本发明专利技术公开了一种冬虫夏草菌种培养方法，所述方法为将自然冬虫夏草经分离纯化、试管斜面种、振荡器液体一级种、二级种、小型种子发酵种子罐、生产发酵罐、浓缩、和喷粉干燥，得成品菌粉。本发明专利技术的效果是：通过本发明专利技术冬虫夏草菌种培养方法，能够增加冬虫夏草的产量，从根本上降低冬虫夏草的价格，为广大患者减轻疾病的痛苦发挥作用，为我国传统医药宝库中又增加另一朵奇葩。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种。
技术介绍
冬虫夏草(学名Cordyceps sinensis)，又名中华虫草，又称为夏草冬虫，简称虫草，真菌门，子囊菌亚门。是中国传统的名贵中药材，它是由肉座菌目麦角菌科虫草属的冬虫夏草菌寄生于高山草甸土中的蝠蛾幼虫，使幼虫僵化，在适宜条件下，夏季由僵虫头端抽生出长棒状的子座而形成，即冬虫夏草菌的子实体与僵虫菌核(幼虫尸体)构成的复合体。它主要产于中国青海、西藏、新疆、四川、云南、甘肃、贵州等省及自治区的高寒地带和雪山草原。真正的冬虫夏草均为野生，生长在海拔3000米至5000米的高山草地灌木带上面的雪线附近的草坡上，对自然环境要求高。夏季，虫子卵产于地面，经过一个月左右孵化变成幼虫后钻入潮湿松软的土层。土里的一种霉菌侵袭了幼虫，在幼虫体内生长。经过一个冬天，到第二年春天来临，霉菌菌丝开始生长，到夏天时长出地面，外观象一根小草，这样，幼虫的躯壳与霉菌菌丝共同组成了一个完整的冬虫夏草。菌孢把虫体作为养料，生长迅速，虫体一般为四至五厘米，菌孢一天之内即可长至虫体的长度，这时的虫草称为头草，质量最好；第二天菌孢长至虫体的两倍左右，称为二草，质量次之。因为僵化后会长出根须，所以被称作冬虫夏草。药理学现代研究结果中，青海冬虫夏草含有虫草酸约7%，碳水化合物28. 9%，脂肪约8. 4%，蛋白质约25%，脂肪中82. 2%为不饱和脂肪酸，此外，尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。由于野生冬虫夏草分布地区狭窄、自然寄生率低、对生活环境条件要求苛刻，所以本身资源比较有限。近年来又由于冬虫夏草主产地生态环境遭到人为严重破坏，大量盲目不合理采挖致使资源日趋减少，产量逐年下降。青藏高原的冬虫夏草分布在西藏的那曲地区，林芝地区，昌都地区，青海的玉树地区、果洛州一带，四川的阿坝州壤塘；甘孜州理塘、巴塘、德格，云南迪庆州德钦、中甸以北一带；甘肃省甘南州玛曲以西等地。冬虫夏草是我国特有的一类珍贵药材，具有极高的医疗保健价值加经济价值，在国内外享有盛誉，素有“东方传奇式珍宝”之美称，是我国传统的出口创汇商品，所以，冬虫夏草是我国传统医药宝库中的一朵奇葩。唯有冬虫夏草的医疗保健价值及经济价值最高，所以在国内外真菌界、医药界、食品界、生物界等多年来致力于研究开发的重点。冬虫夏草具有抗疲劳、耐缺氧、抗衰老、抗肿瘤以及提高人体免疫功能等多种医疗 保健作用。对人体可起到滋肺补肾、止血化痰、平喘、扩张气管、镇静抗各类细菌、降血压等作用。冬虫夏草中含有虫草素、冲草酸多种人体必需氨基酸，有益微量元素的维生素、虫草多糖、超氧化物歧化酶(SOD)等多种营养物质和抗癌抗衰老的活性物质，主要成份之一虫草素是一种具有抗生作用和抑制细胞分裂作用的物质，能抑制癌细胞的增生。国内外同位素检测技术对冬虫夏草研究证明冬虫夏草中虫草素和冲草酸不仅具有补肾壮阳、益精定喘的作用，而且能明显地对抗细胞衰老。冬虫夏草生长在我国西部与西南部的高寒地区，生长环境特殊，资源有限，随着多年来国内外的深入研究，进一步认识到冬虫夏草对人体的医疗和滋补研究，进一步认识到冬虫夏草对人体的医疗和滋补所具有的重要价值，需求不断增加，由于天然冬虫夏草资源本就不多，加上虫草资源数量锐减，产量不断下降，供求矛盾日益加剧，造成市场供求脱节，价格昂贵，针对这种情况，投入对冬虫夏草的人工引种驯化，栽培遗传及应用等方面的研究工作之中，作为一种有发展潜力的新技术新工艺，开辟药源生物发酵技术确实具有重大价值和发展前途。
技术实现思路
本专利技术需要解决的技术问题就在于克服现有技术的缺陷，提供一种。为解决上述问题，本专利技术采用如下技术方案 本专利技术提供了一种，所述方法为将自然冬虫夏草经分离纯化、试管斜面种、振荡器液体一级种、二级种、小型种子发酵种子罐、生产发酵罐、浓缩、和喷粉干燥，得成品菌粉。分离纯化步骤的具体要求为 (I)材料要求进行冬虫夏草的组织块分离法，分离材料是每年的10月底至11月份，青藏高原高寒草甸土壤刚开始冻结时期采的材料，这个时期冬虫夏草菌刚感染蝠蛾幼虫进入僵虫期不长时间，嫩小的子座芽刚长出虫头部O. 2-0. 5cm，虫体内其他杂菌较少； (2)分离操作方法，有以下3个步骤 a.僵虫体(即菌核)的分离分离前，用水刷洗干净主体表面，再用无菌水清洗2— 3次；用O. 1% 一 O. 2%的升汞溶液，对分离材料进行约3 — 5min的表面消毒；再用无菌水清洗。选取与胸足为界的前段部分。用解剖刀切去表皮，避开消化道，取血腔菌丝切成芝麻粒大小，压入平板培养基中，每皿I 一 2粒。置于15 — 19°C中培养,待菌落长出O. 2 — O. 5cm时，挑选少量菌丝反复在平板培养基上分纯2 — 4次，确定无其他杂菌后，移入试管保存和培养； b.子座芽分尚从僵虫头顶切下洗净的子座芽，置入O.1%升萊液中消毒2 — 3min,用无菌水洗净，切取中间部位组织块压入培养基中；培养条件同a ； c.子囊孢子分离用透明纸袋套住子囊孢子成熟的子座，让子囊孢子弹跳粘贴在纸袋上，然后，把有子囊孢子的纸袋浸入25%的葡萄糖液中，洗下孢子，放入15 — 19°C中培养，每天镜检，当袍子萌发时，用微吸管吸单个孢子滴于平板中培养；培养条件同a ； 也可把整个成熟的冬虫夏草带回室内，用棉纸把僵虫和连虫体的子座包住，仅留出有孕部分，在无菌室中，横放，下置一片载玻片，随时保持主体湿度；每天镜检，当看到子囊孢子弹到玻片时，用微吸管吸到平皿的培养基中培养；培养条件同a。(3)培养基的选用 a.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，此种配方是所有虫草菌属真菌的通用培养基，在、分离培养初期可用该配方，不过菌种生长不十分旺盛，而且易老化、退化； b.加富培养基(I):多性蛋白脐10g，葡萄糖50g，磷酸氢二钾lg，硫酸镁O. 5g，活蚕蛹30g，生长素 O. 5 μ g，琼脂 20g,加水 IOOOmL, pH :5. O ; 加富培养基(II ):蛋白脯40g，葡萄糖40g，去皮鲜马铃薯100g，磷酸氢二钾lg，硫酸镁O. 5g，牛肉膏10g，生长素O. 5 μ g，蝠蛾活幼虫(磨碎)30g,琼脂20g，高寒草甸土浸出液IOOOmL, pH :5· O。在加富培养基上，菌落比在PDA培养基上生长旺盛和迅速；加富II号又优于I号。冬虫夏草菌分离纯化后，即可作为各种实验和扩大生产应用； (I)其扩大生产的方法常有三种固体静置培养法、振荡培养法和大罐通气发酵培养 法; a.静置培养主要用在固体培养，如试管斜面、三角瓶培养、米饭培养等等。在静置培养中只要掌握好温度和光照即可使菌正常生长。当斜面上的分生孢子成熟后，即可存入1-2°C的冰箱中保存8-14个月，也可作为种子直接用于生产； b.振荡培养采用液体培养菌种或小规模繁殖培养，都可用振荡培养；振荡培养的培养基，把固体培养基减去琼脂即可；设备最好选用恒温振荡培养机，用三角瓶置液体培养基，把试管固体菌种接入即可培养。经不断振荡使液体培养基中各种成分混合均匀而不致沉淀，同时促进气体与液体接触和交换，使氧进入液体培养基中，利于菌丝生长和分生孢子形成； c.大罐通气发酵培养在大规模生产菌丝和分生孢子等菌粉时，必须用大罐通气发酵培养法；该方法通气是采用吸气或真空泵本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种冬虫夏草菌种培养方法，其特征在于所述方法为将自然冬虫夏草经分离纯化、试管斜面种、振荡器液体一级种、二级种、小型种子发酵种子罐、生产发酵罐、浓缩、和喷粉干燥，得成品菌粉。2.如权利要求I所述的冬虫夏草菌种培养方法，其特征在于，分离纯化步骤的具体要求为 (I)材料要求进行冬虫夏草的组织块分离法，分离材料是每年的10月底至11月份，青藏高原高寒草甸土壤刚开始冻结时期采的材料，这个时期冬虫夏草菌刚感染蝠蛾幼虫进入僵虫期不长时间，嫩小的子座芽刚长出虫头部O. 2-0. 5cm，虫体内其他杂菌较少； (2)分离操作方法，有以下3个步骤 a.僵虫体(即菌核)的分离分离前，用水刷洗干净主体表面，再用无菌水清洗2— 3次；用O. 1% 一 O. 2%的升汞溶液，对分离材料进行约3 — 5min的表面消毒；再用无菌水清洗；选取与胸足为界的前段部分；用解剖刀切去表皮，避开消化道，取血腔菌丝切成芝麻粒大小，压入平板培养基中，每皿I 一 2粒,置于15 — 19°C中培养,待菌落长出O. 2 — O. 5cm时，挑选少量菌丝反复在平板培养基上分纯2 — 4次，确定无其他杂菌后，移入试管保存和培养； b.子座芽分尚从僵虫头顶切下洗净的子座芽，置入O.1%升萊液中消毒2 — 3min,用无菌水洗净，切取中间部位组织块压入培养基中；培养条件同a ； c.子囊孢子分离用透明纸袋套住子囊孢子成熟的子座，让子囊孢子弹跳粘贴在纸袋上，然后，把有子囊孢子的纸袋浸入25%的葡萄糖液中，洗下孢子，放入15 — 19°C中培养，每天镜检，当袍子萌发时，用微吸管吸单个孢子滴于平板中培养；培养条件同a ； 也可把整个成熟的冬虫夏草带回室内，用棉纸把僵虫和连虫体的子座包住，仅留出有孕部分，在无菌室中，横放，下置一片载玻片，随时保持主体湿度；每天镜检，当看到子囊孢子弹到玻片时，用微吸管吸到平皿的培养基中培养；培养条件同a ； (3)培养基的选用 a.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，此种配方是所有虫草菌属真菌的通用培养基，在分离培养初期可用该配方，不过菌种生长不十分旺盛，而且易老化、退化； b.加富培养基(I):多性蛋白脐10g，葡萄糖50g，磷酸氢二钾lg，硫酸镁O.5g，活蚕蛹30g，生长素 O. 5 μ g，琼脂 2...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘继军，
申请(专利权)人：刘继军，
类型：发明
国别省市：
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