本发明专利技术涉及一种可以用于在液相色谱装置中使用的多功能选择器阀，更具体地涉及一种具有多端口的多功能选择器阀，在多功能选择器阀的一部分上，所述多端口可以连接到样本隔离柱的两个端部，并且该多功能选择器阀包括：流体通过模式，导入的流体在没有通过样本隔离柱的情况下被排出；柱通过模式，导入的流体通过样本隔离柱被排出；以及流体闭塞模式，防止流体进入内部。而且，使用本发明专利技术的多功能选择器阀使得能够借助改变其流体移动通过而在反相液相色谱装置上根据需要实现在线胶溶功能、一维隔离功能和二维隔离功能。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
以下公开内容涉及一种多功能选择阀。更具体地，以下公开内容涉及这样的多功能选择阀，其改变溶剂的流动，以使得除了一维分离、二维分离和在线消解的功能之外，可以在反相液相色谱系统中执行磷酸肽提取的可选功能。以下公开内容涉及包括多功能选择阀的全自动多功能液相色谱系统和用于使用该液相色谱系统分析样本的方法。
技术介绍
在线固相提取/毛细管反相液相色谱借助其分离的高效率，在研究蛋白质组方面已经用作非常重要的技术系统。具体地，这允许生物物质的痕量的有效分离，并使得由于被分析物固相相互作用的宽频谱而能够实现蛋白质的痕量的高效识别。作为用于分析蛋白质的方法，基于质谱法的方法已经用作蛋白质组研究的标准分析平台。方法(诸如鸟枪法或自底向上法)的典型示例包括在通过质谱仪进行分析之前将蛋白质水解成肽。这样的水解增加了生物样本的溶解度并产生了可以电离且在质谱仪中容易检测到的肽段。然而，前述方法不可避免地增加了样本的复杂性。例如，在最简单的蛋白质组之一(酵母蛋白质组)的情况下，从约6，000个表达的蛋白质产生300，000或更多个肽段。 因此，为了克服在分析具有巨大复杂性的样本时的欠采样问题，已经开发了包括在线/离线多维蛋白质识别技术的各种方法(Link, A. J. , Eng, J. , Schieltz, D. M. , Carmack, E. , et al. , Nat. Biotechnol. 1999,17,676-682 ；Chen, E. I. , HeweI, J. , Felding-Habermann, B., Yates, J.R.III，Mol. Cell. Proteomics 2006，5，53-56)。然而，仍需要液相色谱柱的效率和灵敏度的改进。在此背景下，已知当分离柱的内径减小同时保持其长度时，基于液相色谱 /质谱法的分析的灵敏度可以快速增加(Kim, M. -S.，Choie, ff. -S.，Shin, Y. S.，Yu, M. H.， Lee, S. -ff.，Bull.Korean Chem. Soc. 2004,25,1833-1839)。此外，在包含大量的清洁剂和盐的生物样本的情况下，在线脱盐操作是在质谱法之前所需的必要过程。这是因为这样的杂质中断了要通过质谱仪分析的肽样本的电离，导致了肽样本的质谱检测灵敏度的下降。因此，考虑到时间节省和样本损失，在线脱盐比离线脱盐更适合。同时，根据现有技术的反相液相色谱系统仅具有通过用固相提取柱使样本脱盐和浓缩的一维分离功能。甚至在通过使用在线链接到反相液相色谱系统的强阳离子交换色谱系统进行二维分离功能的二维反相液相色谱系统的情况下，由于相互干扰而难以执行精确分析。另外，这样的系统必须需要多个溶剂进给泵，由此其由于用于控制泵的多个阀而具有复杂结构。此外，还具有在线消解功能和磷酸肽的在线富集的这样的二维在线反相液相色谱系统之前从未报导或展示过
技术实现思路
本公开的一个实施例针对于提供一种多功能选择阀，利用该多功能选择阀反相液相色谱系统实现了 能够脱盐和样本浓缩的反相一维分离的功能；能够通过将使用样本分离柱的一维分离与反相二维分离链接来增加分离效率的二维分离功能的功能；能够通过在溶剂中生成高压力而将蛋白质消解成肽的在线消解的功能；以及通过使用二氧化钛柱选择性地提取磷酸肽的功能。本公开的另一实施例针对于提供一种全自动多功能液相色谱系统，其仅使用一个溶剂进给泵并允许上述功能的自动化，以使得可以通过选择阀的简单操作选择性地执行每个功能。本公开的又一实施例针对于提供一种用于通过使用上述自动化多功能液相色谱系统有效地分析样本的方法。在一个普通方面，提供了一种具有多个端口的多功能选择阀，在多功能选择阀的一部分处样本分离柱的两个端部可以连接到所述多个端口，多功能选择阀包括流体通过模式，其中导入到多功能选择阀的流体不通过样本分离柱，而是被排出；柱通过模式，其中导入到多功能选择阀的流体通过样本分离柱，然后被排出；以及流体阻挡模式，其中防止流体导入。根据一个实施例，多功能选择阀的多个端口可以包括进口端口、出口端口、各自链接到样本分离柱的每个端部的第一样本分离柱连接端口和第二样本分离柱连接端口、以及与其它端口选择性地流体连通的多个选择端口，以实现上述模式。根据另一实施例，在流体通过模式下，进口端口可以与出口端口流体连通；在柱通过模式下，进口端口可以与第一样本分离柱连接端口流体连通，并且出口端口可以与第二样本分离柱连接端口流体连通；并且在流体阻挡模式下，进口端口和出口端口可以彼此流体中断。根据另一实施例，多功能选择阀的多个可选端口可以包括第一、第二和第三选择端口 ；在流体通过模式下，第二选择端口可以与第三选择端口流体连通，并且第二样本分离柱连接端口可以与第一选择端口流体连通；在柱通过模式下，第二选择端口可以与第三选择端口流体连通；并且在流体阻挡模式下，第一样本分离柱连接端口可以与第二选择端口流体连通，第二样本分离柱连接端口可以与第三选择端口流体连通，并且第一选择端口可以与出口端口流体连通。在另一普通方面，提供了一种具有多个端口的多功能选择阀，在多功能选择阀的一部分处样本分离柱的两个端部可以连接到所述多个端口并且在多功能选择阀的另一部分处二氧化钛柱的两个端部可以连接到所述多个端口，多功能选择阀包括流体通过模式，其中导入到多功能选择阀的流体不通过样本分离柱和二氧化钛柱；柱通过模式，其中导入到多功能选择阀的流体通过样本分离柱，然后被排出；流体阻挡模式，其中防止流体导入；以及二氧化钛柱通过模式，其中导入到多功能选择阀的流体通过二氧化钛柱，然后被排出。根据一个实施例，多功能选择阀的多个端口可以包括进口端口、出口端口、各自链接到样本分离柱的每个端部的第一样本分离柱连接端口和第二样本分离柱连接端口、各自链接到二氧化钛柱的每个端部的第一二氧化钛柱连接端口和第二二氧化钛柱连接端口、以及与其它端口选择性地流体连通的多个选择端口，以实现上述模式。根据另一实施例，在流体通过模式下，进口端口可以与出口端口流体连通；在柱通过模式下，进口端口可以与第一样本分离柱连接端口流体连通，并且出口端口可以与第二样本分离柱连接端口流体连通；在流体阻挡模式下，进口端口和出口端口可以彼此流体中断；并且在二氧化钛柱通过模式下，进口端口可以与第一二氧化钛柱连接端口流体连通，并且出口端口可以与第二二氧化钛柱连接端口流体连通。根据又一实施例，多个选择端口可以包括第一、第二和第三选择端口 ；在流体通过模式下，第一选择端口可以与第二二氧化钛柱连接端口流体连通，并且第二选择端口可以与第三选择端口流体连通；在柱通过模式下，第一选择端口可以与第二二氧化钛柱连接端口流体连通，并且第二选择端口可以与第三选择端口流体连通；在流体阻挡模式下，可以封闭第一二氧化钛柱连接端口 ；并且在二氧化钛柱通过模式下，第一选择端口可以与第一样本分离柱连接端口流体连通，并且第三选择端口可以与第二样本分离柱连接端口流体连通。根据又一实施例，样本分离柱可以是强阳离子交换柱、弱阴离子交换柱、亲水相互作用液相色谱(HILIC)柱和强阳离子交换-弱阴离子交换混合柱中的任一个。在又一普通方面，提供了一种全自动多功能液相色谱系统，包括样本进口阀，被导入要分析的样本；本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：李祥原，邢硕元，李正花，金京喆，文倲祁，
申请(专利权)人：高丽大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：
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