克伦特罗基体标准物质及其制备方法技术

本发明专利技术公开了克伦特罗基体标准物质及其制备方法。该制备方法包括如下步骤：将除去固体物质后的猪尿混合均匀，之后添加克伦特罗标准物质至量值水平，再混合均匀得混合溶液，将该混合溶液经均匀性检验后，分装，再冷冻干燥即可。本发明专利技术制备方法科学合理，可操作强，制备得到的基体标准物质可在-20℃条件下长期保存，为日常的猪尿中克伦特罗残留检测提供了量值溯源物质，解决基体差异引起的检测结果差异问题，准确保证了对生猪产品中克伦特罗残留的监控。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
克伦特罗俗称“瘦肉精”，是ー种P -肾上腺素受体激动剂，具有促进生物生长、明显提高动物瘦肉率的作用，曾广泛用作促生长饲料添加剂(饲料中盐酸克伦特罗的HPLC法測定，应永飞，吴平谷等，饲料检测，2006，23 (7) 54-56)，但ー连串因食用含“瘦肉精”的动物源食品中毒事件发生后，克仑特罗已被世界上很多国家禁止用作饲料添加剤，并要求动物源食品中不得检出克伦特罗(中华人民共和国农业部，动物性食品中兽药最高残留限量，1997，农牧发(1997)7号)。在养殖场和流通过程中，国家质检部门多采集活体样本的尿液进行克伦特罗的速测筛选，以保证动物源食品的安全性。 H H Cl 丫でJで H2N^V H3C Cl克伦特罗的化学结构式目前用于检测克伦特罗的方法主要酶联免疫吸附法(《动物性产品盐酸克伦特罗(瘦肉精)检测方法研究进展》，刘国艳，柴春彦，动物科学与动物医学，2002，19(4)31-34)、高效液相色谱法(《高效液相色谱法測定猪尿中盐酸克伦特罗》，苏文周，蔡玉枝，罗晓燕，中国卫生检验杂志，2001，I (4) =436-437)、气质联用法(《生物材料中克伦特罗的气相色谱-质谱法測定》，吴平谷，分析测试学报，2002,21 (1) 19-21)和液质联用法(《LC-MS-MSto detect and identny four beta-agonists and quantify clenbuterol in liver)),Kaita De Wach, Hubert De Brabander,Dirk Courtheyn, Analyst,1998,123 :2701-2705) 但是，采用不同的測定方法，同一样品的分析结果之间存在着明显的差异，量值很难做到统一，难以保证不同实验室检测结果的可比性。标准物质在保证分析方法的准确性及可溯源性方面具有重要作用。并且，分析基体本身的差别使得在分析过程中不能简单地采用传统的纯度标准物质来校准或进行质量控制，需要采用克伦特罗基体标准物质以满足要求，以保证检测结果的准确且具有量值的溯源性；校准仪器；对检测方法进行验证以及检测实验室的质量控制。但现有技术中并没有很有效的报道，该现状亟待解決。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服了现有克伦特罗检测方法的基体效应，对检测过程进行质量控制和结果校准困难等缺陷，而提供了一种。该系列标准物质经过严格的考察和定值，具有明确的量值和不确定度，可在_20°C条件下长期保存(至少一年)，具有很好的稳定性和均匀性。本专利技术的克伦特罗基体标准物质的制备方法包括如下步骤将除去固体物质后的新鮮猪尿混合均匀，添加克伦特罗标准物质至量值水平，再混合均匀得混合溶液，将该混合溶液经均匀性检验后，分装，再冷冻干燥，即可。本专利技术中，所述的新鮮猪尿为本领域常规所述的新鮮健康猪尿，一般是指直接采集得到的活猪的尿液，其离体时间小于5小时，克伦特罗残余量< 0. 10ng/mL。所述的克伦特罗残余量的检测方法，优选为金标检测卡法(快速检测试纸法)、酶联免疫吸附法(ELISA)、液相色谱串联质谱法(LC/MS/MS)或气相色谱质谱联用法(GC/MS)方法，更优选为ELISA或LC/MS/MS方法。所述的金标检测卡法的操作方法可參考文献Shelver, ff. L.，Smith, D. J.，2004. J. Agric. Food Chem. 52 (8)，2159-2166。 本专利技术中，所述的除去固体物质的方法为本领域常规方法，优选为离心分离法或定量分析滤纸过滤法，更优选定量分析滤纸过滤法。一般为常温操作，所述的常温一般指室温 0°C -40°C。本专利技术中，所述的混合均匀的操作方法可为常规的混合均匀的操作方法，优选磁カ搅拌器搅拌混匀。所述的磁力搅拌器的操作条件优选搅拌速率为200 IOOOrpm，最优选500rpm ;搅拌时间为10-40min,最优选30min。本专利技术中，所述的克伦特罗标准物质的形式可为克伦特罗标准物质的固体形式或溶液形式，优选克伦特罗标准物质的溶液，为保证猪尿样基体变化小，更优选添加克伦特罗 标准物质的水溶液。本专利技术中，所述的量值水平为克伦特罗溶液的浓度，优选地以ng/mL计分别可为X1、X2、X3、X4、X5，其中 Xl = 0 0. 30、X2 = 0. 30 0. 80、X3 = 0. 50 2. 00、X4 = I. 50 8. 00、X5 = 5. 00 15. 00，且满足以下条件X1 <X2<X3<X4<X5 ;更优选 Xl = 0 0. 10、X2 = 0. 40 0. 70、X3 = I. 00 I. 80、X4 = 2. 50 4. 00、X5 = 10. 00 13. 00，为满足检测工作中工作曲线的需要，最优选Xl < 0. 10、X2 = 0. 50、X3 = I. 00、X4 = 3. 00、X5=10.00。本专利技术中，所述的均匀性检验为本领域常规使用的检验样品均匀的方法，优选包括下列步骤每个量值水平取7个猪尿样品，參照GB/T22286-2008《动物源性食品中多种^ -受体激动剂残留量的測定液相色谱串联质谱法》检测克伦特罗含量，再以方差检验法对混合溶液进行均匀性检验。本专利技术中，所述的分装时使用的工具为本领域常规使用分装工具，优选移液管、瓶ロ分液器或移液枪，更优选ImL的移液枪。本专利技术中，所述的冻干干燥为本
常规冻干干燥，优选包括如下步骤将经均匀性检验的混合溶液在_60°C _80°C预冻(优选_70°C )，然后移入冷冻干燥机中，冻干，即可。所述的预冻的时间优选12 36h，更优选24h。为了避免产品在冻干过程中相互污染，优选将盛有不同量值水平的产品分放在不同容器中进行冻干。所述的冻干优选为真空冻干。所述的真空冻干的时间优选12 36h，更优选24h。较佳地，将冷冻干燥后的产品立即盖紧内外盖封ロ。上述盖紧内外盖封ロ的产品优选转移至_17°C -23°C保存。本专利技术还涉及前述克伦特罗基体标准物质的制备方法制得的克伦特罗基体标准物质。所述的由前述克伦特罗基体标准物质的制备方法制得的克伦特罗基体标准物质较佳地为按XI、X2、X3、X4和X5的浓度梯度成套使用、销售或出口。所述的成套使用、销售或出口的克伦特罗基体标准物质的浓度(以ng/mL计)优选分别为Xl = 0 0. 10、X2=0. 40 0. 70、X3 = I. 00 I. 80、X4 = 2. 50 4. 00、X5 = 10. 00 13. 00 ;更优选 Xl<0. 10、X2 = 0. 50、X3 = I. 00、X4 = 3. 00、X5 = 10. 00。 本专利技术所用试剂、原料均市售可得或根据本领域的常规方法制备得到。除非另有定义或说明，本文中所使用的所有专业术语与本领域技术熟练人员所熟悉的意义相同。在不违背本领域常识的基础上，本专利技术中上述的各技术特征的优选条件可以任意组合得到本专利技术较佳实例。本专利技术的积极进步效果在于本专利技术首次公开了克伦特罗基体标准物质，并建立了克伦特罗基体标准物质的制备方法。为日常的猪尿中克伦特罗残留检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种克伦特罗基体标准物质的制备方法，其特征在于：其包括如下步骤：将除去固体物质后的新鲜猪尿混合均匀，添加克伦特罗标准物质至量值水平，再混合均匀得混合溶液，将该混合溶液经均匀性检验后，分装，再冷冻干燥即可。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘刚，李兰英，徐勤，闻艳丽，
申请(专利权)人：上海市计量测试技术研究院，
类型：发明
国别省市：