醛缩酶、编码它们的核酸及制备和使用它们的方法技术

本发明专利技术涉及具有醛缩酶活性，包括丙酮酸醛缩酶，例如没有限制地，HMG和/或KHG醛缩酶活性的多肽，编码这些多肽的多核苷酸，和制备并使用这些多核苷酸及多肽的方法。在一些实施方式中，本发明专利技术涉及具有醛缩酶活性，包括丙酮酸醛缩酶，例如没有限制地，HMG和/或KHG醛缩酶活性，包括热稳定性和耐热活性的多肽，编码这些酶的多核苷酸，和制备并使用这些多核苷酸及多肽的方法。依据本发明专利技术的多肽可以被用于多种药物、农业和工业环境。在一些实施方式中，本发明专利技术提供了多肽和生物合成途径，它们被用于产生R-2-羟基2-(吲哚-3基甲基)-4-酮戊二酸（R-MP）和某些monatin立体异构体，如R,R和S,R?monatin及其盐，以及monatin衍生物的某些立体异构体，如R,R和S,R构型及其盐。

【技术实现步骤摘要】
本申请是分案申请，原申请的申请日为2007年3月7日、申请号为200780016408.6(PCT/US2007/063515)、专利技术名称为“”。相关申请的交叉參考本申请要求2006年3月7日提交的美国临时专利申请号60/780，515的权益。专利
本专利技术涉及分子和细胞生物学及生物化学。更特别地，本专利技术涉及具有醛缩酶活性的多肽，编码这些多肽的多核苷酸，以及制造和使用这些多核苷酸和多肽的方法。
技术介绍
Monatin是具有如下化学式的高强度甜味剂

【技术保护点】

【技术特征摘要】
2006.03.07 US 60/780,5151.分离的，合成的或重组的核酸，其编码具有醛缩酶活性的多肽，所述核酸为(a)SEQ ID NO: K SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:5、SEQ ID NO:SEQ ID NO:9、SEQ IDN0:11、SEQ ID N0:13、SEQ ID N0:15、SEQ ID N0:17、SEQ ID N0:19、SEQ ID N0:21、SEQ IDNO:23^SEQ ID NO:25^SEQ ID NO:27^SEQ ID NO:29^SEQ ID N0:31、SEQ ID NO:33^SEQ IDNO:35^SEQ ID NO:37^SEQ ID NO:39^SEQ ID N0:41、SEQ ID NO:43^SEQ ID NO:45^SEQ IDNO:47^SEQ ID NO:49^SEQ ID N0:51、SEQ ID NO:53^SEQ ID NO:55^SEQ ID NO:57^SEQ IDNO:59^SEQ ID N0:61、SEQ ID NO:63^SEQ ID NO:65^SEQ ID NO:67^SEQ ID NO:69^SEQ IDN0:71、SEQ ID N0:73、SEQ ID N0:75、SEQ ID N0:77、SEQ ID N0:79、SEQ ID N0:81、SEQID NO:83^SEQ ID NO:85^SEQ ID NO:87^SEQ ID NO:89^SEQ ID N0:91、SEQ ID NO:93^SEQID NO:95^SEQ ID NO:97^SEQ ID NO:99^SEQ ID NO:101、SEQ ID N0:103、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO: 107、SEQ IDN0:109、SEQ ID NO: 111、SEQ ID NO: 113、SEQ ID NO: 115、SEQ IDNO: 117、SEQ ID NO: 119、SEQ ID NO: 121、SEQ ID NO: 123、SEQ ID NO: 125、SEQ IDNO:127、SEQ ID NO: 129、SEQ ID NO: 131、SEQ ID NO: 133、SEQ ID NO: 135、SEQ ID NO: 137、SEQ IDNO:139、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:143、SEQ IDNO:145、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:149、SEQ ID NO: 151、SEQ ID NO: 153、SEQ ID NO: 155、SEQ ID NO: 157、SEQ ID NO: 159、SEQ IDNO:161、SEQ IDNO:163、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:167、SEQ ID NO:169、SEQ ID NO:171、SEQ ID NO: 173、SEQ ID NO: 175、SEQ ID NO: 177、SEQ ID NO: 179、SEQ IDNO:181、SEQ IDNO:183、SEQ ID NO:185^SEQ ID NO:187、SEQ ID NO:189^SEQ ID NO:191、SEQ ID NO:193、SEQ ID NO: 195、SEQ ID NO: 197、SEQ IDNO:199、SEQ ID N0:201、SEQ ID N0:203、SEQ IDNO:205^SEQ ID NO:207^SEQ ID NO:209^SEQ ID NO:211、SEQ ID NO:213、SEQ ID NO:215、SEQ IDNO:217、SEQ ID NO:219、SEQ ID NO:221、SEQ ID NO:223、SEQ ID NO:225、SEQ IDNO:227^SEQ ID NO:229、SEQ ID NO:231、SEQ ID NO:233、SEQ IDNO:235、SEQ ID NO:237、SEQ ID NO:239^SEQ ID NO:241、SEQ ID NO:243^SEQ ID NO:245、SEQ ID NO:247^SEQ IDNO:249^SEQ ID NO:251、SEQ IDNO:253、SEQ ID NO:255^SEQ ID NO:257^SEQ ID NO:259^SEQID NO:261、SEQ ID NO:263、SEQ ID NO:265、SEQ ID NO:267^SEQ ID NO:269^SEQ IDNO:27USEQ ID NO:273^SEQ ID N0:277、SEQ ID NO:279^SEQ ID N0:281、SEQ ID NO:283^SEQ IDNO:285^SEQ ID N0:287、SEQ ID NO:289^SEQ IDNO:29U SEQ ID NO:293^SEQ ID N0:295、SEQ ID NO:297、SEQ ID NO:299、SEQ ID NO:301、SEQ ID NO:303、SEQ ID NO:305、SEQ IDNO:307^SEQ IDNO:309^ SEQ ID N0:311、SEQ ID N0:313、SEQ ID N0:315、SEQ ID N0:317、SEQ ID N0:319、SEQ ID N0:321、SEQ ID N0:323、SEQ ID N0:325、SEQ IDN0:327、SEQ IDNO:329^SEQ ID N0:331、SEQ ID NO:333^SEQ ID N0:335、SEQ ID NO:336^SEQ ID NO:337或 SEQ ID NO :338 ；(b)编码SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:6、SEQ ID N0:8、SEQ IDN0:10、SEQID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18、SEQ IDN0:20、SEQ ID NO:22、SEQID NO:24、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ IDN0:30、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQID NO:36^SEQ ID NO:38^SEQ IDNO:40^SEQ ID NO:42^SEQ ID NO:44^SEQ ID NO:46^SEQID NO:48^SEQ IDN0:50、SEQ ID NO:52^SEQ ID NO:54^SEQ ID NO:56^SEQ ID NO:58^SEQIDNO:60^SEQ ID N0:62、SEQ ID NO:64^SEQ ID NO:66^SEQ ID NO:68^SEQ IDNO:70^SEQ IDNO:72^SEQ ID NO:74^SEQ ID NO:76^SEQ ID NO:78^SEQ IDNO:80^SEQ ID NO:82^SEQ IDNO:84、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:88、SEQ IDNO:90,SEQ ID NO:92、SEQ ID NO:94、SEQ IDNO:96、SEQ ID NO:98、SEQ IDNO:100,SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:106、SEQID NO:108,SEQ ID NO:110,SEQ ID NO:112,SEQ ID NO:I14,SEQ ID NO:116,SEQ IDN0:118、SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:122、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:128、SEQ IDNO:130、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:134、SEQ IDNO:136, SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:140、SEQ ID NO:142、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:148、SEQ ID NO:150、SEQ IDNO:152、SEQ IDNO:154, SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:158、SEQ ID NO:160、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO: 164、SEQ ID NO: 166、SEQ ID NO: 168、SEQ ID NO: 170、SEQ IDN0:172、SEQ IDNO:174、SEQ ID NO:176、SEQ ID NO:178、SEQ ID NO:180、SEQ ID NO:182、SEQ ID NO:184、SEQ ID NO: 186、SEQ ID NO: 188、SEQ IDN0:190、SEQ ID NO: 192、SEQ ID NO: 194、SEQ ID NO:196、SEQ ID NO:198、SEQ ID NO:200、SEQ ID NO:202、SEQ ID NO:204、SEQ ID NO:206、SEQ IDNO:208, SEQ ID NO:210、SEQ ID NO:212、SEQ ID NO:214、SEQ ID NO:216、SEQ IDNO:218、SEQ ID NO:220、SEQ ID NO:222、SEQ ID NO:224、SEQ IDNO:226,SEQ ID NO:228、SEQ ID NO:230、SEQ ID NO:232、SEQ ID NO:234、SEQ ID NO:236、SEQ ID NO:238、SEQ IDNO:240、SEQ ID NO:242、SEQ IDNO:244、SEQ ID NO:246、SEQ ID NO:248、SEQ ID NO:250、SEQID NO:252,SEQ ID NO:254,SEQ ID NO:256,SEQ ID NO:258,SEQ ID NO:260,SEQ IDNO:262,SEQ ID NO:264、SEQ ID NO:266、SEQ ID NO:268、SEQ ID NO:270、SEQ ID NO:272、SEQ IDNO:274、SEQ ID NO:278、SEQ ID NO:280、SEQ IDNO:282,SEQ ID NO:284、SEQ ID NO:286、SEQ ID NO:288、SEQ ID NO:290、SEQ ID NO:292、SEQ ID NO:294、SEQ ID NO:296、SEQ IDNO:298、SEQ IDNO:300,SEQ ID NO:302、SEQ ID NO:304、SEQ ID NO:306、SEQ ID NO:308、SEQ ID NO:310、SEQ ID NO:312、SEQ ID NO:314、SEQ ID NO:316、SEQ IDNO:318, SEQ IDNO:320、SEQ ID NO:322、SEQ ID NO:324、SEQ ID NO:326、SEQ ID NO:328、SEQ ID NO:330、SEQ ID NO:332 或 SEQ ID NO:334 的序列的核酸； (c)与(a)或(b)互补的核酸序列。2.权利要求I所述的核酸，其中所述醛缩酶活性是丙酮酸醛缩酶活性。3.权利要求I所述的核酸，其中所述醛缩酶活性是HMG醛缩酶活性。4.权利要求I所述的核酸，其中所述醛缩酶活性是KHG醛缩酶活性。5.表达盒，其包括权利要求I中所述的序列。6.权利要求5所述的表达盒，其中所述表达盒是载体。7.权利要求6所述的表达盒，其中所述载体是克隆载体。8.权利要求7所述的表达盒，其中所述克隆载体是病毒载体、质粒或人工染色体。9.权利要求8所述的表达盒，其中所述病毒载体是噬菌体。10.权利要求9所述的表达盒，其中所述噬菌体是噬菌粒或细菌噬菌体。11.权利要求8所述的表达盒,其中所述质粒是粘粒。12.权利要求11所述的表达盒，其中所述粘粒是...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·伯克，P·M·希克斯，P·卢京比尔，T·理查德森，D·P·维那，L·赵，
申请(专利权)人：维莱尼姆公司，
类型：发明
国别省市：