诊断阿尔茨海默病的成纤维细胞生长模式制造技术

技术编号:7901394 阅读:188 留言:0更新日期:2012-10-23 13:06
提供诊断阿尔茨海默病的方法。提出至少5种诊断测量方法:方法1:综合评分;方法2:每个聚集体数量的平均聚合面积;方法3:细胞迁移分析;方法4:分形分析;方法5:空隙度分析。在某些实施方式中,对象的皮肤样品提供成像的成纤维细胞网络,计算所述图像的分形维数。所述分形维数可与年龄匹配的对照(非阿尔茨海默病)数据库作比较以确定对象是否有阿尔茨海默病。成纤维细胞网络可在基质例如蛋白中培养。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用成纤维细胞生长模式作为生物标记诊断阿尔茨海默病的方法。
技术介绍
阿尔茨海默病(AD)是表征为记忆和认知功能进行性下降的神经变性疾病。估计超过500万美国人患有此进行性和致命疾病。阿尔茨海默病破坏脑细胞,引起降低生活质量的失忆以及思考和行为的问题。AD没有已知的治愈方式,但治疗症状可改善数百万AD患者和其家庭的生活质量。AD的早期诊断给予病人作出最大化生命质量选择的时间,减少关于未知问题的焦虑,有更多时间规划未来,并提供更好的通过治疗获益的机会。需要高度灵敏和高度特异性测试来诊断阿尔茨海默病。本专利技术人第一次鉴定了独特的阿尔茨海默病特异性生物标记,用于以相较先前已知诊断测试的高度灵敏和高度特异性方式诊断阿尔茨海默病。具体地,本专利技术人鉴定成纤维细胞生长模式作为生物标记诊断阿尔茨海默病。因此,本文公开的独特阿尔茨海默病特异性生物标记是高度灵敏和特异性检测及诊断阿尔茨海默病的诊断方法的基础。本专利技术的独特阿尔茨海默病特异性生物标记也可用作脑网络的模型和用于筛选方法以鉴定可用作治疗和预防阿尔茨海默病的治疗剂的化合物。
技术实现思路
在某些优选实施方式中,本专利技术涉及用针对5种单独方法的试验诊断阿尔茨海默病的方法,所述方法在本文中称为(I)综合评分法;(2)每个聚合方法数量的平均聚合面积;(3)细胞迁移分析法;(4)分形分析法;和(5)空隙度分析法。在某些实施方式中,本专利技术涉及诊断人对象内阿尔茨海默病的方法,所述方法包括步骤(a)获得来自人对象的一个或多个细胞;(b)培养所述一个或多个细胞一段时间;(C)测定细胞聚集体的平均面积并将所述平均面积除以聚集体数量以获得每个聚集体数量的面积;(d)将步骤(C)的测定与用非阿尔茨海默病细胞所测每个聚集体数量的面积作比较;和(e)基于步骤(d)的比较诊断有或没有阿尔茨海默病。如果步骤(C)中所测每个聚集体数量的面积大于步骤(d)中所测每个聚集体数量的面积,则所述方法对阿尔茨海默病为阳性。在某些优选实施方式中,差异在统计学上显著。在优选实施方式中,用一种或多种额外诊断方法确认所述诊断。所述一种或多种额外诊断方法选自下组含有测定综合评分的方法、含有计算每个聚集体数量的面积的方法、含有细胞迁移分析的方法;含有分形分析的方法和含有空隙度分析的方法。在优选实施方式中,本文所公开方法使用的细胞是成纤维细胞,尽管可使用其它细胞如血细胞或神经细胞。在某些实施方式中,已知的非阿尔茨海默病细胞是AC细胞。在某些实施方式中,所述细胞在蛋白混合物中培养。所述蛋白混合物可包括含层粘连蛋白、胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、内动素/巢蛋白、和/或其组合的胞外基质制品。所述蛋白混合物还可包括生长因子。所述胞外基质蛋白可提取自肿瘤。在某些实施方式中,所述肿瘤是EHS小鼠肉瘤。在某些实施方式中,本专利技术涉及的方法包括(a)获得来自人对象的一个或多个细胞;(b)培养所述一个或多个细胞一段时间;(c)在所述时间段结束时获得所述细胞的图像;(d)测定所述图像上与细胞网络相关的分形维数;(e)将步骤(d)的测定与已知非阿尔茨海默病细胞相关的独立测定分形维数作比较。在某些实施方式中,如果步骤(d)所测分形维数在统计上显著低于与已知非阿尔茨海默病细胞相关的分形维数,则所述比较指示阿尔茨海默病。在优选实施方式中,用一种或多种额外诊断方法确认AD。所述一种或多种额外诊断方法选自下组含有测定综合评分的方法、含有计算每个聚集体数量的面积的方法、含有细胞迁移分析的方法;含有分形分析的方法和含有空隙度分析的方法。在某些实施方式中,用计盒法计算分形维数。在某些实施方式中,所述计盒法包括边缘检测过程。在某些实施方式中,所述对象与提供已知非阿尔茨海默病细胞的对照对象年龄匹配。在某些实施方式中,所述细胞培养时间段为约24小时或约36小时或约48小时。在某些实施方式中,所述细胞在蛋白混合物中培养。所述蛋白混合物可包括含层粘连蛋白、胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、内动素/巢蛋白、和/或其组合的胞外基质制品。所述蛋白混合物还可包括生长因子。所述胞外基质蛋白可提取自肿瘤。在某些实施方式中,所述肿瘤是EHS小鼠肉瘤。在某些实施方式中,本专利技术涉及的方法包括(a)测定来自人对象的成纤维细胞网络图像的分形维数;(b)测定来自已知非阿尔茨海默病细胞的成纤维细胞网络图像的分形维数;(C)将步骤(a)和(b)的测定作比较。在某些实施方式中,如果步骤(a)所测分形维数在统计上显著低于步骤(b)所测分形维数,则所述诊断指示阿尔茨海默病。在某些实施方式中,所述对象与提供所述已知非阿尔茨海默病细胞的对照对象年龄匹配。在某些实施方式中,本专利技术涉及诊断人对象中阿尔茨海默病的方法,所述方法包括(a)计算所述对象成纤维细胞网络图像的分形维数;(b)比较步骤(a)的计算与已知非阿尔茨海默病细胞相关的独立测定分形维数;其中如果步骤(a)计算的分形维数在统计上显著低于已知非阿尔茨海默病细胞相关的分形维数,所述对象的阿尔茨海默病诊断为阳性。在某些实施方式中,所述对象与提供所述已知非阿尔茨海默病细胞的对照对象年龄匹配。在某些实施方式中,本专利技术涉及诊断人对象中阿尔茨海默病的方法,所述方法包、括(a)用手术刀片获取所述对象外周皮肤成纤维细胞样品;(b)用培养箱孵育所述样品一段时间;(C)用成像仪在所述时间段结束时获取所述样品图像;(d)用电脑计算所述图像上与成纤维细胞网络相关的分形维数;(e)将步骤(d)的计算与已知非阿尔茨海默病细胞相关的独立测定分形维数作比较,其中如果步骤(d)计算的分形维数在统计上显著低于与已知非阿尔茨海默病细胞相关的分形维数,则所述对象的阿尔茨海默病诊断为阳性。在某些实施方式中,所述细胞在蛋白混合物中培养。所述蛋白混合物可包括含层粘连蛋白、胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、内动素/巢蛋白、和/或其组合的胞外基质制品。所述蛋白混合物还可包括生长因子。所述胞外基质蛋白可提取自肿瘤。在某些实施方式中,所述肿瘤是EHS小鼠肉瘤。在某些实施方式中,本专利技术涉及诊断人对象中阿尔茨海默病的方法,所述方法包括(a)用手术刀片获取所述对象外周皮肤成纤维细胞样品;(b)用培养箱孵育所述样品一段时间;(C)用成像仪在所述时间段结束时获取所述样品图像;(d)用电脑计算所述图像上与成纤维细胞网络相关的分形维数;(e)用电脑将步骤(d)的分形维数输入具有分形维数数据的数据库,所述分形维数数据由自获自各个年龄的对照对象的非阿尔茨海默病细胞生 成;(f)通过比较步骤(d)所计算的分形维数与所述数据库数据,用电脑诊断所述对象。在某些实施方式中,所述样品在胶状蛋白混合物中孵育。在某些实施方式中,所述细胞在胶状蛋白混合物中培养或孵育。所述蛋白混合物可包括含层粘连蛋白、胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、内动素/巢蛋白、和/或其组合的胞外基质制品。所述蛋白混合物还可包括生长因子。所述胞外基质蛋白可提取自肿瘤。在某些实施方式中,所述肿瘤是EHS小鼠肉瘤。在某些实施方式中,本专利技术涉及具有分形维数数据的数据库的计算机可读介质,所述分形维数数据由获自各个年龄的对照对象的非阿尔茨海默病细胞生成,所述介质含有以下指令(a)计算图像的分形维数;(b)比较所述分形维数与所述数据库的分形维数数据;和(C)基于步骤(b)的比较输出诊本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:F·V·希里拉T·K·汉D·L·阿尔康
申请(专利权)人:布朗歇特洛克菲勒神经科学研究所
类型:发明
国别省市:

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