一种灵芝醇提物的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种灵芝醇提物的质量控制方法，将灵芝醇提物中的灵芝酸A、B、C2含量之和作为质量控制指标；灵芝醇提物以甲醇作为溶剂，超声提取，灵芝酸A、灵芝酸B经高效液相色谱柱C8分离；灵芝酸C2经高效液相色谱柱C18分离，分别用二极管阵列检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，峰面积外标法定量，分别测定试样中灵芝酸A、B和灵芝酸C2的含量，并计算其总量。赤芝、紫芝及松杉灵芝均含有相对含量较高的特征成分灵芝酸A、B、C2。对比目前常用的比色法测定总三萜含量的方法，特异性强，可达到鉴别和质量控制的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学领域，具体涉及。
技术介绍
灵芝为多孔菌科真菌赤芝fefloofe/ma lucidum (Leyss. ex Fr. ) Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang 或松杉灵芝 fefloofe/ma tsugae Murr.的干燥子实体，具有补气安神、止咳平喘等功效。研究表明，灵芝中主要含有多糖、三萜、核苷、生物碱、黄酮、氨基酸及微量元素等多种化学成分，具有抗肿瘤、免疫调节、护肝、抗氧化、降压、降血脂等功能。目前，药理活性研究主要集中在灵芝多糖和灵芝三萜类成分，特别是对灵芝三萜药理研究报告较多，因此，三萜类成分作为灵芝的主要功效成分之一，很有必要对其含量进行测定。目前，灵芝醇提物的质量控制大多用紫外分光光度法测定总三萜含量，该方法 常出现假阳性，专属性差。高效液相色谱法特异性强，可达到鉴别和质量控制的目的。本专利技术采用高效液相色谱法分离并建立了灵芝醇提物中灵芝酸八3、(2的含量测定方法，并以灵芝酸A、B、C2的总量作为质控指标，为灵芝醇提物的质量控制提供了参考依据。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，将灵芝醇提物中的灵芝酸a、b、c2含量之和作为质量控制指标。赤芝、紫芝及松杉灵芝均含有相对含量较高的特征成分灵芝酸A、B、C2。对比目前常用的比色法测定总三萜含量的方法，特异性强，可达到鉴别和质量控制的目的。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案 ，其特征在于将灵芝醇提物中的灵芝酸A、B、C2含量之和作为质量控制指标; 灵芝醇提物以甲醇作为溶剂，超声提取，灵芝酸A、灵芝酸B经高效液相色谱柱C8分离；灵芝酸C2经高效液相色谱柱C18分离，分别用二极管阵列检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，峰面积外标法定量，分别测定试样中灵芝酸A、B和灵芝酸C2的含量，并计算其总量。灵芝酸A、B测定的色谱条件以辛烷基键合硅胶为键合相(色谱柱AgilentZorbax-SB C8,150 mm X 4. 6 mm, 3. 5 U m或同规格色谱柱)，乙腈为流动相A,体积分数为0.1%的醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为257 nm ;柱温为22 °CV流速为I. 0ml/min ;理论板数按灵芝酸A计算不低于5000 ； 对照品溶液的制备取减压干燥至恒重的灵芝酸A、B对照品，加甲醇制成每Iml含20V- g灵芝酸A和每Iml含15 ii g灵芝酸B的混标溶液； 供试品溶液的制备取灵芝醇提物0. 2g，置IOOml容量瓶中，加甲醇超声处理25min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过； 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20 Ul，注入液相色谱仪，测定，用主峰保留时间定性，峰面积定量。灵芝酸C2测定的色谱条件以十八烷基键合硅胶为键合相(色谱柱=AgilentZorbax-SB C18, 250 mm X 4. 6 mm, 5 U m或同规格色谱柱)，乙腈为流动相A,体积分数为0.1%的醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为257 nm ;柱温为20 °CV流速为I. 0ml/min ;理论板数按灵芝酸C2计算不低于5000 ； 对照品溶液的制备取减压干燥至恒重的灵芝酸C2对照品，加甲醇制成每Iml含10 yg灵芝fe C2的对照品溶液； 供试品溶液的制备取灵芝醇提物0. 2g，置IOOml容量瓶中，加甲醇超声处理25min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过； 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20 Ul，注入液相色谱仪，测定，用主峰保留时间定性，峰面积定量。·灵芝醇提物的制法灵芝经粉碎成粗颗粒,加8-10倍量质量分数为90%的乙醇溶液浸泡2-5小时，70°C _80°C加热2小时，过滤，再加8_10倍量的质量分数为90%的乙醇溶液，70°C-80°C加热2小时，过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，待浓缩至近干时，测定总固体含量，需要时，加适量辅料，混合均匀后干燥至水分低于5%，粉碎过筛即得；赤芝、紫芝符合《中华人民共和国药典》2010年版一部规定,松杉灵芝rfefloofe/ma tsugae Murr.」符合说明书中具体实施方式I. 2的要求。本专利技术的有益效果在于赤芝、紫芝及松杉灵芝均含有相对含量较高的功效成分灵芝酸A、B、C2。对比目前常用的比色法测定总三萜含量的方法，特异性强，可达到鉴别和质量控制的目的。附图说明图I是灵芝酸A、B混标溶液色谱图。峰I :灵芝酸B ;峰2 :灵芝酸A。图2是供试品溶液色谱图。峰I :灵芝酸B ;峰2 :灵芝酸A。图3是灵芝酸C2对照品溶液色谱图。峰3 :灵芝酸C2。图4是供试品溶液色谱图。峰3 :灵芝酸C2。具体实施例方式I、原料要求 I)赤芝、紫芝应符合《中华人民共和国药典》2010年版一部规定。2)松杉灵芝应符合以下规定 范围原料要求适合于松杉灵芝tsugae Murr.彡子实体。表I感官要求本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种灵芝醇提物的质量控制方法，其特征在于将灵芝醇提物中的灵芝酸々』、(:2含量之和作为质量控制指标； 灵芝醇提物以甲醇作为溶剂，超声提取，灵芝酸A、灵芝酸B经高效液相色谱柱C8分离，灵芝酸C2经高效液相色谱柱C18分离，分别用二极管阵列检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，峰面积外标法定量，分别测定试样中灵芝酸A、B和灵芝酸C2的含量，并计算其总量。2.根据权利要求I所述的灵芝醇提物的质量控制方法，其特征在于 (1)灵芝酸A、B测定的色谱条件以辛烷基键合硅胶为键合相，乙腈为流动相A，体积分数为0.1 %的醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为257 nm;柱温为22 °Cr流速为I. 0 ml/min ;理论板数按灵芝酸A计算不低于5000 ； (2)对照品溶液的制备取减压干燥至恒重的灵芝酸A、B对照品，加甲醇制成每Iml含20 Ug灵芝酸A和每Iml含15 Ug灵芝酸B的混标溶液； (3)供试品溶液的制备取灵芝醇提物0.2 g，置100 ml容量瓶中，加甲醇超声处理25min,放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过； (4)测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20Ul，注入液相色谱仪，测定，用主峰保留时间定性，峰面积定量。3.根据权利要求I所述的灵芝醇提物的质量控制方法，其特征在于 (1)灵芝酸C2测定的色谱条件以十八烷基键合...

【专利技术属性】
技术研发人员：王勇，陈硕，卢端萍，蒋婷婷，范明，李晔，吴长辉，
申请(专利权)人：福建省药品检验所，福建仙芝楼生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：