一种喹乙醇残留标示物高偶联比的全抗原合成方法技术

本发明专利技术公开一种高偶联比的喹乙醇残留标示物全抗原合成方法。该方法采用N,N'-二异丙基碳二亚胺为催化剂，3-甲基喹喔啉-2-羧酸与过量的N-羟基琥珀酰亚胺发生酯化反应，酯化物再与载体蛋白偶联反应即得到高偶联比的喹乙醇残留标示物全抗原。本发明专利技术使用的催化剂安全性更高，不易造成操作人员的过敏，且副产物少，所得全抗原偶联比可达到32～62；所得抗原免疫小鼠后，可得到抗体效价在128000以上的MQCA多克隆抗体，与喹乙醇、喹唏酮、痢菌净的交叉反应性均小于20%，与氯霉素、盐酸克伦特罗、抗生素类等无交叉反应性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫化学分析
，具体涉及ー种喹こ醇残留标示物高偶联比的全抗原合成方法。
技术介绍
喹こ醇又称喹酰胺醇，商品名为倍育诺、快育灵，有 中度至明显的蓄积毒性，对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在的三致性，即致畸形，致突变，致癌，由于其在饲料及饲料添加剂中滥用所引起的食品安全问题备受关注，对喹こ醇及其残留标示物3-甲基喹喔啉-2-羧酸(MQCA)残留快速检测试剂盒和胶体金试纸条的研究成为近年来国内热点。3-甲基喹喔啉-2-羧酸为小分子物质，不能刺激动物机体产生免疫应答获得抗体，需与大分子物质如牛血清白蛋白、卵清白蛋白、钥孔戚血蓝蛋白等联接作为免疫全抗原。研究发现半抗原能否刺激机体产生高特异性的抗血清不仅决定于它与蛋白质的结合位点，而且取决于蛋白质上连接的半抗原数目。已有的3-甲基喹喔啉-2-羧酸全抗原合成方法都选用N，N’-ニ环已基碳ニ亚胺(DCC)作为催剂，但该催化剂的缺点是合成过程中容易产生的副产物N，N’ - ニ环已基脲且不易除净，该副产物对皮肤、眼睛有刺激性，引起发炎，所得全抗原的偶联比一般只有10 :1左右。目前国内尚未建立合理、可靠的喹こ醇残留标示物全抗原偶联比检测方法，其偶联比的測定方法主要为紫外分光光度法，该方法的专属性不强，准确度不高。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供ー种安全性好、效率高、高偶联比的3-甲基喹喔啉-2-羧酸全抗原的合成方法。本专利技术获得3-甲基喹喔啉-2-羧酸全抗原的合成方法如下 在N，N’ - ニ异丙基碳ニ亚胺存在下，3-甲基喹喔啉-2-羧酸与N-羟基琥珀酰亚胺发生酷化反应，反应产物再与载体蛋白偶联，得到全抗原。所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清白蛋白或钥孔戚血蓝蛋白。合成路线为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.喹乙醇残留标示物高偶联比的全抗原合成方法，其特征在于在N，N’-二异丙基碳二亚胺存在下，3-甲基喹喔啉-2-羧酸与N-羟基琥珀酰亚胺发生酯化反应，反应产物再与载体蛋白偶联，得到全抗原。2.根据权利要求I所述喹乙醇残留标示物高偶联比的全抗原合成方法，其特征在于所述3-甲基喹喔啉-2-羧酸与N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔用量比为I : (I. 5 2)。3.根据权利要求I所述喹乙醇残留标示物高偶联比的全抗原合成方法，其特征在于所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清白蛋白或钥孔戚...

【专利技术属性】
技术研发人员：张景艳，李建喜，张凯，杨志强，王磊，王学智，张宏，孟嘉仁，秦哲，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，
类型：发明
国别省市：