天花粉蛋白生物改性工艺制造技术

天花粉蛋白生物改性工艺，属于生物技术领域。本发明专利技术的目的是提供一种能够既能降低天花粉毒性又能提高其药用范围的天花粉蛋白生物改性工艺，包括如下步骤：（1）栝楼根茎破碎、灭菌；（2）生成天花粉虫卵；（3）天花粉幼虫培殖；（4）天花粉蛆虫培育；（5）天花粉蛆虫分离、清洗及灭活；（6）天花粉蛆虫干燥。本发明专利技术以栝楼为原料，经过蛆种繁殖、幼虫培殖和蛆虫培养，生成天花粉蛆虫，天花粉蛆虫蛋白质不仅保留了天花粉蛋白的药用功效，而且降低了天花粉蛋白的毒副作用，为天花粉蛋白的应用提供了更广阔的空间。本工艺过程简单实用，易于控制，节省能源，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，尤其涉及一种天花粉蛋白生物的改性工艺。
技术介绍
天花粉蛋白是一种碱性植物 蛋白，为白色或微黄色鳞片状结晶，相对分子量24000Da，等电点9. 4，为一不含糖和磷酸基团的简单蛋白质，天花粉蛋白水溶性不大，有引湿性，对光、热不稳定，不易被膜蛋白酶酶解，它具有多种生物活性，如引产抗孕、免疫抑制，并能抑制人艾滋病病毒(HIV)的复制和繁殖，引起药界重视。但是由于天花粉蛋白的强抗原性(即异体排斥反应)，对艾滋病患者的肝脏损伤很大，并引起了患者的高烧、虚弱、炎症等一系列副作用。因此对天花粉蛋白的改性、修饰、降解的研究引起界内的极大关注。CN200710173408. 9公开了天花粉蛋白衍生肽及其应用，该专利公开了三种天花粉蛋白衍生肽。CN200410074324. 6公开了天花粉蛋白突变体及其编码基因，天花粉蛋白突变体是天花粉蛋白的自N端的第55位酪氨酸和自N端的第78位天冬氨酸的两个氨基酸残基中至少一个突变。CN01103102. 6公开了一种天花粉蛋白突变体及制备方法，产品是从天然天花粉蛋白基因经突变改造后，通过合适的表达系统制备得到的。CN200310112768.X公开了聚乙二醇化天花粉蛋白药物及其制备方法。本专利技术由聚乙二醇和天花粉蛋白的N端通过胺键连接，且一个TCS分子结合一个聚乙二醇分子所组成。原则上，上述几种工艺都可以将天花粉蛋白改性，然而，更有效降低天花粉蛋白毒副作用，扩大天花粉蛋白的用途范围，将对天花粉的发展产生积极影响。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能够既能降低天花粉毒性又能提高其药用范围的天花粉蛋白生物改性工艺。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的1、中药材栝楼根茎破碎与灭菌；2、谷物麸皮与粉末混合生成天花粉虫卵；3、天花粉幼虫培殖；4、天花粉蛆虫培育；5、天花粉蛆虫分离、清洗及灭活；6、天花粉蛆虫干燥；7、天花粉蛆虫包装。具体步骤如下 (1)栝楼根茎破碎后进行灭菌处理，备用； (2)生成天花粉虫卵取1000-2000g谷物麸皮、200-100g栝楼糊状物、IO-IOOg蛋白胨、IO-IOOg KH2PO4混合均匀成为天花粉虫卵培养液，保持温度25-55°C，时间48_120h，生成虫卵； (3)天花粉幼虫培殖配制天花粉幼虫培养液，分装于20-25个三角瓶中，每瓶分别装入前面培殖的虫卵，摇床1-10次/min，培育12-48h，生成含幼蛆培养液；(4)天花粉蛆虫培育配制天花粉蛆虫培育液，加入含幼蛆培养液进行培育，培育出的天花粉蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成，培育参数PH=5. 5-8，搅拌速度I-IOr/min，温度 25-45°C，通气量 O. 5_20L/min，时间 72_240h ； (5)天花粉蛆虫分离、清洗及灭活将培育液及培育出的天花粉蛆虫一起放入分离机中虫液分离，用纯净水漂洗，然后用热纯净水喷淋天花粉蛆虫，天花粉蛆虫被灭活； (6)天花粉蛆虫干燥灭活的天花粉蛆虫干燥，得到天花粉蛆虫成品。本专利技术以栝楼为原料，经过蛆种繁殖、幼虫培殖和蛆虫培养,生成天花粉蛆虫,天花粉蛆虫蛋白质不仅保留了天花粉蛋白的药用功效，而且由于相对分子量由24000Da提高到86000Da，因此降低了天花粉蛋白的毒副作用，为天花粉蛋白的应用提供了更广阔的空间。本工艺过程简单实用，易于控制，节省能源，适合工业化生产。具体实施方式 下面结合实施例对本专利技术作进一步的描述 实施例I: (1)IOOOg新鲜栝楼块茎用破碎机破碎成小块，然后用磨浆机磨成糊状； (2)将上述栝楼糊状物与1000-2000g麦麸、10-50gK2HP04、10_20g蛋白胨、10_20mL氨水混合并搅拌均匀，保持温度25-38°C，时间48-240h，繁殖出虫卵，用孔径O. I-2mm筛子分筛出虫卵； (3)取IOOg 栝楼干粉、2-10g 葡萄糖、O. 2-1. Og 蛋白胨、O. 2-1. Og KH2PO4,O. 01-0. 05gMgS04,加入 O. 5-1. OL 去离子水，加热 80-100 °C，时间 10_30min，冷却至25-30°C，分装至20-30个三角烧瓶中，每个瓶中装入O. 1-0. 5g前面繁殖的虫卵，摇床l-100r/min，培殖12_48h，生成天花粉幼蛆； (4)取500-1000g 栝楼干粉、20-100g 葡萄糖、10_20g 蛋白胨、10_20g KH2PO4'O. 1-0. 5gNaCl、0. 1-0. 5gZnS04，加入2-5L去离子水，混合均匀，加入含天花粉幼蛆培养液O. 5-1. OL进行培育，培育的天花粉蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成； 培育参数PH=5. 5-8，搅拌速度l-10r/min，温度25-45 °C，通气量10_20L/min，时间120-240h ； (5)将培养液及培育出的天花粉蛆虫放入离心机以转速550-1250r/min分离出天花粉蛆虫，用10-20L纯净水漂洗2-3次，用80-100°C热纯净水喷淋天花粉蛆虫Ι-lOmin，天花粉蛆虫被灭活； (6)灭活的天花粉蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-3(T30°C、真空度50-200kPa、时间5-24h，干燥至含水分5-8%得到天花粉蛆虫成品，天花粉蛆虫含量为90% ； (7)干燥的天花粉蛆虫用铝塑真空包装袋包装。实施例2: (1)IOOOg干燥栝楼茎块用粉碎机以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm,并用O. 05-0. 2mm孔径筛子分筛，收集粉末状物料； (2)粉末状物料加入5-20L纯净水搅拌均匀成糊状物； (3)糊状物在80-120°C杀菌10-30min，然后降温至25_30°C备用； (4)取IOOg谷糠、20-50g糊状物、5-10g蛋白胨、5-10gKH2PO4混合均匀，喷洒10_15mL纯净水，保持温度25-55°C，时间48-120h，生成虫卵，用孔径O. 1-2. Omm筛子筛出虫卵备用； (5)取200-300g栝楼糊状物、5-10g酵母抽提粉、2-5gNaCl、l-2mL氨水，加入O.5-1. OL纯净水混合均匀，分装于20-25个三角瓶中，每瓶分别装入O. 2-1. Og前面培殖的虫卵，摇床1-10次/min，培育12-48h，生成含幼蛆培养液； (6)5-8L去离子水中加入1000-2000g栝楼茎块粉、20_80g酵母抽提粉、2_5gK2S04、O. 01-0. 05gNaCl、20-100gNa2HP04、0· 01-0. 05gCaCl2，搅拌均匀成培养液，用 10000-15000 高斯磁感强度处理培养液3-5min，处理2次后加入含幼蛆培养液500-1OOOmL进行培育，培育出的天花粉蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成； 培育参数PH=5. 5-8，搅拌速度l-10r/min。温度25_35°C，通气量O. 5_20L/min，时间72-148h ； (7)将培育液及培育出的天花粉蛆虫一起放入分离机中以转速550-1250r/min虫液分 离，用10-20L纯净水漂洗2-3次，用80-100°C热纯净水喷淋天花粉蛆虫Ι-lOmin，天花粉蛆虫被本文档来自技高网...

【技术保护点】
天花粉蛋白生物改性工艺，其特征在于所述工艺包括如下步骤：（1）栝楼根茎破碎后进行灭菌处理，备用；（2）生成天花粉虫卵：取1000？2000g谷物麸皮、200？100g栝楼糊状物、10？100g蛋白胨、10？100g？KH2PO4混合均匀成为天花粉虫卵培养液，保持温度25？55℃，时间48？120h，生成虫卵；（3）天花粉幼虫培殖：配制天花粉幼虫培养液，分装于三角瓶中，每瓶分别装入前面培殖的虫卵，摇床1？10次/min，培育12？48h，生成含幼蛆培养液；（4）天花粉蛆虫培育：配制天花粉蛆虫培育液，加入含幼蛆培养液进行培育，培育出的天花粉蛆虫由乳白色变为乳黄色，培育过程完成，培育参数：pH=5.5？8，搅拌速度1？10r/min，温度25？45℃，通气量0.5？20L/min，时间72？240h；（5）天花粉蛆虫分离、清洗及灭活：将培育液及培育出的天花粉蛆虫一起放入分离机中虫液分离，用纯净水漂洗，然后用热纯净水喷淋天花粉蛆虫，天花粉蛆虫被灭活；（6）天花粉蛆虫干燥：灭活的天花粉蛆虫干燥，得到天花粉蛆虫成品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐华民，赵荣华，赵艳琨，徐萌，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学，
类型：发明
国别省市：