子宫内膜接受性的诊断方法技术

本发明专利技术涉及子宫内膜接受性的非侵入性诊断方法，其包括收集脂质生物标志物谱并且将其与参照脂质组生物标志物(特别是前列腺素PGE2和/或PGE2α)比较。本方法尤其适用于确定雌性哺乳动物(优选女人)的生育力状态。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及子宫内膜对胚胎植入之接受性的非侵入性检测方法。本方法尤其适用于确定雌性哺乳动物(优选女人)的生育力状态。本专利技术还涉及实施所述方法的试剂盒。
技术介绍
据估计尝试怀孕的夫妇中有12%患不孕症，由于怀孕年龄的增加，该数字正在上升。已越来越多地使用体外受精(In vitro fertilisation, IVF)来帮助不育夫妇怀孕。自1978年首次成功的IVF治疗使Louise Brown出生以来，许多技术上和医学上的进步帮助提高了效率；如今，接受IVF治疗的女人中70%左右有成功的结果。仍有约50%的患者没有怀孕或在早期流产，这需要科学界的进一步努力来继续该领域的研究。通常，IVF是多步骤的过程，其涉及从雌性患者或供体取得成熟卵；将卵在人工培养基中孵育；从患者或供体收集精子并且进行后续的准备；用精子使卵受精；监测和选择优质胚胎；以及将这些转移至子宫腔。胚胎必须植入到接受性的子宫内膜上以使妊娠得以进行。公认的是，该特定步骤与大多数的失败相关，因此，寻找可能的原因和解决问题的方法是有临床意义的。被转移的胚胎的植入涉及接受性的子宫内膜与功能性囊胚之间的同步化的交流。这种现象仅发生在植入窗口期间，即在月经周期第19天至第23天(女人)之间的子宫内膜接受性自限期(self-limited period)。在正常月经周期中，这通过卵巢雌激素和孕酮的局部作用来实现，其在子宫内膜诱发一系列细胞和分子事件，从而导致适当的子宫内膜接受性。用50多年前提出的Noyes标准确定子宫内膜的时期(endometrial dating)以估测子宫内膜接受性,该标准现在仍是测量子宫内膜接受性优选使用的方法。目前，根据供体卵IVF的15年经验，已为人所接受的是组织学评价几乎不增加有临床意义的信息，它应被子宫内膜接受性的功能性评价所替代。分子和细胞生物学时代以及新分析技术的开发为寻找对接受性子宫内膜更恒定的预测物提供了帮助。用类固醇激素诱导后，目前已鉴定出大量结构和分子介导物作为潜在的子宫内膜接受性生物标志物，包括子宫内膜细胞表面胞饮突(pinopode)的存在、粘附分子如整合素、细胞因子、生长因子、脂质等。说明性地，在植入窗口所处的黄体中期，人子宫内膜中两种前列腺素(PG)前列腺素E2(PGE2)和前列腺素F2a (PGF2 a )的产生增加。此外，基因和蛋白质组分析为评价子宫内膜接受性增加了令人兴奋的新工具，而且子宫内膜活检样品可用于鉴定与子宫接受性相关的分子，以对更好的研究人植入。然而，这些办法尚未使结果适用于日常IVF临床实践，因为没有鉴定出对人植入关键的单个特定因素。此夕卜，依赖活检的技术在应用中的主要缺陷在于它们的侵入性，以及破坏必需的植入终点的适时子宫内膜生物活检的必要性。子宫内膜分泌物为非破坏性地研究子宫内膜接受性提供了新的可能。重要的是，子宫内膜流体的抽吸不影响怀孕率。这种方法提供了与周期天数相关的单个蛋白质的可靠结果，在使用Iuminex系统的蛋白质阵列中证明了该方法的有效性，从而开辟了非侵入性应用的领域。虽然通过评价子宫内膜接受性已公开一些生化标志物，本领域需要可用于临床的特异且可靠的分子生物标志物来检测女人子宫内膜对胚胎植入之接受性。代谢组学是致力于系统性研究细胞、组织和生物流体中的小分子(即代谢产物)的学科。代谢产物是细胞调控过程的终产物，可以将它们的水平当作生物系统对遗传或环境变化的经放大的应答。临床医生几十年来依赖于代谢组所包含信息中的一小部分，如测量葡萄糖来监测糖尿病和测量胆固醇来监测心血管健康。已开发了精密的新代谢组分析平台和信息学工具，来提供对代谢组的广泛和灵敏的测量。已知脂质作为结构组分(如细胞膜)，能量储存组分和信号转导分子发挥重要作用。广义上脂质是疏水性或两亲性小分子，它们可完全或部分源自以碳阴离子为基础的硫酯缩合和/或以碳阳离子为基础的异戊二烯单元缩合。可以认为“脂质组”是代谢组学的子领域，其旨在通过在分子水平测量和表征广泛的脂质谱(脂质组谱(lipidomic profile))来阐明脂质环境中的生物过程。传统的临床脂质测量对甘油三酯、胆固醇或脂蛋白的总量进行定量。然而，血清脂质谱在分子水平上更复杂。目前的脂质组平台能定量表征多个脂质类型中的数百种不同的脂质分子种类，如鞘脂、磷脂、留醇酯、酰基甘油、留醇、胆汁酸、月旨肪酸、类花生酸、前列腺素和类固醇。专利技术概述本专利技术基于以下令人惊讶的发现来自女人子宫内膜流体样品的选自前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2a (PGF2 a )及其组合的前列腺素的水平与子宫内膜对胚胎植入之接受性相关。因此，当在子宫内膜流体样品中测定时，所述前列腺素(PGE2和/或PGF2 a )可用作子宫内膜对胚胎植入之接受性的生物标志物。一方面 ，本专利技术涉及当在子宫内膜流体样品中测定选自前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2a (PGF2 a )及其组合的前列腺素时，其作为子宫内膜对胚胎植入之接受性的生物标志物的用途。另一方面，本专利技术涉及检测雌性哺乳动物的子宫内膜对胚胎植入之接受性的方法，所述方法包括以下步骤a)测定来自所述雌性哺乳动物的子宫内膜流体样品中选自前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2 a (PGF2 α )及其组合的前列腺素的水平；以及b)将所述子宫内膜流体样品中的所述前列腺素的水平与子宫内膜对胚胎植入之接受性相关联。另一方面，本专利技术涉及选择雌性哺乳动物的胚胎植入窗口的方法，其包括测定来自所述雌性哺乳动物的子宫内膜流体样品中PGE2的水平和/或PGF2 α的水平，其中当所述样品中所述前列腺素PGE2或PGF2 α中至少一种的水平与参照样品相比升高时，选择所述植入窗口。另一方面，本专利技术涉及评价雌性哺乳动物的生育力状态的方法，其根据所述雌性哺乳动物的子宫内膜流体样品中PGE2和/或PGF2 α的水平，及其与所述雌性哺乳动物生育力状态的相关性。另一方面，本专利技术涉及评价雌性哺乳动物所处状态是否适合接受和植入胚胎的方法，其根据所述雌性哺乳动物的子宫内膜流体样品中PGE2和/或PGF2 α的水平，及其与胚胎接受和植入状态的相关性。在一个具体的实施方案中，所述雌性哺乳动物是进行体外受精(IVF)过程的女人。另一方面，本专利技术涉及监测雌性哺乳动物的子宫内膜成熟度的方法，其根据所述雌性哺乳动物的子宫内膜流体样品中PGE2和/或PGF2 α的水平，及其与子宫内膜成熟度的相关性。另一方面，本专利技术涉及对雌性哺乳动物进行体外受精方法，其根据所述雌性哺乳动物的子宫内膜流体样品中PGE2和/或PGF2 α的水平，及其与子宫内膜成熟度的相关性，其中当所述子宫内膜成熟时，将胚胎引入所述雌性哺乳动物的子宫。另一方面，本专利技术涉及包含PGE2和/或PGF2a的参照脂质的试剂盒。所述试剂盒在检测雌性哺乳动物的子宫内膜对胚胎植入之接受性中，或在选择雌性哺乳动物的胚胎植入窗口中，或在评价雌性哺乳动物的生育力状态中，或在评价雌性哺乳动物所处状态是否适合接受和植入胚胎中，或在监测雌性哺乳动物的子宫内膜成熟度中，或在雌性哺乳动物中进行体外受精的方法中的用途构成本专利技术的另一方面。另一方面，本专利技术涉及能提高子宫内膜接受性的化合物的鉴定方法。另一方面，本专利技术涉及避孕剂的鉴定方法。另一方面，本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：卡洛斯·西蒙瓦莱斯，安东尼奥·佩利塞尔马丁内斯，奥斯卡·贝兰加阿蒂恩萨，
申请(专利权)人：IVI研究公司，
类型：发明
国别省市：