针对EGFR和针对IGF-1R的双特异性抗体，制备它们的方法，包含所述抗体的药物组合物及其应用。
【技术实现步骤摘要】
双特异性抗-EGFR/抗-1GF-1R抗体 本申请是国际申请号PCT/EP2009/006782，国际申请日为2009年9月21日，进入中国国家日期是2011年3月24日，中国国家申请号是200980137723. 3，专利技术名称为“双特异性抗-EGFR/抗-IGF-IR抗体”的分案申请。本专利技术涉及针对EGFR和针对IGF-IR的双特异性抗体，制备它们的方法，包含所述抗体的药物组合物，及其应用。
技术介绍
EGFR 和抗-EGFR 抗体人表皮生长因子受体(也已知为HER-I或Erb-Bl，并且在本文中称作EGFR)是170kDa的跨膜受体，其由c-erbB原癌基因编码，并且显示固有的酪氨酸激酶活性(Modjtahedi, H.，等，英国癌症杂志(Br. J. Cancer) 73 (1996) :228-235 ;Herbst，R. S.和Shin, D. M.，癌症(Cancer) 94 (2002) :1593-1611)。SwissProt 数据库登录号 P00533 提供了 EGFR的序列。还存在EGFR的同种型和变体(例如，可变RNA转录物，截短形式，多态性等)，包括但不限于 Swissprot 数据库登录号 P00533-1，P00533-2, P00533-3，和 P00533-4确定的那些。已知EGFR结合包括以下各项的配体表皮生长因子(EGF)，转化生长因子-a 0^卜0)，双调蛋白，肝素结合￡6 0*46 )，^动物纤维素，和印iregulin(Herbst，R.S.和 Shin，D.M.，癌症(Cancer)94(2002) 1593-1611 ；Mendelsohn, J.,和 Baselga，J.， 原癌基因(Oncogene) 19 (2000) 6550-6565)。EGFR经由酪氨酸激酶介导的信号转导途径调节许多细胞过程，包括但不限于激活控制细胞增殖、分化、细胞存活、程序性细胞死亡、血管发生、有丝分裂发生和转移的信号转导途径(Atalay等，Ann. Oncology14(2003) 1346-1363 ；Tsao,A. S.和 Herbst,R. S.信号(Signal) 4 (2003) 4-9 ；Herbst,R. S.，和 Shin, D. M.，癌症(Cancer) 94 (2002) 1593-1611 ；Modjtahedi, H.，等，英国癌症杂志(Br.J. Cancer)73(1996)228-235)。EGFR的过量表达已经在许多人类恶性病症中报道，包括膀胱癌、脑癌、头和颈癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、前列腺癌和肾癌。(Atalay，G.，等，Ann. Oncology14(2003) 1346-1363 ；Herbst, R. S.，和 Shin, D. M.，癌症(Cancer)94(2002) 1593-1611 ；Modjtahedi，H.，等，英国癌症杂志(Br. J. Cancer) 73 (1996) 228-235)。在这些病症的许多中，EGFR的过量表达与患者的差的预后相关或关联。(Herbst，R. S.，和Shin，D.M.，癌症(Cancer)94(2002) 1593-1611 ；Modjtahedi, H.，等，英国癌症杂志(Br.J. Cancer) 73 (1996) 228-235)。EGFR也在正常组织的细胞中表达，特别是皮肤、肝脏和胃肠道的上皮组织，尽管通常水平比在恶性细胞中低(Herbst，R. S.，和Shin，D.M.，癌症(Cancer)94(2002)1593-1611)。未缀合的单克隆抗体(mAbs)可以是用于治疗癌症的有用的药,如由美国食品和药物管理局(U. S. Food and Drug Administration)所批准的下列药物所证明用于治疗晚期乳腺癌的曲妥珠单抗(Herceptin ；Genentech Inc,) (GriIIo-Lopez, A. -J.,等，Semin.Oncol. 26(1999)66-73 ；Goldenberg, M. M.，临床治疗(Clin. Ther.) 21 (1999) :309-18),用于治疗CD20阳性B细胞，低级或滤泡性非霍奇金氏淋巴瘤的利妥昔单抗(Rituxan ;IDEC Pharmaceuticals, San Diego, CA,和 Genentech Inc. , San Francisco, CA),用于治疗复发性急性骨髓白血病的吉妥珠单抗(Mylotarg ，Celltech/Wyeth_Ayerst)，和用于治疗B细胞慢性淋巴细胞白血病的阿仑珠单抗(CAMPATH ，Millenium Pharmaceuticals/Schering AG)。这些产品的成功不仅依赖于它们的功效，还依赖于它们突出的安全模式(GriIlo-Lopez, A. -J ,等 ，Semin. Oncol. 26(1999) :66-73 ；Goldenberg, M. M.，临床治疗(Clin. Ther). 21 (1999)309-18)。尽管在这些药物上所取得的成就，目前在获得更高特异性抗体活性方面存在巨大的兴趣，所述特异性活性比典型地由未缀合的mAb疗法所提供的要闻许多研究的结果显示Fe-受体依赖性机制相当大地有利于对针对肿瘤的细胞毒性抗体的作用，并且指示针对肿瘤的最佳抗体将优先结合以激活Fe受体，并且与抑制性配偶体 Fe Y RIIB 结合程度最小。(Clynes, R.A ,等,自然药物(Nature Medicine) 6 (4)443-446 (2000) ；Kalergis, A. M.，和 Ravetch, J. V.，J. Exp. Med. 195 (12) (2002) 1653-1659。例如，至少一项研究的结果显示Fe YRIIIa受体中的多态性特别地与抗体疗法的功效紧密相关(Cartron, G.，等，血液(Blood) 99 (3) (2002)754-757。该研究显示对于 Fe Y RIIIa 是纯合的患者，与对于Fe YRIIIa是杂合的患者相比，具有更好的针对利妥昔单抗的应答。作者得出结论为更优的应答是由于抗体与Fe Y RIIIa的更好的体内结合，其导致了针对淋巴瘤细胞的更好的 ADCC 活性(Cartron, G.，等，血液(Blood) 99 (3) (2002)754-758)。已经报道了靶向EGFR和阻断EGFR信号传导途径的各种策略。小分子酪氨酸激酶抑制剂如吉非替尼，厄洛替尼和CI-1033在胞内酪氨酸激酶区域内阻断EGFR的自磷酸化，由此抑制下游信号传导事件(Tsao，A. S.，和Herbst，R. S.，信号(Signal) 4 (2003) 4_9)。另一方面，单克隆抗体，靶向EGFR的胞外部分，导致阻断配体结合并由此抑制下游事件如细胞增殖(Tsao, A. S.，和 Herbst, R. S.，信号(Signal) 4 (2003) 4-9)。已经产生了几种鼠单克隆抗体，其获得这种体外阻断并且已经在小鼠异种移植模型中评估它们影响肿瘤生长的能力(Masui,等，癌症本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
2008.09.26 EP 08016952.7;2009.04.02 EP 09004908.11.结合EGFR和IGF-IR的双特异性抗体，其包含结合EGFR的第一抗原结合位点和结合IGF-IR的第二抗原结合位点，所述双特异性抗体特征在于 i)所述抗原结合位点每个是一对抗体重链可变结构域和抗体轻链可变结构域； ii)所述第一抗原结合位点在重链可变结构域中包含SEQID NO 1的⑶R3区域，SEQID N0:2的CDR2区域，和SEQ ID NO :3的CDRl区域，并且在轻链可变结构域中包含SEQ IDNO 4 的 CDR3 区域，SEQ ID NO 5 的 CDR2 区域，和 SEQ ID NO 6 的 CDRl 区域；和 iii)所述第二抗原结合位点在重链可变结构域中包含SEQID NO : 11的⑶R3区域，SEQID NO 12的⑶R2区域，和SEQ ID NO 13的⑶Rl区域，并且在轻链可变结构域中包含SEQID NO 14 的 CDR3 区域，SEQ ID NO 15 的 CDR2 区域，和 SEQ ID NO 16 的 CDRl 区域； 或所述第二抗原结合位点在重链可变结构域中包含SEQ ID N0:17的⑶R3区域，SEQID NO 18的⑶R2区域，和SEQ ID NO 19的⑶Rl区域，并且在轻链可变结构域中包含SEQID NO 20 的 CDR3 区域，SEQ ID NO 21 的 CDR2 区域，和 SEQ ID NO 22 的 CDRl 区域。2.根据权利要求I所述的双特异性抗体，其特征在于 i)所述第一抗原结合位点在重链可变结构域中包含SEQID NO 1的⑶R3区域，SEQID NO :2的CDR2区域，和SEQ ID NO :3的CDRl区域，并且在轻链可变结构域中包含SEQ IDNO 4 的 CDR3 区域，SEQ ID NO 5 的 CDR2 区域，和 SEQ ID NO 6 的 CDRl 区域；和 ii)所述第二抗原结合位点在重链可变结构域中包含SEQID NO : 11的⑶R3区域，SEQID NO 12的⑶R2区域，和SEQ ID NO 13的⑶Rl区域，并且在轻链可变结构域中包含SEQID NO 14 的 CDR3 区域，SEQ ID NO 15 的 CDR2 ...
【专利技术属性】
技术研发人员：乌尔里希·布林克曼，丽贝卡·克罗斯代尔，维尔马·劳，克里斯蒂安·吉尔德斯，埃克·霍夫曼，克里斯蒂安·克莱因，克劳斯彼得·金克勒，沃尔夫冈·谢弗，扬·奥拉夫·斯特拉克，巴勃罗·乌马纳，
申请(专利权)人：罗氏格黎卡特股份公司，
类型：发明
国别省市：
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