用于治疗TWEAK 相关病症的方法技术

本发明专利技术提供用于治疗TWEAK相关病症的方法和试剂，该病症包括心脏、肝脏、肾脏、肺、脂肪、骨骼、肌肉、神经、骨和软骨的病症。本发明专利技术还提供用于鉴定治疗TWEAK相关病症的TWEAK的激动剂或拮抗剂的方法。此外，本发明专利技术提供表达编码TWEAK多肽或其片段、类似物或突变体的外源DNA的转基因动物，以及用这种动物来鉴定TWEAK激动剂或拮抗剂的方法。本发明专利技术还提供用于诊断基于TWEAK表达的疾病的方法。本发明专利技术还提供用TWEAK多肽、激动剂或拮抗剂来影响祖细胞的细胞分化的方法。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于治疗TWEAK相关病症的方法和试剂，该病症包括心脏、肝脏、肾脏、肺、脂肪、骨骼肌、神经、骨、软骨、皮肤、胃肠道、胰腺、生殖器官和结缔组织疾病。本专利技术还涉及用于鉴定治疗TWEAK相关病症的TWEAK的激动剂或拮抗剂的方法。此外，本专利技术涉及表达编码TWEAK多肽或其片段、类似物或突变体的外源DNA的转基因动物，以及用这种动物来鉴定TWEAK激动剂或拮抗剂的方法。本专利技术还涉及用于诊断基于TWEAK表达的疾病的方法。本专利技术还涉及用TWEAK多肽、激动剂或拮抗剂来影响祖细胞的细胞增生和分化的方法。
技术介绍
肿瘤坏死因子家族成员的配体因其结构与TNF-α相似而如此命名，是各种过程如炎症反应、细胞免疫和凋亡中的重要成分。TNF配体可能作为II型膜结合蛋白通过直接细胞与细胞接触而局部起作用，或作为具有自分泌、旁分泌或内分泌功能的分泌蛋白而起作用。TNF家族成员通过其C末端的细胞外结构域结合TNF受体(TNF-R)成员。各种TNF家族成员包括 TNF、淋巴毒素(LT)、Fas、CD27、CD30、CD40、4-lBB、0X-40、TRAMP、CAR-l、TRAIL、GITR、HVEM、osteoprotegrin、NGF、TRAIN、Kay (BAFF)、APRIL 和 TWEAK (TNF 相关而诱导细胞死亡的能力弱。该细胞因子受体家族的特定特征在于富含半胱氨酸的细胞外结构域，最早通过两种不同的TNF受体的分子克隆来显示。该家族的基因编码糖蛋白，特征为I型跨膜蛋白具有细胞外配体结合结构域，单一的跨膜结构域和参与激活细胞功能的胞质区域。富含半胱氨酸的配体结合区域具有一个紧密结合的二硫键连接的核心结构域，根据特定的家族成员，该核心结构域重复出现多次。绝大部分的受体具有四个结构域，虽然可能少至I个或多达6个。TNF家族成员在调控免疫系统中起作用，控制细胞存活和分化，以及在急性宿主防御系统如炎症中起作用。本领域一直在尝试操作TNF家族成员来产生治疗性效果，这可能提供控制疾病的独特方法。例如，该家族的一些配体能够直接诱导许多被转化的细胞的程序性死亡，如LT、TNF、Fas配体和TRAIL。Fas和可能TNF以及CD30受体的活化能够在未被转化的具有免疫调控功能的淋巴细胞中诱导细胞死亡。诱导编程细胞死亡的能力是多个TNF家族成员的重要和被深入研究的特性。Fas介导的凋亡似乎在外周和可能在胸腺中起调控自身反应淋巴细胞的作用。此外，TNF和CD30系统与T细胞和大细胞退行发育的淋巴瘤细胞系的存活相关。这种细胞系对TNF、Fas或LT-β受体信号响应的死亡具有凋亡的特征。TNF家族的配体抗原根据它们诱导细胞死亡的能力被分成三类。首先，TNF、Fas配体和TRAIL能够有效地在许多细胞系中诱导细胞死亡，其受体最可能具有极好的规则的死亡结构域。大概DR-3的配体(TRAMP/WSL-1)也属于这一类。接着是如TWEAK、⑶30配体和LTalb2等配体，其引起仅限于少数细胞的较为微弱的死亡信号。在这些系统中进行的研究已经证明，存在分开的较微弱的死亡信号机制。最后，存在不能有效地递送死亡信号的成员。可能所有类别的配体都对一些细胞类型产生抗增生作用，结果诱导细胞分化，如CD40。总之，死亡是由位于TNF受体的胞质一侧的死亡结构域集聚后引发的。这些死亡结构域协调各种信号传导成分的组装，引起caspase级联活化。一些受体缺乏规则的死亡结构域，如LTb受体和CD30，但是能够诱导细胞死亡，尽管较为微弱。相反，通过其他路径如CD40发送信号是维持细胞存活所必需的。还需要进一步鉴定和表征TNF家族成员的功能，从而便于开发用于TNF家族相关疾病的新治疗方法。TWEAK在筛选杂交到促红细胞生成素探针的RNA中被分离。Chicheportiche等， J. Biol. Chem. 272:32401-32410 (1997) 0小鼠和人的肽具有异乎寻常的高度保守性，包括在受体结合结构域中具有93%氨基酸同一性。TffEAK被证实高效地从细胞中分泌，在许多组织中丰富地被表达，包括心脏、大脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、淋巴结、胸腺、阑尾和外周血液淋巴细胞。一种已知的TWEAK受体是Fnl4，生长因子调节的立即早期反应基因，其降低对细胞外基质的细胞附着和减弱血清刺激的生长和迁移(Me i ghan-Mantha等，J. B i ο I.Chem. 274:33166-33176(1999))。Fnl4已经被证明会被FGF、小牛血清和氟波醇酯(phorbolester)处理诱导，并且在心脏、肾脏、肺、皮肤、骨骼肌、卵巢和胰腺组织中，以及在肝细胞癌模型和其他癌细胞系中以相对高的水平被表达，在正常肝脏组织中以较低水平被表达。TffEAK与许多生物学过程相关。例如，用IFN- Y和TWEAK处理的HT29细胞被证明发生凋亡；尽管TWEAK诱导凋亡的能力是微弱的，并且仅少数细胞类型易感。Chich印ortiche 等，J. Biol. Chem. 272:32401-32410(1997)。相反，TWEAK 已经被证明在不依赖VEGF的路径中诱导血管发生和内皮细胞增生。Lynch等，J. Biol.Chem. 274:8455-8459 (1999)。星细胞被TWEAK特异地结合和刺激。TWEAK能够渗入发炎的大脑中来影响星细胞的行为。暴露于TWEAK的星细胞分泌大量IL-6和IL-8，并上调ICAM-I表达。Saas 等，GLIA32:102-107 (2000)。TffEAK还与免疫系统的调节相关。在用IFN- Y刺激时，单核细胞迅速地表达TWEAK，抗TWEAK的抗体部分地抑制它们对人鳞状细胞癌的细胞的细胞毒性活性。抗TWEAK和抗TRAIL的抗体的结合几乎完全抑制细胞毒性。Nakayama等，J. Exp.Med. 192:1373-1379(2000)。相反TWEAK的mRNA在用脂多糖(LPS)处理的小鼠中迅速消失，脂多糖是免疫炎症反应的诱导物。此外，在小鼠模型的自体免疫溶血性贫血和系统性红斑狼疮中，TWEAK的mRNA也减少。这些数据表明，下调TWEAK的表达是急性和慢性炎症中的重要事件。Chicheportiche 等，Biochem. Biophys. Res. Comm. 279:162-165 (2000)。当前，本领域缺乏对哪些病症或疾病与TWEAK表达和功能相关的完整了解，包括TffEAK在炎症和非炎症病症中的作用。专利技术概述本专利技术涉及TWEAK对于促进各种病理状况的严重性和进展中的作用，包括多种组织和器官系统的疾病。这种病理状况包括急性心脏损伤，慢性心力衰竭，非炎症性充血性心肌病，充血性心力衰竭，肝脏上皮细胞增生，肝细胞死亡，肝脏纤维变性，肝细胞液泡化，其他肝脏损伤，胆管病症，包括胆管增生，炎症性肾脏病症，如多病灶(multifocal)炎症性、非炎症性肾脏病症，如肾小管肾病，肾小管增生，肾小球囊肿，肾小球肾病，Alport综合症，肾小管液泡化，肾透明管型(kidney hyaline cast)，肾纤维变性和炎症性肺病，本专利技术建立了 TWEAK分子与某些心脏、肝脏、肾脏和肺疾病之间的因果关系。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
TWEAK拮抗剂在制备用于在受试者中治疗肾脏病症的药物中的用途。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：琳达伯克利，阿尼拉贾库博夫斯基，蒂莫西郑，咸庚旼，
申请(专利权)人：比奥根艾迪克MA公司，
类型：发明
国别省市：