5-FU的检测方法技术

本发明专利技术提供了用于检验分析5-FU的方法、组合物、设备及试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般涉及诊断试验，特别是在患者样品中对于试验的组合物和诊断方法。
技术介绍
5-氟尿嘧啶(5-FU)是在癌症治疗中最重要的化疗药物之一。通常用于直肠癌，胃癌，乳腺癌和胰腺癌的各种化疗方案。例如，5-FU単独或者联合疗法比如FOLFOX和FOFIRI是在转移性直肠癌中的标准ー线疗法。但是，5-FU常常伴随严重的副作用包括骨髄抑制，粘膜炎，皮炎，腹泻，心脏毒性甚至死亡。这些副作用至少在某种90程度上是由现有的对单个患者的剂量測定方法导致的。现行标准治疗中剂量的决定方法-体表面积(BSA)仅仅考虑了患者的身高和体重。BSA没有考虑许多影响5-FU代谢和效カ的因素比如基因型、年龄、性另O、疾病状态、药物相互作用、器官功能、和合并症。因此，尽管是基于BSA的相同剂量给药， 不同患者的5-FU血药浓度有超过10倍的差别也就不足为奇。最近的学术研究表明，基于血浆5-FU浓度的药物动力学监测的个体5-FU剂量调整可导致对5-FU的客观反应率的显著提高。例见Gemelin et al. J. Clin. Oncol.，26(13) :2099-2105 (2008) ；C1imente-Marti et al.，J.Pharmaceut. Sci. ,92 (6)1155-1165(2003) ；Milano et al.，Int. J. Cancer, 41 :537-541 (1988)。这些研究表明接受5-FU治疗的个体患者中的5-FU血液浓度的临床检测对于5-FU剂量调整、疗效优化和减少严重不良反应无疑是需要的。专利技术概沭本专利技术提供了了ー种在患者样品中检测5-氟尿嘧啶的方法。第一方面，提供了在从接受了 5-FU和可选的其它药物的患者取得的样品中检测5-FU的方法。该方法中，从摄入5-FU的患者中取得样品，然后该样品与ニ氢嘧啶脱氢酶(DPD)灭活剂混合，而后在该样品中特别是与DH)灭活剂混合的状态下測定5-FU的量。另ー方面，本专利技术提供了ー种用5-FU治疗患者的方法，包括以下步骤给予患者第一剂5-氟尿嘧啶；测量取自该摄入5-FU患者的样品中的5-FU含量，其中所述的样品在体外掺入ー种DH)灭活剂形成混合物，其中所述样品中5-FU的量最好是在有灭活剂存在的情况下测得的；然后给予该患者第二剂5-FU。第二剂给予5-FU的量是根据患者样品中所测量的5-FU水平并基于预设最佳或目标5-FU AUC来決定的。本专利技术也为5-FU检验提供了一种处理接受了 5-FU并可选择地的其它药物疗法患者的血液样品的方法。在一实施方案中，该方法包括以下步骤 从摄入5-FU的患者中获得含有5-FU的血液样品；从血样中分离出血浆；在分离血浆中添加DI3D灭活剂以组成混合物；然后将混合物送往实验室进行混合物中5-FU水平的分析试验。在另ー实施方案中，该方法包括以下步骤从摄入5-FU的患者中获得含有5-FU的血液样品；在血样中添加Dro灭活剂以组成混合物；然后从混合物中分离出含有5-氟尿嘧啶和灭活剂的血浆。由此获得的血浆可送往实验室进行5-FU检验。在另ー种实施方案中，处理注入5-FU的患者的血液样品的方法需要以下步骤-J人患者中获得含有5-FU的血液样品；在血样中添加Dro灭活剂以组成混合物；然后将混合物送往实验室进行5-FU检验。本专利技术的另一方面，提供了一种组合物，包括从摄入了 5-FU的患者中分离的、混有ニ氢嘧啶脱氢酶灭活剂的样品，这里所说的样品是血液或血浆或血清，而灭活剂在组合物中的浓度至少为850ng/ml。另ー方面，本专利技术提供了ー个试剂盒包括以下成分在ー个容器内(a)从摄入了5-FU的患者中分离的、混有浓度至少为850ng/ml的ニ氢嘧啶脱氢酶灭活剂的样品；(b)将该样品降温至IOoC以下的手段。在本专利技术的各个方面中，最好样品从上述患者中分离出来后5到10个小时之内不冷冻。灭活剂的例子包括，例如，嘧啶或者吡啶衍生物，特别是尿嘧啶类似物比如恩尿嘧啶(eniluracil)和吉美拉西(Gimeracil)。样品中的5-FU可通过任何已知的技术来检验，t匕如，HPLC、Mass-Spec (质谱)、或使用抗5-FU抗体的免疫分析。 除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。本专利技术的其他特点和优势将由下面的具体说明和权利要求书作详细的描述。附图简沭图I是显示实施于临床环境中样品处理方法的实施方案的图表图2是显示恩尿嘧啶对防止血样中5-FU的降解有效的图表。图3是5-こ烯基尿嘧啶，5-碘尿嘧啶和吉美拉西对稳定血液样品中5-FU都有效的图表。图4是显示血液中低浓度的吉美拉西对抑制Dro调节的5-FU的降解有效的图解。图5是显示长时间在不经过血浆分离的血液中保持有吉美拉西的影响的图解。图6是显示转移注射器装配的一种实施方案图。图7A和7B是显示转移注射器装配的一种实施方案图。图8是显示转移注射器装配的一种实施方案图。专利技术详述I.样品制备，5-FU检验，组合物和试剂盒依照本专利技术的第一方面，提供了一种处理用于检验5-FU的包含5-FU的患者样品(例如，从用5-FU或5-FU前体药物治疗的患者中取得)的方法。该方法导致样品中5-氟尿嘧啶稳定性增强而且显著提高5-FU检测的精确性。因此，在另一方面，本专利技术也提供了一种使用根据处理方法处理的患者样品进行5-FU检验的方法。一般来说，该处理方法包括以下步骤获取含有5-FU的样品(例如，从经受5-FU或5-FU前体药物治疗的患者中取得)；在样品中添加ニ氢嘧啶脱氢酶灭活剂以组成混合物；然后将混合物送往实验室进行混合物中5-FU检验。值得注意的是，虽然本专利技术的实施方案本着从5-FU治疗患者获得的患者样品进行详细地说明，但本专利技术也可涵盖从5-FU前体药物治疗的患者获得的患者样品。这样的前体药物(例如，喃氟啶，去氧氟尿苷和卡培他滨)在患者体内被激活并且转化成5-FU。本专利技术用到的包含5-FU的患者样品可以来自任何接受5-FU治疗并需要测量5_FU水平的患者。也可来自接受一种或多种5-FU前体药物如喃氟唳(tegafur),去氧氟尿苷和卡培他滨的患者。举例来说，5-FU通常用于癌症患者的化疗包括患有乳腺癌、肺癌、结肠直肠癌、胰腺癌或者头颈癌的患者。5-FU也可用于对青光眼患者的眼科手术中作为一种抗瘢痕药物用在小梁切除位点。另外，5-FU可作为一种面霜局部使用以治疗鲍温病、日光性角化症和皮肤基底细胞癌。本专利技术的方法对癌症患者样品中的5-FU检验尤其优越，患者可以是经受包含5-FU的治疗方案的癌症患者。举例来说，5-FU通常是与叶酸或亚叶酸一同给予。在转移性直肠癌中，5-FU常常用在诸如FOLFOX(5-FU加上奥沙利钼和亚叶酸)和FOLFIRI (5-FU加上伊立替康和亚叶酸)等联合用药方案中。新药如贝伐单抗、帕尼单抗和西妥昔单抗也可加入这些用药方案中。本专利技术适用于所有这些疗法和治疗方案中，对获取于这些疗法治疗的患者样品进行5-FU检验,并且优化给予个体患者的5-F本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.07.17 US 61/226,589;2010.04.14 US 61/324,2411.一种检测样本中5-氟尿嘧啶的方法，样本来自服用5-FU或其前体药物的患者，该方法包括从所述患者身上获取样本，在体外将样本混入一种或多种ニ氢嘧啶脱氢酶的抑制剂；測定该样本中5-氟尿嘧啶的含量。2.ー种检测来自服用5-FU或其前体药物的患者的样本中5-氟尿嘧啶的方法，该方法包括測量从所述服用5-FU或其前体药物的患者身上获取的样本中5-氟尿嘧啶，该样本从所述患者上获取之后，在体外与ー种ニ氢嘧啶脱氢酶抑制剂混合。3.ー种使用5-氟尿嘧啶或其前体药物治疗患者的方法，包括使患者摄入第一剂5-氟尿嘧啶或其前体药物；測定该摄入了 5-氟尿嘧啶或其前体药物的患者的样本中的5-氟尿嘧啶含量，该样本在体外与ー种ニ氢嘧啶脱氢酶抑制剂混合；判定这步完成后，使 该患者服用第二剂5-氟尿嘧啶或其前体药物。4.权利要求1-3任何ー种方法，其中所述测定或測量步骤包括将所述样本与ー种与5-氟尿嘧啶发生免疫反应的抗体接触。5.权利要求1-4中任何ー种方法，其中所述样本在从所述患者中分离之后10小时内没有被冷冻。6.权利要求1-5中任何ー种方法，其中所述样本是血液、血浆、血清或尿液。7.权利要求1-6中任何ー种方法，其中所述样本是血液。8.权利要求1-7中任何ー种方法，其中所述抑制剂是嘧啶衍生物或吡啶衍生物。9.权利要求8中的方法，其中所述抑制剂是恩尿嘧啶或吉美拉西。10.权利要求1-9中任何ー种方法，其中5-氟尿嘧啶是在所述抑制剂存在的情况下测量。11.ー种处理从接受了包括5-氟尿嘧啶或其前体药物的治疗方案的患者取得的血样用于5-氟尿嘧啶检验分析的方法，所述方法包括从所述患者中获得含有5-氟尿嘧啶的血样；从所述血样中分离血浆；将分离到的血浆与ニ氢嘧啶脱氢酶抑制剂混合形成混合物；以及将所述混合物送入实验室进行5-氟尿嘧啶检测分析。12.ー种处理从接受了包括5-氟尿嘧啶或其前体药物的治疗方案的患者取得的血样用于5-氟尿嘧啶检验分析的方法，所述方法包括从所述患者中获得包含5-氟尿嘧啶的血样；将血样与ニ氢嘧啶脱氢酶抑制剂混合形成混合物；从所述混合物中分离包含5-氟尿嘧啶和所述抑制剂的血浆；及将所述血浆送入实验室进行5-氟尿嘧啶检测分析。13.—种处理从接受了包括5-氟尿嘧啶或其前体药物的治疗方案的患者取得的血样用于5-氟尿嘧啶检验分析的方法，所述方法包括从所述患者中获得包含5-氟尿嘧啶的血样；将血样与ニ氢嘧啶脱氢酶抑制剂混合形成混合物；及将所述混合物送入实验室进行5-氟尿嘧啶检测分析。14.权利要求11-13中任何ー种方法，其中所述样本在从所述患者中分离之后10小时内没有被冷冻。15.权利要求11-14中任何ー种方法，其中所述抑制剂是ー种嘧啶衍...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·J·萨拉莫内，B·洛，C·科尔文，M·奥弗菲尔德，H·麦克劳德，
申请(专利权)人：美瑞德生物工程公司，
类型：发明
国别省市：