本发明专利技术公开了维生素C-布洛芬酯在制备布洛芬脑靶向制剂中的应用及其制备方法。所述的制备方法包括维生素C与溴苄反应的维生素C2，3位羟基保护反应、6位酯化反应及脱苄基反应。反应具有方法简单产率高，反应物价廉易得，生产成本低等优点。且经实验证明，维生素C-布洛芬酯（IAA）在血浆中稳定，在脑浆中迅速水解为布洛芬。小鼠体内分布结果显示，经尾静脉注射维生素C-布洛芬酯后，脑内的布洛芬浓度与布洛芬组（IBU）比较明显升高，其AUC0→8h为布洛芬组的2倍，显示了较强的脑靶向作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及布洛芬前药的制备及应用，尤其是维生素C-布洛芬酯在制备脑靶向制剂中的应用及其制备方法。
技术介绍
非留体抗炎药(NSAID)是一类广泛应用的治疗药物，近年来，有许多证据表明非甾体抗炎药可以作为神经保护剂，用于阿尔茨海黙病(AD)和神经性病变的预防和治疗。治疗 学研究表明，长期使用NSAID可以降低患AD的风险。体外实验表明，NSAID能够抑制P -淀粉样蛋白(AP )增殖，减少AP的生成，并且限制小神经胶质细胞和星形胶质细胞的活性。许多NSAID都对AD有较好的疗效，如布洛芬、氟吡洛芬和吲哚美辛等，但是它们在脑内的分布极少。主要是因为大脑对酸性NSAID的摄取和利用存在阻碍。其脑内递药跟大多数药物一样，均受到血脑屏障(BBB)的限制。大部分的NSAID具有亲脂性，有可能通过被动转运入脑，但在生理PH条件下，NSAID的羧酸基团都以离子形式存在，显著影响了被动扩散转运；BBB还表达大量的转运体，在脑和血浆之间形成显著的浓度梯度，其中有许多转运体证实均能与NSAID结合。此外，NSAID与血清清蛋白都有较强的结合力，使得血浆中药物的游离浓度低于5%，这也对其在脑内的分布产生一定的影响。布洛芬由于在NSAID同类药物中具有疗效高、毒性低的特点，极具临床应用价值。但由于传统的布洛芬制剂难以透过血脑屏障，在脑内的分布极少，在很大程度上限制了布洛芬作为神经保护剂，用于阿尔茨海黙病(AD)和神经性病变方面的广泛应用。因此，设计一种安全有效可提高布洛芬在脑内分布浓度的脑靶向制剂是解决上述问题的关键。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种布洛芬前药作为布洛芬的脑靶向制剂，即维生素C-布洛芬酯，该前药由维生素C与布洛芬以酯键相连合成，易于透过血脑屏障，并在脑内水解为布洛芬及维生素C发挥协同治疗作用。实验证明，前药维生素C-布洛芬酯在水中的饱和溶解度与布洛芬相比，提高了近10倍。与布洛芬相比，维生素C-布洛芬酯脂水分配系数从13下降到7.3。维生素C-布洛芬酯在不同的PH缓冲液中稳定性不同，在酸性和中性环境中较稳定，在碱性条件下降解迅速。37°C血浆中孵育结果表明，维生素C-布洛芬酯在血浆缓慢水解，I小时的降解量约为10%，确保其在到达BBB前不被水解。在脑浆中水解速度较快，I小时约水解50%，产物为布洛芬，且8小时后基本水解完全，提示维生素C-布洛芬酯在脑内能迅速转化布洛芬发挥药效。经静脉注射维生素C-布洛芬酯后，其水解产物布洛芬在小鼠心、肝、肺、等器官组织分布下降，在脑中明显升高。维生素C-布洛芬酯组的AUCdh为布洛芬组的2倍，靶向指数n为199. 82 %，总靶向效率RTE为78%。维生素C-布洛芬酯在血浆和脑中的滞留时间分别提高了 I. 5倍和I. 4倍，提示了维生素C-布洛芬酯的脑靶向性。 抗坏血酸(AscorbicAcid),即维生素C,作为人体必须的营养物质,对大脑的正常运转发挥着重要的作用。已被证实人体中枢神经系统内的抗坏血酸浓度是血液中的200倍。由于维生素C是生理性的内源性物质，“营养物质(或衍生物)-药物”型前药通常也是安全的一一前药经水解后重新生成营养物质，可供机体利用。在多种动物模型上，维生素C的大脑保护作用均被证实。因此，可以预测维生素C-布洛芬酯对人体是安全。为方便该前药的制备，本专利技术进一步公开维生素C-布洛芬酯的制备方法。以布洛芬为起始原料，采用三步反应，即维生素C的2，3位羟基保护反应、6位羟基与布洛芬的酯化反应、脱保护基反应，得到目标化合物维生素C-布洛芬酯。该方法包括以下步骤 I)维生素C 2，3位羟基保护反应将维生素C、碳酸钾溶解于二甲基亚砜中，室温下搅拌2小时后，加入溴苄反应3-6小时。维生素C、碳酸钾和溴苄摩尔比为广3: 2^5: T40 2) 6位酯化反应将上述2、3位苄基保护的维生素C和布洛芬溶解于二甲基甲酰胺中，加入催化量的4-2甲氨基吡啶搅拌10分钟后，加入I-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)，室温下密封反应4 8小时。2、3位苄基保护的维生素C、布洛芬和EDCI摩尔比为I 3: 2 4:1 3。3)脱苄基反应将上述反应产物2、3位苄基保护的维生素C-布洛芬酯溶解于甲醇中，加入5%的钯碳，室温下在纯氢气环境中密封反应24 48小时，得到维生素C-布洛芬酯。上述反应均在室温下操作。上述反应产物经屯匪1 、1%匪1 、—、11 、1^等进行了结构确证。13CNMR结果显示170 ppm至180 ppm处2个C=O化学位移值与维生素C-布洛芬酯的内酯环与新形成的羰基相对应，苯环碳的化学位移清晰可见，120、155 ppm为连接OH的2，3位碳化学位移值Jhnmr积分结果除活泼氢外，与目标化合物氢个数相稳合;uv结果显示目标化合物的最大吸收在225nm处。傅立叶红外分光光度仪检测结果显示，化合物有明显的OH基吸收峰及C=O键的伸缩强振动峰。ESI-MS负电离产生的分子离子峰为363，确证为目标化合物(分子量364. 4)。相对于现有技术本专利技术具有如下优点 I.本专利技术首次成功地解决了布洛芬在脑内药物浓度分布低的问题；所使用的维生素C-布洛芬酯脑祀向煎药祀向指数高。2.该靶向前药的制备方法简单产率高，反应物价廉易得，生产成本低。附图说明图I是维生素C-布洛芬酯的合成路线图。图2是维生素C-布洛芬酯在不同缓冲溶液中的稳定性曲线图。图3是维生素C-布洛芬酯在血浆及脑浆中的稳定性。图4是维生素C-布洛芬酯(IAA)在脑浆中孵育后测得的脑浆中IAA及其水解产物布洛芬(IBU)摩尔浓度变化曲线。图5是分别静脉注射维生素C-布洛芬酯(IAA)与布洛芬(IBU)后小鼠脑中布洛芬的经时曲线。图6是分别静脉注射维生素C-布洛芬酯(IAA)与布洛芬(IBU)后小鼠血浆中布洛芬的经时曲线。图7是分别静脉注射维生素C-布洛芬酯(IAA)与布洛芬(IBU)后小鼠心脏中布洛芬的经时曲线。图8是分别静脉注射维生素C-布洛芬酯(IAA)与布洛芬(IBU)后小鼠肝脏中布洛芬的经时曲线。图9是分别静脉注射维生素C-布洛芬酯(IAA)与布洛芬(IBU)后小鼠肺脏中布洛芬的经时曲线。图10是分别静脉注射维生素C-布洛芬酯(IAA)与布洛芬(IBU)后小鼠肾脏中布洛芬的经时曲线。 具体实施例方式 一、维生素C-布洛芬酯的合成. I.维生素C 2，3位羟基保护。在充满氮气的茄形瓶中加入维生素C、碳酸钾和二甲基亚砜，室温搅拌使溶解，力口溴苄后室温搅拌4-5小时。维生素C、碳酸钾和溴苄的摩尔比为1:3. 2:2. 2。反应液加水稀释后用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，减压挥干旋，得棕黄色黏稠状物。经硅胶柱层析(乙酸乙酯-石油醚，体积比I: I)分离得淡黄色油状物，经检测为2、3位苄基保护的维生素C，合成路线如图I所示。2. 6位酯化反应。分别称取布洛芬及2、3位苄基保护的维生素C，加入无水二氯甲烷搅拌使溶解，力口入4-二甲氨基吡啶(DMAP)及I-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)，反应6小时。2、3位苄基保护的维生素C、布洛芬和EDCI的摩尔比为1:1. 3:1。水洗，减压抽滤，滤液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥，减压挥本文档来自技高网...
【技术保护点】
维生素C？布洛芬酯在制备布洛芬脑靶向制剂中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡海燕，李玲，庹珏，朱文博，颜光美，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：
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