一种快速生长长牡蛎优良品系的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种快速生长长牡蛎优良品系的构建方法，其特征在于：包含以下步骤：A、建立育种基础群体，以壳高和总重为选种目标，以高选择强度留取亲贝，作为基础亲贝群；B、从上一代亲贝群中，采用群体继代选育方法，从上一代亲贝群中挑选一定数量的性腺成熟个体，组成继代亲贝群，采用解剖法进行人工授精；在成熟前期，以高的选择强度留取壳高高、总重重的个体作为繁殖亲贝；C、对步骤B中的继代亲贝群进行数量性状的测定和遗传参数估计；D、重复步骤B和C，同时对三代继代选育系遗传多样性分析，进行选育效果评估。本发明专利技术可大大加快了育种进程，降低选育劳动成本，育种效果明显，可提高长牡蛎养殖的经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于水产遗传育种工艺，具体地说，涉及。
技术介绍
长牡贩(Crassostrea gigas),原产于日本、中国及韩国地区,具有环境适应强、生长快、风味鲜美、营养丰富等优点，是世界上养殖范围最广、产量最高的经济贝类，也是我国最重要的一种海水养殖种类。目前，我国长牡蛎产地主要集中在山东、辽宁、浙江、福建、广东等沿海地区，年产量达到数百万吨，取得了显著的经济效益和社会效益。由于我国养殖的长牡蛎品质低、规格差，无法进入国际主流市场，因此，培育出品质好、生长快、抗逆性强的优质品种，是提高我国牡蛎产品质量的有效途径。
技术实现思路
本专利技术要解决的工艺问题是提供，本专利技术可大大加快了育种进程，降低选育劳动成本，育种效果明显，同时有效避免了近交衰退现象。同时本专利技术还可用于长牡蛎养殖新品种培育，解决长牡蛎生长慢的问题，可提高长牡蛎养殖的经济效益。为解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案是，其特征在于包含以下步骤A、引进日本长牡蛎野生苗种，建立育种基础群体，以壳高和总重为选种目标，以高选择强度留取亲贝，作为基础亲贝群；B、采用群体继代选育方法，从上一代亲贝群中挑选一定数量的性腺成熟个体，组成继代亲贝群，采用解剖法进行人工授精；在成熟前期，以高的选择强度留取壳高高、总重重的个体作为繁殖亲贝；C、对步骤B中的继代亲贝群进行数量性状的测定和遗传参数估计；D、重复步骤B和C，通过继代选亲贝群与未经选育的贝群对照组进行生长性状比较，同时运用分子标记方法对三代继代选育系遗传多样性分析，进行选育效果评估。进一步地说所述日本长牡蛎野生苗种，选取壳高大于138cm，平均壳高为143cm的个体作为亲贝，选择强度为I. 7，并构成基础亲贝群。所述群体继代选育方法，是从每一代备选亲贝群中分别挑选80-100个性腺成熟个体，并且雌、雄各40-50个，解剖剪取性腺进行人工授精，同时以I. 7-1. 9的选择强度，在每一代成熟前期留取壳高长，体重大的个体作为繁殖亲贝。更进一步地说所述步骤D中得到的继代亲贝群，与特定的对照组进行壳高和总重的比较，同时运用10个微卫星标记对步骤D中得到的继代亲贝群的遗传多样性分析，进行选育效果评估。所述10个长牡贩多态性高的微卫星标记，即ucdCg-129, ucdCg-130, ucdCg-134,ucdCg-138, ucdCg-148, ucdCg-149, ucdCg-151, ucdCg-160, ucdCg-198, ucdCg-200,并通过PCR反应体系，进行遗传多样性分析。更进一步地说所述PCR 反应体系为 10μ L 体系，包含 IOOng 模板 DNA、1XPCR buffer,O. 2mM dNTP混合液、lyM$*、l-2mM MgCl2和O. 25U Taq DNA聚合酶。PCR反应条件为94°C预变性3min ;35 个循环为 94°C lmin，退火 lmin，72° C lmin ;72° C 延伸 5min。由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本专利技术可大大加快了育种进程，降低选育劳动成本，育种效果明显，解决长牡蛎生长慢的问题，可提高长牡蛎养殖的经济效益。同时，本专利技术以遗传变异丰富的日本长牡蛎野生苗种为群体选育的基本材料，有利于保留 其遗传多样性，为群体继代选择育种留有很大的空间。而且，在实施过程中留取的亲贝个体数量多，雌雄比例平衡，有效避免了近交衰退现象。具体实施例方式实施例，包含以下步骤A、引进日本长牡蛎野生苗种，建立育种基础群体，以壳高和总重为选种目标，以高选择强度留取亲贝，作为基础亲贝群。B、从上一代亲贝群中，采用群体继代选育方法，从上一代亲贝群中挑选一定数量的性腺成熟个体，组成继代亲贝群，采用解剖法进行人工授精；在成熟前期，以高的选择强度留取壳高高、总重重的个体作为繁殖亲贝。C、对步骤B中的继代亲贝群进行数量性状的测定和遗传参数估计；D、重复步骤B和C，通过继代选亲贝群与未经选育的贝群对照组进行生长性状比较，同时运用分子标记方法对三代继代选育系遗传多样性分析，进行选育效果评估。在本实施例中，所述日本长牡蛎野生苗种，选取壳高大于138cm，平均壳高为143cm的个体作为亲贝，选择强度为I. 7，并组成一代亲贝群。所述群体继代选育方法，是从每一代备选亲贝群中分别挑选80-100个性腺成熟个体，并且雌、雄各40-50个，解剖剪取性腺进行人工授精，同时以I. 7-1. 9的选择强度，在每一代成熟前期留取壳高长，体重大的个体作为繁殖亲贝。另外，在本实施例中，所述步骤D中得到的继代亲贝群，与特定的对照组进行壳高和总重的比较，同时运用10个微卫星标记对步骤D中得到的继代亲贝群的遗传多样性分析，进行选育效果评估。通常情况下，10个长牡蛎多态性高的微卫星标记，即ucdCg-129，ucdCg-130,ucdCg-134， ucdCg-138， ucdCg-148， ucdCg-149， ucdCg-151， ucdCg-160， ucdCg-198，ucdCg-200,并通过PCR反应体系，进行遗传多样性分析。PCR反应体系为10 μ L体系，包含IOOng 模板 DNA、I XPCR buffer,O. 2mM dNTP 混合液、I μ M 引物、l_2mM MgCl2 和 O. 25U TaqDNA聚合酶。PCR反应条件为94° C预变性3min ;35个循环为94° C lmin，退火lmin，72° Clmin ；72° C 延伸 5min。 最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本专利技术的技术方案，而非对本专利技术保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本专利技术的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。权利要求1.，其特征在于 包含以下步骤 A、引进日本长牡蛎野生苗种，建立育种基础群体，以壳高和总重为选种目标，以高选择强度留取亲贝，作为基础亲贝群； B、采用群体继代选育方法，从上一代亲贝群中挑选一定数量的性腺成熟个体，组成继代亲贝群，采用解剖法进行人工授精；在成熟前期，以高的选择强度留取壳高高、总重重的个体作为繁殖亲贝； C、对步骤B中的继代亲贝群进行数量性状的测定和遗传参数估计； D、重复步骤B和C，通过继代选亲贝群与未经选育的贝群对照组进行生长性状比较，同时运用分子标记方法对三代继代选育系遗传多样性分析，进行选育效果评估。2.根据权利要求I所述的快速生长长牡蛎优良品系的构建方法，其特征在于所述日本长牡蛎野生苗种，选取壳高大于138cm，平均壳高为143cm的个体作为亲贝，选择强度为I.7，并构成基础亲贝群。3.根据权利要求I所述的，其特征在于所述群体继代选育方法，是从每一代备选亲贝群中分别挑选80-100个性腺成熟个体，并且雌、雄各40-50个，解剖剪取性腺进行人工授精，同时以I. 7-1. 9的选择强度，在每一代成熟前期留取壳高长，体重大的个体作为繁殖亲贝。4.根据权利要求I所述的，其特征在于所述步骤D中得到的继代亲贝群，与特定的对照组进行壳高和总重的比较，同时运用10个微卫星标记对步骤D中得到的继代亲贝群的遗传多样性分析，进行选育效果评估。5.根据权利要求4所述的快速生长长牡蛎优良品系的构建方法，其特征在于所述10个长牡贩多态本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速生长长牡蛎优良品系的构建方法，其特征在于：包含以下步骤：A、引进日本长牡蛎野生苗种，建立育种基础群体，以壳高和总重为选种目标，以高选择强度留取亲贝，作为基础亲贝群；B、采用群体继代选育方法，从上一代亲贝群中挑选一定数量的性腺成熟个体，组成继代亲贝群，采用解剖法进行人工授精；在成熟前期，以高的选择强度留取壳高高、总重重的个体作为繁殖亲贝；C、对步骤B中的继代亲贝群进行数量性状的测定和遗传参数估计；D、重复步骤B和C，通过继代选亲贝群与未经选育的贝群对照组进行生长性状比较，同时运用分子标记方法对三代继代选育系遗传多样性分析，进行选育效果评估。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李琪，王庆志，丛日浩，孔令锋，王卫军，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：