藏红花副产物花瓣及雄蕊总黄酮提取纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种藏红花副产物花瓣及雄蕊总黄酮提取纯化方法，工艺步骤如下：（1）提取：以藏红花花瓣及雄蕊的干燥粉末为原料，以乙醇水溶液为提取溶剂，按照原料的质量（g）：提取溶剂的体积（mL）=1:10~60的比例将原料与提取溶剂加入提取容器中，在常压、25℃条件下超声提取15~90min，过滤，将所得滤液减压浓缩，得浸膏；（2）纯化：将步骤（1）所得浸膏用水配制成上样液上样到大孔树脂柱上，静置吸附至少2h，吸附时间届满后，以水进行洗脱，弃掉洗脱液，再用乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩、真空干燥至恒重，即得纯化的藏红花花瓣及雄蕊总黄酮。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药有效成分提取纯化领域，特别涉及一种。
技术介绍
藏红花花瓣 及雄蕊为鳶尾科番红花属球根类草本植物藏红花(Crocus sativus)的干燥花瓣及雄蕊。藏红花原产于南欧以及伊朗等国，在我国的上海、浙江、江苏、山东、北京等地有栽培。藏红花的柱头是其主要药用部分，具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神之功效，可抑制肝炎病毒，提高免疫力，并具有抗癌活性和低毒性药理作用，被称为“植物黄金”。此外，国际上还将藏红花作为珍贵的调味剂、天然色素、香料及染料使用。一直以来，人们对藏红花的研究主要集中于柱头，而忽略了花瓣、雄蕊等副产品的利用，造成了资源的浪费。目前，从藏红花花被中分离得到的化学成分主要有黄酮及其苷类化合物，藏红花的花瓣及雄蕊中含有多糖、黄酮等有益成分和活性物质，黄酮类物质对冠心病、心绞痛、高血压、心血管疾病有很好的疗效，同时还有显著的清除人体内自由基、抗老化、抗突变、降血压等药理保健功能。张兰杰等采用索氏提取法对藏红花中的总黄酮类化合物进行了提取，以双波长分光光度法对总黄酮含量进行了测定，见“张兰杰，辛广，谷昊等.双波长分光光度法测定藏红花中总黄酮含量.特产研究，2006，(3) :36-37”，但到目前为止没有人对藏红花副产物一花瓣及雄蕊中的总黄酮的提取纯化进行专门的研究。本专利申请的专利技术人曾采用索氏提取法对藏红花花瓣及雄蕊总黄酮进行提取，但索氏提取法需要加热回流，操作复杂，且提取所需时间过长(4飞小时)，长时间的加热提取又会造成能耗过高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种藏红花副产物一花瓣及雄蕊总黄酮的提取纯化方法，此方法操作简单，可缩短提取时间，节约成本。本专利技术所述，工艺步骤如下(I)提取以藏红花花瓣及雄蕊的干燥粉末为原料，以乙醇水溶液为提取溶剂，按照原料的质量提取溶剂的体积=1:1(Γ60的比例将原料与提取溶剂加入提取容器中，在常压、25°C条件下超声提取15、0min，过滤，将所得滤液减压浓缩，得浸膏；所述原料的质量以克计，提取溶剂的体积以毫升计；(2)纯化将步骤(I)所得浸膏用水配制成上样液上样到大孔树脂柱上，静置吸附至少2h，吸附时间届满后，以水进行洗脱，弃掉洗脱液，再用乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩、真空干燥至恒重，即得纯化的藏红花花瓣及雄蕊总黄酮；所述上样液的上样量为2 20BV。上述方法中，所述提取溶剂中乙醇的体积分数为3(Γ80%，所述超声提取时的超声功率为150 300W。上述方法中，所述原料的质量提取溶剂的体积优选为1:1(Γ30，所述超声提取的时间优选为3(T60min。上述方法中，所述静置吸附的时间优选为2飞h，所述上样液的上样量优选为5 10BV。 上述方法中，所述提取溶剂中乙醇的体积分数优选为509Γ70%，所述超声功率优选为 240 300W。上述方法中，所述上样液中总黄酮的浓度为O. 6飞mg/mL，上样流速为O. 5 4BV/h。 上述方法中，用乙醇水溶液进行洗脱时，所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数为40 80%，洗脱流速为I 5BV/h，乙醇水溶液的量为2 10BV。上述方法中，用水进行洗脱时，洗脱流速为O. 5 2BV/h，水的量至少为5BV，所述水为蒸馏水、去离子水、超纯水中的一种。上述方法中，所述上样液中总黄酮的浓度优选为I. 2^2. 3mg/mL，所述上样流速优选为 O. 5 I. 5BV/h0上述方法中，用乙醇水溶液进行洗脱时，所述乙醇水溶液中乙醇的体积分数优选为60 80%，洗脱流速优选为f 3BV/h，乙醇水溶液的量优选为6 10BV。上述方法中，所述大孔树脂为AB-8大孔树脂，所述AB-8大孔树脂为苯乙烯型弱极性共聚体，其外观为乳白色或浅黄色不透明球状颗粒，粒径范围为O. 3^1. 25mm，含水量为65 75%，比表面积彡480m2/g，比照吸附量(酚/干基)彡45mg/g。上述方法中，通常采用径高比为I :30的大孔树脂柱进行操作。本专利技术具有以下有益效果(I)本专利技术将作为藏红花副产物的花瓣及雄蕊加以利用，从中提取纯化出的总黄酮纯度大于59%，达药用标准(2010版《中国药典》中药质量标准研究制定技术要求)，可避免资源的浪费。(2)由于本专利技术所述方法采用超声辅助提取，在室温进行操作，不用长时间加热回流，因而提取操作简便、提取时间缩短(仅用15、0min)、能耗更低(见对比例广3)。(3)从实施例1飞可知，本专利技术采用的大孔树脂对藏红花花瓣及雄蕊总黄酮的吸附率达96%以上，解吸率达94%以上，且可再生、反复使用，不仅能高效纯化目标物，而且节约成本。(4)本专利技术采用乙醇作为提取及洗脱溶剂，廉价、无毒、可回收利用，既保证药用安全，又对环境友好。(5)从实施例1飞可知，本专利技术所述方法对藏红花花瓣及雄蕊总黄酮的提取率均在4%左右，经大孔树脂柱纯化后总黄酮的纯度均大于59%，说明本专利技术所述方法具有良好的重现性。附图说明图I为本专利技术所述纯化的藏红花花瓣及雄蕊总黄酮的紫外扫描光谱图。具体实施例方式下面通过实施例对本专利技术所述作进一步说明。以下各实施例中，所使用的AB-8大孔树脂，购于沧州宝恩化工有限公司，净品级，使用前先用f2BV无水乙醇浸泡24h，再用蒸馏水洗至无醇味即可；所使用的大孔树脂柱的径高比为I :30。以下各实施例中，大孔树脂的再生方法如下纯化时当用乙醇水溶液洗脱完毕后，即用乙醇体积分数为95%的乙醇水溶液洗，至流出液无色时，再用蒸馏水洗，至流出液无醇味即完成再生。实施例I(I)提取以藏红花花瓣及雄蕊的干燥粉末为原料，以乙醇体积分数为30%的乙醇水溶液为提取溶剂，按照原料的质量(g):提取溶液的体积(mL) =1:60的比例将原料和提取溶剂加入提取容器中，在常压、25°C、150W超声功率条件下提取90min，过滤，将所得滤液减压浓缩，得浸膏；经AlCl3显色，用紫外分光光度法测得总黄酮提取率为3. 96%。 (2)纯化将步骤(I)所得浸膏用蒸馏水配制成总黄酮浓度为O. 6mg/mL的上样液，取20BV上样液以O. 5BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱上，静置吸附2h，大孔树脂对总黄酮的吸附率为96. 4% ;吸附时间届满后，以5BV蒸馏水以O. 5BV/h的流速进行洗脱，弃掉洗脱液，再用IOBV乙醇体积分数为40%的乙醇水溶液以lBV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，洗脱完毕，大孔树脂对总黄酮的解吸率为94. 7% ;将洗脱液减压浓缩、真空干燥至恒重，即得纯化的藏红花花瓣及雄蕊总黄酮；经AlCl3显色，用紫外分光光度法测得总黄酮纯度为61.05%。本实施例所得纯化的总黄酮的紫外扫描光谱图见图I。实施例2(I)提取以藏红花花瓣及雄蕊的干燥粉末为原料，以乙醇体积分数为40%的乙醇水溶液为提取溶剂，按照原料的质量(g):提取溶液的体积(mL) =1:50的比例将原料和提取溶剂加入提取容器中，在常压、25°C、180W超声功率条件下提取75min，过滤，将所得滤液减压浓缩，得浸膏；经AlCl3显色，用紫外分光光度法测得总黄酮提取率为4. 66%。(2)纯化将步骤(I)所得浸膏用蒸馏水配制成总黄酮浓度为I. 2mg/mL的上样液，取IOBV上样液以lBV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱上，静置吸附3h，大孔树脂对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：白洁，王晓萌，陈放，普廷科，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：