用于治疗癌症的方法和组合物技术

本发明专利技术描述了用于检测癌细胞是否有可能对mTOR抑制剂治疗具有抗性的方法。所述方法可包括检测细胞中或细胞的PPP2R2B?(GenBank登录号：NM_181678)。可选地或此外，所述方法可包括检测所述细胞中或所述细胞的PDK1(GenBank登录号：NM_002613)。所述方法可包括检测所述细胞中或所述细胞的PPP2R2B启动子的甲基化。所述方法可包括检测所述细胞中或所述细胞的PPP2R2B表达和/或活性。所述方法可包括检测PDK1介导的Myc磷酸化活性。本发明专利技术还提供了用于为患有或疑似患有癌症的个体选择治疗的方法、用于确定患有癌症或疑似患有癌症的个体是否会对mTOR抑制剂治疗作出响应的方法，用于提高癌细胞对mTOR抑制剂治疗的敏感性的方法，用于治疗或预防患有癌症或疑似患有癌症的个体的癌症。本发明专利技术进一步提供了PDK1表达和/或活性的抑制剂和mTOR抑制剂的组合，其用在治疗或预防癌症的方法中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及医药、细胞生物学、分子生物学和遗传学领域。本专利技术涉及医药领域。具体地，本专利技术涉及诸如癌症的疾病的治疗和诊断，以及用于此应用的组合物。
技术介绍
蛋白质磷酸酶2A(PP2A)作为包含催化亚基C、结构亚基A和大量调节亚基B中的一种的多聚体酶而发挥作用。真核细胞包含200多种在生化上各不相同的PP2A复合体，其源自A、B、C以及其他亚基的不同组合。调节亚基以组织特异性的方式表达，导致不同的哺乳动物组织中存在不同的PP2A复合体(Virshup and Shenolikar，2009)。此外，提供底物特异性并催化不同的去磷酸化事件以产生不同的功能结果的是这些调节亚基而不是催化亚基。 尽管已经在多种永生化人细胞类型中证明了 PP2A的肿瘤抑制作用(Chenet al.,2004;Eichhorn et al.,2009;Janssens and Goris,2001;Rangarajan etal. , 2004; Sablina et al. , 2007; Zhao et al.，2003)，但尚没有针对 PP2A 在人恶性病中普遍失活的遗传学和/或表观遗传学证据。可导致丧失B亚基结合的PP2A复合体的A亚基的体细胞突变(Ruediger et al.，2001)仅见于占15%的某些人癌症中(Calin etal.,2000;Ruediger et al.,2001;Takagi et al.,2000;Tamaki et al.,2004;Wang etal. , 1998; Westermarck and Hahn, 2008),且仅在某些癌细胞系中报道了 PP2A 亚基 B56 Y 3的表达下降(Chen et al. , 2004; Zhao et al.，2003)。总而言之，如同其对癌症信号转导或靶向治疗的治疗响应的影响，PP2A复合体在人癌症中的遗传学或表观遗传学变化仍有待阐释。PP2A调控的癌症信号转导途径之一是mTOR途径，mTOR是很多癌症细胞所依赖以获得生长优势的 PI3K 途径的关键组分(Guertin and Sabatini, 2007; Sabatini, 2006)。尽管小分子mTORCl抑制剂，例如雷帕霉素(rapamycin)及其类似物已经显示了其在癌症治疗应用中的合理前景并且已经批准用于临床应用(Guertin and Sabatini, 2007;Hudeset al.，2007)，但这些抑制剂仅取得了有限的成功，且临床结果无法预测。由于已知的雷帕霉素抗性机理将其与其通过PI3K和mT0RC2的AKT磷酸化的反馈激活相联(O’ Reilly etal. , 2006; Sarbassov et al. , 2006),因此,关于抗性机理的进一步理解和鉴定有助于预测治疗响应的生物标记成为了重要话题(Mao et al. , 2008; Scott et al. , 2009; Thomas etal. , 2006)。
技术实现思路
本专利技术描述了在人结肠直肠癌(CRC)中，启动子DNA的高甲基使PP2A全酶的B亚基PPP2R2B (其编码B55 β )在表观遗传学上失活。本专利技术人证明了 PP2A-PPP2R2B复合体通过减轻I3DKl指导的Myc磷酸化而发挥肿瘤抑制剂的作用。CRC中导致雷帕霉素抗性的这种特异性ΡΡ2Α复合体的丧失产生了响应mTORCl抑制剂雷帕霉素的强的Myc磷酸化。令人感兴趣的是，不同于雷帕霉素诱导的AKT磷酸化，雷帕霉素诱导的Myc磷酸化不需要P13KCA，但依赖I3DKl。因此，本专利技术人发现了控制TOKl-Myc信号转导的新肿瘤抑制机理，并且证明了此调控中的缺陷产生对基于mTOR的癌症疗法的抗性。根据本专利技术的第一方面，本专利技术人提供了用于测定癌细胞是否可能对mTOR抑制剂治疗具有抗性的方法，所述方法包括检测所述细胞中或所述细胞的(i)PPP2R2B (GenBank登录号NM_181678)，或(ii) TOKl (GenBank 登录号NM_002613)，或以上二者。所述方法可包括检测所述细胞中或所述细胞的PPP2R2B启动子的甲基化。所述方法可包括检测PPP2R2B启动子的高甲基。所述甲基化或高甲基可与没有mTOR抑制剂抗性的癌细胞进行比较。检测到高甲基可表明所述癌细胞可能对mTOR抑制剂的治疗具有抗性。所述方法可包括检测所述细胞中PPP2R2B或F1DKl或以上二者的表达或活性。所述TOKl活性可包括I3DKl介导的Myc磷酸化活性。所述方法可以是与没有mTOR抑制剂抗性的癌细胞相比之下PPP2R2B表达和/或活性的下降表明，所述癌细胞可能对mTOR抑制剂的治疗具有抗性。所述方法可以是与没有mTOR抑制剂抗性的癌细胞相比之下TOKl表达和/或活性的升高表明，所述癌细胞可能对mTOR抑制剂的治疗具有抗性。根据本专利技术的第二方面，本文提供了为患有癌症或疑似患有癌症的个体选择治疗的方法，所述方法包括(a)提供所述患者的细胞；(b)通过上文所述的方法检测所述细胞的mTOR抑制剂抗性；和(c)在所述细胞被确定为没有mTOR抑制剂抗性的情况下，选择mTOR抑制剂对所述个体进行治疗，在所述细胞被确定为具有mTOR抑制剂抗性的情况下，则为所述个体选择不同的治疗。根据本专利技术的第三方面，本专利技术人提供了用于测定患有癌症或疑似患有癌症的个体是否会对mTOR抑制剂治疗作出响应的方法。所述方法可包括对所述个体的细胞实施如上文所述的方法。所述方法可包括，在所述细胞被确定为没有mTOR抑制剂抗性的情况下，确定所述个体可能对mTOR抑制剂治疗作出响应。在本专利技术的第四方面，提供了提高癌细胞对mTOR抑制剂治疗的敏感性的方法，所述方法包括提高所述细胞中或所述细胞的PPP2R2B表达和/或活性，或降低TOKl表达和/或活性，或上述二者。根据本专利技术的第五方面，本专利技术人提供了用于治疗或预防患有癌症或疑似患有癌症的个体的癌症的方法，所述方法包括提高所述个体中或所述个体的PPP2R2B表达和/或活性，或降低F1DKl表达和/或活性,或上述二者。所述方法可以是通过减少PPP2R2B启动子的甲基化而提高PPP2R2B的表达。可通过使所述细胞暴露于，或向患者施用去甲基化试剂，例如5-aza-dC或阿扎胞苷(Azacitidine)而实现所述PPP2R2B启动子的甲基化。所述方法可包括使所述细胞暴露于，或向患者施用I3DKl抑制剂，例如BX912(CAS登录号702674-56-4)或 BX795 (CAS 登录号702675-74-9)。在第六方面，本专利技术提供了用于治疗或预防患有癌症或疑似患有癌症的个体的癌症的方法，所述方法包括施用I3DKl表达和/或活性的抑制剂和mTOR抑制剂。在本专利技术的第七方面，提供了 I3DKl表达和/或活性的抑制剂和mTOR抑制剂的组合，其用在治疗或预防癌症的方法中。根据本专利技术的第八方面，本专利技术人提供了 TOKl表达和/或活性的抑制剂和mTOR抑制剂的组合在制备用于治疗或预防癌症的药物中的应用。根据本专利技术的第九方面，本专利技术人提供了 PPP2R2B或TOKl或以上二者的应用，其作为用于癌细胞对mTOR抑制剂的敏感性的生物标记，或作为用于结肠直肠癌(C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：于强，谭京，
申请(专利权)人：新加坡科技研究局，
类型：发明
国别省市：