电泳凝胶盒以及电泳梳制造技术

本申请提供了用于凝胶电泳的装置，其包括盒以及具有至少一个楔形齿的电泳梳。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及凝胶耗材。
技术介绍
凝胶电泳是分离诸如DNA、RNA、多肽和蛋白质等生物分子的一般步骤。在凝胶电泳中，根据施加电场引起的穿过过滤凝胶的迁移率将分子分成条带。在本技术中使用的基本单元由封装入玻璃管的凝胶或夹于玻璃板或塑料板之间作为平板的凝胶组成。凝胶具有开放式分子网络结构，其界定充满导电性缓冲溶液的孔隙。这些孔隙大到足以容许迁移高分子穿过凝胶。将该凝胶放置在与缓冲溶液接触的槽(chamber)内，该缓冲溶液使凝胶与电源的阴极或阳极之间形成电接触。将含有高分子和示踪染料的样品放置于凝胶顶部。向凝胶施加电势，使样品高分子与示踪染料向凝胶的底部迁移。在示踪染料到达凝胶端部之前停止电泳。然后确定被分离的高分子条带的位置。通过比较与示踪染料和已知大小的高分子相比的具体条带所移动的距离，可确定其他高分子的大小。聚丙烯酰胺凝胶通常用于电泳。适合电泳的其他凝胶包括琼脂糖凝胶和淀粉凝胶。聚丙烯酰胺凝胶电泳(或PAGE)较为普及，因为这些凝胶光学透明、电中性并且可制成具有一系列孔径。众所周知制备PAGE凝胶的方法。参见例如B. Hames and D. Rickwood, GelElectrophoresis of Proteins (蛋白质凝胶电泳)(第二版,Oxford University Press,1990)以及 A. Andrews, Electrophoresis (电泳)(第二版，Oxford University Press,1986)。通常，制备含有丙烯酰胺单体、诸如双丙烯酰胺的交联剂、凝胶缓冲液以及诸如十二烷基硫酸钠(SDS)的改性剂的储备溶液。在需要凝胶前可贮存这些储备溶液。为了制备凝胶，按照所希望的各种成分的最终浓度，将储备溶液与水成比例混合。通常使用玻璃制作电泳凝胶的模具。然而，玻璃具有易碎、难形成特殊形状和昂贵的缺点。用塑料材料通过注塑成型等工艺形成凝胶模具更容易、更经济。然而，使用塑料模具浇注电泳凝胶可导致分离的高分子条带的分辨率降低。所述高分子条带分辨率的降低可 能由高分子在与模具接触的凝胶表面上的移动速度比在凝胶内部的移动速度更快造成。在凝胶表面和内部迁移率之间的变化可导致高分子条带拖尾。除凝胶可发生分辨率的降低外，生成和使用诸如SDS-PAGE胶的凝胶的通用方法的另一个缺点是，凝胶的使用受到可装载到凝胶内的样品量的限制。可能期望具有在凝胶上加载更多体积的样品的能力。因此可能期望产生更厚的凝胶，或产生其增加的孔容积与凝胶增加的厚度成比例的凝胶。然而，对于给定的电场强度，这可能导致凝胶需要成比例增大的电流。对于给定电场强度，更大电流可导致更多的热量积聚在凝胶内，从而可降低分辨率和性能。可能随着较厚凝胶出现的另一个问题是，在诸如免疫印迹(western blotting)的下游应用中，蛋白条带的转移效率可能下降。在凝胶内增加样品量的一个解决方案可以是，增加具有特定宽度与凝胶厚度的孔的深度。然而，增加的容积可能会引起凝胶上方增加的样品高度，导致较厚的蛋白条带启动区(starting zone)和较低的分辨率。如果堆积凝胶(stacking gel)的高度成比例增大，则分离凝胶(resolving gel)的长度将成比例地减小,也导致给定凝胶盒的分辨率降低。因此，开发可产生具有特定厚度凝胶的凝胶盒将是有益的，该凝胶的孔可容纳的样品体积是通用方法的孔容量的至少两倍，同时保持与具有特定宽度和厚度的标准孔的凝胶上方相同的样品高度。专利技术概述本申请提供了用于凝胶电泳的装置(apparatus),其包括凝胶盒(gelcassette);以及具有至少一个楔形齿(wedge-shaped tooth)的电泳梳(comb)。在某些实施方案中，所述凝胶盒可包括固定板(retainer plate)和分隔板(divider plate)。所述凝胶盒包括从分隔板或固定板中至少一个的外表面延伸的凸边(Iip)。在某些实施方案中，所述楔形齿的体积为至少40uL。在某些实施方案中，该盒具有至少一个可涂有涂层的内表面。在某些实施方案中，所述涂层为氧干扰涂层，比如，诸如SiO或SiO2中至少之一。在某些实施方案中，所述电泳梳还包括电泳梳上的凹陷区域，其中，所述凹陷区域经设置而防止在凝胶形成过程中形成凝胶皮。本申请还提供了用于凝胶电泳的装置，其包括具有楔形齿的电泳梳，所述楔形齿经设置可在Imm凝胶内产生样品孔，其中所述样品孔的尺寸比具有标准电泳梳所产生的样品孔的凝胶的尺寸大至少10%。本申请提供了用于凝胶电泳的装置，其包括具有楔形齿的电泳梳，所述楔形齿经设置在Imm凝胶内产生样品孔，其中样品孔的尺寸比具有标准电泳梳所产生的样品孔的凝胶的尺寸大至少100%。在某些实施方案中，标准十齿微型凝胶电泳梳所产生的样品孔的容积为 37. 5μ L。本申请还提供了用于凝胶电泳的装置，其包括具有楔形齿的十齿微型凝胶电泳梳，所述楔形齿经设置可在Imm凝胶内产生样品孔，其中加样孔的容积为至少70 μ L。用于凝胶电泳的装置，其包括具有楔形齿的电泳梳，所述楔形齿经设置可产生被设置为比标准凝胶样品孔多容纳至少10%样品的样品孔。在某些实施方案中，所述装置经设置生成具有清晰条带的凝胶。在某些实施方案中，所述装置经设置生成具有高分辨率的凝胶。本申请提供了用于凝胶电泳的装置，其包括凝胶盒和电泳梳，所述凝胶盒具有从所述盒的至少一个外表面成角度延伸的凸边，且所述电泳梳具有至少一个楔形齿。本申请还提供了用于凝胶电泳的装置，其包括具有腔的凝胶盒；电泳梳；以及至少一个位于电泳梳上的齿，所述至少一个齿具有至少一个倾斜的侧面，其中所述至少一个 齿距所述腔的边缘至少0. 335英寸。本申请提供了用于凝胶电泳的装置，其包括具有楔形齿的电泳梳，所述楔形齿经设置可产生被设置为比标准凝胶样品孔多容纳至少10%样品的样品孔。在某些实施方案中，所述设备(device)经设置生成凝胶，所述凝胶将期望得到的成分分离成清晰条带、高分辨率条带或清晰和高分辨率条带。援引加入将本说明书所提到的所有出版物、专利和专利申请通过援引加入本申请中，其加入的程度，如同特别且单独指出，将每一出版物、专利或专利申请通过援引加入本申请。附图简要说明在所附权利要求中特别陈述了本专利技术的某些新颖特征。参考下列通过示例性实施方案陈述的具体说明以及实施方案的附图，所述实施方案运用了本专利技术的原理，可更好地了解本专利技术的特征和优点图I显示根据本教导的各种实施方案的组装的凝胶盒的实施方案；图2A显示根据本教导的各种实施方案的分隔板的实施方案；图2B显示根据本教导的各种实施方案的固定板的实施方案；图3显示根据本教导的各种实施方案的组装的凝胶盒的实施方案；图4显示根据本教导的各种实施方案的凝胶盒的实施方案与电泳梳的实施方案；图5A-5C显示电泳梳的实施方案的各种视图；图6A和6B显示凝胶图像；图7显示两种不同凝胶类型的结果比较；图8A-8C分别是根据本教导的各种实施方案的单孔电泳梳的侧视图、横截面图和底视图；图9A-9C分别是根据本教导的各种实施方案的九孔电泳梳的侧视图、横截面图和底视图；附图说明图10A-10C分别是根据本教导的各种实施方案的十孔电泳梳的侧视图、横截面图和底视图；图11A-11C分别是根本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.08.24 US 61/236,293;2009.08.25 US 61/236,795;1.用于凝胶电泳的装置，其包括 凝胶盒；以及 具有至少一个楔形齿的电泳梳。2.根据权利要求I所述的装置，其中所述凝胶盒包括固定板和分隔板。3.根据权利要求2所述的装置，其中所述凝胶盒包括从所述分隔板或所述固定板中至少之一的外表面延伸的凸边。4.根据权利要求I所述的装置，其中楔形齿的体积为至少40μ L。5.根据权利要求I所述的装置，其中所述盒具有至少一个内表面。6.根据权利要求5所述的装置，其中所述至少一个内表面涂有涂层。7.根据权利要求6所述的装置，其中所述涂层是氧干扰涂层。8.根据权利要求7所述的装置，其中所述氧干扰涂层选自SiO或SiO2中至少之一。9.用于凝胶电泳的装置，其包括具有楔形齿的电泳梳，所述楔形齿经设置在1_的凝胶内产生样品孔，其中所述样品孔的尺寸比具有标准电泳梳所述产生的样品孔的凝胶大至少 10%。10.根据权利要求9所述的装置，其中所述样品孔的尺寸比具有标准电泳梳所产生的样品孔的凝胶大至少10...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒂默斯·瓦勒·阿普蒂克，詹妮弗·米勒，托马斯·迪勒，西达斯·卡恩纳恩，罗伯特·班尼特，
申请(专利权)人：生命技术公司，
类型：发明
国别省市：