迷人杜鹃的组培繁殖方法技术

提供迷人杜鹃的组培快繁方法。选取迷人杜鹃的种子为外植体，经丛生芽诱导、壮苗并生根培养和试管苗移栽。培养的温度为20-23℃，湿度为30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX。使用该方法可达到一个无菌苗诱导4-5或者更多的丛生芽，生根率达77%，移栽成活率达99%以上，极大地提高了迷人杜鹃的繁殖能力，为迷人杜鹃的保存和规模化生产提供了技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物生物
，具体地说，涉及杜鹃花迷人杜鹃的组织培养快繁方法。
技术介绍
迷人杜醇Rhododendron agastum是云南野生杜醇花的自然杂交种。迷人杜匿$隶属于杜醇花科(Ericaceae)杜醇花属(Rhododendron)常绿杜醇亚属，常绿灌木至小乔木。迷人杜鹃的花粉红至深粉红色，花筒内有或多或少的斑点，花色鲜艳，具有较高的观赏价值，经申请人多年的研究，已证明迷人杜鹃为马缨杜鹃和大白花杜鹃的自然杂交种，见文章 “Natural hybridization origin of Rhododendron agastum (Ericaceae) inYunnan, China: inferred from morphological and molecular evidence，，发表于〈〈Journal of Plant Research》(2007) 120:457 - 463。由于迷人杜鹃为马缨杜鹃和大白花杜鹃的自然杂交种，且经过申请人多年试验，迷人杜鹃的种子成苗和扦插较为困难。迄今，迷人杜鹃没 有相关生物技术方法繁殖的报道，为了使迷人杜鹃优良的特性能够保存和可持续利用，需要研究该种的组织培养，并形成一套专门的组织培养繁殖技术体系。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供迷人杜鹃的组织培养方法，使之在生根扦插困难的情况下能够繁衍，使该品种的优良性状的保存能够得到保障，同时缩短离体培养时间，提高生根率和幼苗移栽率，为迷人杜鹃的可持续利用提供组培种苗繁育技术。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案，包括外植体消毒、丛生芽诱导、壮苗并生根培养、试管苗移栽步骤，其特征在于取迷人杜鹃的种子进行丛生芽诱导、壮苗、生根培养，培养的温度为20-23 °C，湿度为30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX ;所述的种子萌发培养基为改良Anderson+0. lmg/L NAA，丛生芽诱导培养基为改良 Anderson+2. lmg/L2_IP+0. lmg/L NAA, pH5. 7,壮苗培养基为改良 Anderson+0. 5mg/L2-IP+0. lmg/L NAA,生根培养基为 1/2 改良 Anderson+lmg/L NAA,其中改良 Anderson 培养基为NH4N03减半。所述外植体消毒先用5%的洗衣粉水,浸泡清洗IOmin,用无菌水冲洗至无泡沫,后用70%的酒精消毒40s，无菌水冲洗3-5遍后,用0. 1%升汞溶液进行消毒6min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍。所述移栽是组培苗在培养瓶内生根培养45天以后，炼苗7天，再移栽于温室大棚中。所述移栽基质为I份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5. 4-5. 5。所述移栽在上午8-11点，温度为18-25°C下进行。本专利技术的方法可具体描述为取迷人杜鹃种子为外植体，用5%的洗衣粉水进行浸泡10分钟后反复冲洗3-5遍直至无泡沫,然后用75%酒精消毒40s，后用0. 1%升汞溶液进行消毒6min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，将种子置于消毒后的滤纸上吸干水分，接种至诱导萌发培养基改良Anderson+0. lmg/L NAA, pH5. 7，温度20_23°C，湿度30_45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX下培养，长出无菌苗后转接入丛芽诱导培养基改良Anderson+2. lmg/L2_IP+0. lmg/L NAA中进行增殖，待丛生芽长到2-3cm转入壮苗培养基改良Anderson+0. 5mg/L2_IP+0. lmg/L NAA进行壮苗，其中改良Anderson培养基为NH4NO3减半，完成壮苗周期后将苗转入生根培养基，生根培养基为1/2改良Anderson+lmg/LNAA，45天生根培养后进行组培苗炼苗7天后，在上午8-11点，移栽于基质为I份珍珠岩+1份腐殖土，PH为5. 4-5. 7，湿度50-60%的大棚内，每天早晚各喷水一次。本专利技术技术方案的提出是基于下述的研究基础迷人杜鹃为杜鹃花自然杂交种，色彩艳丽丰富，但迷人杜鹃的生根难度较大，扦插几乎不生根，为了解决其大量繁殖、保存和可持续利用，故此专利技术迷人杜鹃组织培养的技术。组培扩繁不仅可以在短时间内获得大量的再生植株，而且移栽生长良好且能保持其优良性状不变。试管苗移栽的温度控制在18-23°C，最好在早上8-11点进行移栽，组培苗虽然在生长过程中很少受病虫害的浸染，但 为了预防病虫害的发生，在生长季内喷施多菌灵、氧化乐果2-3次为宜。夏季要注意通风。本专利技术的组培方法优点在于I、建立了有效的迷人杜鹃组培快繁方法，解决了其生根困难，繁殖受阻的状况。2、通过组培快繁得到的幼苗，成苗容易，一致性强，生长健壮，叶色浓绿，很少病虫害，易于管理。3、利用组培快繁方法繁殖的迷人杜鹃不受季节限制，任何时候都可以进行组培。4、利用组培快繁的方法繁殖的迷人杜鹃可以保持物种特性，使该自然杂交种能够延续和可持续利用。5、通过本专利技术的组培快繁方法繁育的迷人杜鹃在I个月内增殖系数为4-5，生根率达70%，移栽成活率达99%以上，极大地提高了迷人杜鹃的繁殖系数，为该物种的保存和可持续利用提供了非常有效的繁殖方法。具体实施例方式下面用本专利技术的实施例来进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此来限定本专利技术。实施例I :选取迷人杜醇Rhododendron agastum (Ericaceae)的种子(采自于云南省师宗县菌子山)为外植体，用5%的洗衣粉水浸泡和冲洗lOmin，后用70%的酒精消毒40s，无菌水冲洗3遍后，用0. 1%升汞溶液进行消毒6min，不断震荡后用无菌水清洗3遍,用无菌滤纸吸干表面水分后接种至萌发培养基改良Anderson+0. lmg/L NAA, pH5. 7，温度20°C，湿度30%，光照条件为自然光2000LUX+人工辅助光1500LUX下培养，长出无菌苗后转接入改良Anderson+2. lmg/L2-IP+0. lmg/LNAA中进行增殖，再将长到3cm的幼苗转到改良Anderson+0. 5mg/L2_IP+0. lmg/L NAA 中进行壮苗，生根为改良 l/2Anderson+lmg/L NAA,壮苗3-4次，周期30天；组培苗炼苗一周后，在早上11点，温度为18°C下进行移栽，移栽于基质为I份珍珠岩+1份腐殖土，PH为5. 7，湿度50%的大棚内，每天早晚各喷水一次。通过上述的组培快繁方法繁育的迷人杜鹃在I个月内增殖系数为4，生根率为71%，移栽成活率为99%，极大地提高了迷人杜鹃的繁殖系数，为该物种的保存和可持续利用提供了非常有效的繁殖方法。实施例2 选取迷人杜胃$ Rhododendron agastum (Ericaceae)的种子(采自于云南省师宗县菌子山)为外植体，用5%的洗衣粉水浸泡和冲洗lOmin，后用70%的酒精消毒40s，无菌水冲洗5遍后,用0. 1%升汞溶液进行消毒6min，不断震荡后用无菌水清洗5遍,用无菌滤纸吸干种子表面水分后接种至萌发培养基改良Anderson+0. lmg/L NAA, pH5. 7，温度23°C，湿度45%，光照条件为本文档来自技高网...

【技术保护点】
迷人杜鹃的组培繁殖方法，包括外植体消毒、丛生芽诱导、壮苗并生根培养、试管苗移栽步骤，其特征在于取迷人杜鹃的种子，进行丛生芽诱导、壮苗、生根培养，培养的温度为20？23℃，湿度为30？45%，光照条件为自然光2000？2500LUX+人工辅助光1500？2000LUX；所述的种子萌发培养基为改良Anderson+0.1mg/LNAA，丛生芽诱导培养基为改良Anderson+2.1mg/L2？IP+0.1mg/L？NAA，pH5.7，壮苗培养基为改良Anderson+0.5mg/L2？IP+0.1mg/L？NAA，生根培养基为1/2改良Anderson+1mg/L？NAA，其中改良Anderson培养基为NH4NO3减半。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张敬丽，田晓玲，吴雅文，赵海洲，田伟，张巧玲，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：