本发明专利技术涉及一种降低受试体细胞中的病毒蛋白、病毒mRNA或病毒效价水平的方法，所述方法包括向所述受试体施用iRNA试剂的步骤，其中所述iRNA试剂包含具有至少15个或更多个连续核苷酸且与来自第一哺乳动物呼吸道病毒的基因互补的正义链以及具有至少15个或更多个连续核苷酸且与所述正义链序列互补的反义链，其中所述基因选自由RSV的P、N或L基因组成的组。本发明专利技术已证实，通过体内试验已证实鼻内施用以及肠胃外施用iRNA试剂可抑制RSV。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及呼吸道合胞病毒(RSV)的治疗领域以及调节病毒复制的组合物和方法，更特别地说，本专利技术涉及寡核苷酸通过RNA干扰而对呼吸道合胞病毒的基因进行下调， 所述寡核苷酸通过吸入施用/鼻内施用而被局部施用至肺和鼻通道，或通过注射/静脉内注射而施用至全身。
技术介绍
呼吸道由于其本来所具有的功能而暴露于大量的经空气传播的引起多种呼吸性疾病的病原体中。在发达国家，呼吸道的病毒感染是造成婴儿住院的最常见原因，在美国每年约有91，000名婴儿因此而住院，花费3亿美元。人类呼吸道合胞病毒(RSV)和副流感病毒(PIV)是呼吸道疾病的两种主要因素；它们感染上呼吸道以及下呼吸道，导致义膜性喉炎、肺炎和细支气管炎(Openshaw，P. J. M. · Respir. Res. 3 (Suppl I)，S15-S20 (2002)， Easton, A. J.，et al.，CHn. Microbiol. Rev. 17，390-412 (2004))。单独的 RSV 感染约 65% 的一岁以内的婴儿，在婴儿生命的最初两年内几乎全都被该病毒所感染。该病毒在老年人中也是疾病和死亡的主要原因。RSV感染后的免疫反应并不完全，而且也不能持久，因此在所有年龄组中都会发生重复感染。罹患过RSV细支气管炎的婴幼儿在以后的生命过程中容易发生哮鸣和哮喘。近40年来一直在进行关于可有效治疗RSV的方法的研究以及关于RSV疫苗的研究，但是收效甚微(Openshaw, P. J. M. · Respir. Res. 3 (Suppl I), S15-S20(2002)，Maggon，K. et al, Rev. Med. Virol. 14,149-168 (2004)) 目前，临床上尚无针对任一种RSV的疫苗。在诸如牛、山羊、猪、绵羊等非人类的动物体内也有这两种病毒的病毒株的存在，导致农业、乳品业和肉业的损失(Easton, AJ. , et al. , CHn. Microbiol. Rev.17,390-412(2004))ο两种RSV病毒都含有不分节的负链RNA基因组(nonsegmented negative-strandRNA genome)且均属于副黏病毒(Paramyxoviridae)科。这些病毒所具有的多种特性致使对其难于进行预防和治疗。由于RNA基因组缺乏复制校正阅读能力，因而病毒基因组以高速率发生变异，这对于确定可靠的疫苗或抗病毒药提供了巨大的挑战(Sullender, ff. M. CHn. Microbiol. Rev. 13,1-15 (2000))。部分由于病毒发展出位于F基因上的抗性突变，因而RSV融合蛋白(F)这类有前途的抑制剂也已被放弃 (Razinkov, V,et. al.，Antivir. Res. 55,189-200(2002)，Morton,CJ. et al. Virology 311， 275-288(2003))。两种病毒都与细胞蛋白相结合，从而为获得用于疫苗的不含细胞的病毒物质增加了困难(Burke, E.，et al.，Virology 252,137-148 (1998), Burke, E.，et al.， J. Virol. 74，669-675 (2000)，Gupta, S.，et al.，J. Virol. 72，2655-2662 (1998))。最后，两种病毒，尤其是RSV病毒的免疫性非常复杂(Peebles，R. S.，Jr.，et al.，Viral. Immunol. 16，25-34 (2003)，Haynes, L. M.，et al.，J. Virol. 11，9831-9844 (2003))。 使用未变性的RSV蛋白作为疫苗会导致"免疫增强"或疫苗增强性疾病(Polack，F. P. et al. J. Exp. Med. 196，859-865 (2002))。最近结束的多个抗-RSV的生物制药项目强调了上述的全部问题。RSV 基因组含有单股负链 RNA (single strand of negative sense RNA),该 RNA 为 15，222 核苷酸，产生 11 种主要蛋白(Falsey, A. R. , and E. E. Walsh, 2000, Clinical Microbiological Reviews 13:371-84·)。其中的两种蛋白即F(融合)和G(粘附)糖蛋白为主要的表面蛋白，且对于诱导保护性免疫是最重要的。SH(小疏水性)蛋白、M(基质) 蛋白以及M2(22kDa)蛋白与病毒外壳相关连，但并不诱导保护性免疫反应。已发现N(主要核壳相关蛋白)、P (磷蛋白)、以及L (主要聚合酶蛋白)蛋白与病毒体RNA相关连。推测 NSl和NS2这两种非结构性蛋白参与宿主-病毒相互作用，但在传染性病毒体中并不存在。人类RSV株已被分成主要的两组，即A和B。已证明G糖蛋白是RSV蛋白中最具趋异性的蛋白。据认为RSV G糖蛋白在两组RSV中以及在两组RSV内的易变性对RSV引起疾病每年发作的能力是很重要的。G糖蛋白具有289-299个氨基酸(依RSV株而不同)，具有 90kDa的细胞内、跨膜以及高糖基化的柄结构(stalk structure),并具有肝素结合结构域。 糖蛋白以分泌型和膜结合型存在。目前还没有用于成功治疗RSV感染的方法(Maggon K and S. Bank, 2004，Reviews in Medical Virology 14:149-68)。多数情况下RSV对下呼吸道的感染为自限性疾病。关于如何对患有该疾病的婴幼儿和儿童进行治疗或认为婴幼儿和儿童何时应该入院或可以出院并不存在权威性的指导方针和标准。RSV感染时可能发生缺氧，这种缺氧可通过鼻插管供氧来处理。对患有呼吸衰竭、休克、或反复呼吸暂停的儿童进行机械通风可降低死亡率。 一些医生的处方使用类固醇。但是，一些研究已经表明，类固醇治疗并不能对因患有细支气管炎而住院的婴幼儿或儿童的临床过程有所影响。这样，单独使用皮质类固醇或与支气管扩张药联合使用可能对除了健康的通气不畅的患者之外的细支气管炎的治疗是无效的。在患有诸如支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysphasia)和气喘哮喘等潜在性心肺疾病的婴幼儿和儿童中也使用过类固醇。利巴韦林是一种具有抗病毒活性的鸟苷类似物，自20世纪80年代中期开始已将该药物用于治疗患有RSV细支气管炎的婴幼儿和儿童，但是许多评估其用途的研究已表现出该药物的使用显示出相矛盾的结果。目前在许多研究中心限于对免疫妥协患者以及患有严重疾病的患者使用利巴韦林。有研究表明RSV细支气管炎的严重性与血清视黄醇浓度降低相关，但是在对患有 RSV细支气管炎的住院儿童所进行的试验表明，补充维生素A并末带来有益效果。已证实， 静脉注射1500mg/kg的RSV免疫球蛋白或吸入100mg/kg免疫球蛋白对于RSV下呼吸道感染基本上也并未表现出有益效果。在发达国家，对RSV下呼吸道感染的治疗通常限于对症治疗。由于抗病毒治疗花费昂贵且在功效上缺少一致性，因而该种治疗通常仅限于在危及生命的时候使用。在发展中国家，氧本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：雷切尔·迈耶斯，
申请(专利权)人：阿尔尼拉姆医药品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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