是从采用上述(1Γ(7)中任一项所述的进行培养而得到的酵母制备的。(13)调味料组合物，其含有采用上述(1Γ(7)中任一项所述的进行培养而得到的酵母或上述(12)所述的酵母提取物。(14)饮食品，其含有采用上述(1Γ(7)中任一项所述的进行培养而得到的酵母或上述(12)所述的酵母提取物。专利技术效果根据本专利技术的酵母的培养方法，通过在含充分量的柠檬酸的液体培养基中进行培养这样的简单步骤，能够增大酵母属菌等酵母的谷胱甘肽含量。此外，采用该培养方法培养得到的酵母的谷胱甘肽含量充分高，因而通过使用该酵母，能够简便地得到高谷胱甘肽含量的酵母提取物或饮食品。附图说明 显示实施例I中液体培养基中每个柠檬酸浓度下的GSH含有率(%)的曲线图。显示实施例2中在糖蜜培养基(I)中添加的每个柠檬酸浓度下各培养物的GSH含有率(%)的曲线图。显示实施例2中在糖蜜培养基(I)中添加的每个柠檬酸浓度下培养结束时间点的液体培养基的ρΗ(终pH)的曲线图。显示实施例5中酿酒酵母KK122株的GSH含有率以及0D_的测定结果的图。显示实施例5中酿酒酵母KK124株的GSH含有率以及0D_的测定结果的图。显示实施例11中各样品中的酵母的GSH含有率(%)的测定结果的图。显示参考例I中培养前后的各上清中的柠檬酸含量的测定结果的图。专利技术的具体实施例方式在本专利技术以及本申请说明书中，如无特别说明，谷胱甘肽是指氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽这两者，总谷胱甘肽含量是指氧化型谷胱甘肽以及还原型谷胱甘肽的合计含量。在本专利技术以及申请说明书中，单位酵母干燥菌体重量的谷胱甘肽含量可以采用在对微生物中的谷胱甘肽含量进行定量时常规进行的方法求出。例如，单位酵母干燥菌体重量的总谷胱甘肽含量可以采用Titze等的方法(Analytical Biochemistry, Vol. 27、p502、1969)来测定。该方法是利用在5，5’-二硫双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸还原型(NADPH)还原的反应中，该反应的反应速度与谷胱甘肽存在量成比例，来测定谷胱甘肽量的方法。本专利技术的酵母的培养方法以将酵母在柠檬酸浓度为20mM以上的液体培养基中进行培养为特征。通过使用该培养方法培养酵母，能够提高酵母的谷胱甘肽含量，能够得到富含谷胱甘肽的酵母(谷胱甘肽含量高的酵母)。能够得到这样的谷胱甘肽富含效果(提高酵母的谷胱甘肽含量的效果)的理由不明。但如后面的实施例3所示，将其他酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：田中美和，川岛健司，
申请(专利权)人：朝日集团控股株式会社，
类型：发明
国别省市：