本发明专利技术涉及一种奶制品中三聚氰胺的快速检测方法，是基于三聚氰胺和胸腺嘧啶分子间三个氢键的原理，在水溶液的缓冲体系下，利用polyT55缠绕的金纳米颗粒，建立了一种快速灵敏地检测奶制品中三聚氰胺的方法。其中，三聚氰胺和polyT55间特异性的氢键作用使得缠绕着polyT55的金纳米颗粒发生聚集，从而引发了金胶的PRLS信号发生变化，从而实现对奶制品中三聚氰胺的检测。该方法设计巧妙，具有较高选择性和灵敏度，免修饰，操作简单，不需要大型仪器。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及三聚氰胺的检测方法。
技术介绍
三聚氰胺，由于其本身含氮量高达66%，经常被非法商利用掺杂在牛奶或者动物饲料中以达到提高蛋白含量的目的。这种在牛奶或动物饲料中非法添加的三聚氰胺已经导致了婴儿的肾结石甚至是死亡事件，因而最近人们很关注三聚氰胺的检测。目前检测三聚氰胺的方法主要有高效液相法(HPLC)、高效液相与质谱联用 (HPLC-MS)等方法，然而这些方法涉及到大型仪器，不利于快速的实时分析检测。针对目前现有的检测方法的现状发展一种新的操作简单、灵敏、快速检测三聚氰胺的方法是很有意义的。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对现有技术存在的不足，基于三聚氰胺和胸腺嘧啶(T碱基) 分子间三个氢键的原理，在水溶液的缓冲体系下，利用PolyT55缠绕的金纳米颗粒，建立了一种快速、灵敏地检测奶制品中三聚氰胺的方法，该方法具有较高选择性和灵敏度，免修饰，操作简单，不需要大型仪器；同时，该方法还拓展了三聚氰胺一胸腺嘧啶模式的三个氢键结构在水相分析检测的体系中的应用。通常三聚氰胺一胸腺嘧啶模式的三个氢键结构只有在固相表面，气象液相界面， 有机相中或者超真空条件才能形成。本申请人设计了在水溶液条件下，基于三聚氰胺和胸腺嘧啶分子间三个氢键的原理建立一种简单快速的检测三聚氰胺的方法。目前，这种三个氢键的结构应用在水相中的分析检测体系里的报道很少。申请人发现，四种DNA的碱基里，只有T碱基可以与三聚氰胺形成这种类似的三个氢键的结构，因此申请人以金纳米颗粒为材料，专利技术了这种具有很高的特异性、高灵敏且可视化检测奶制品中三聚氰胺的方法。本专利技术方法步骤如下I.操作步骤(I. I)处理牛奶样品将牛奶样品先用纯净水溶解至总体为50 mL，之后再稀释10倍后用超滤膜超滤，20000 rpm离心30 min后，取上层清夜稀释10000倍；(I. 2)DNA PolyT55与金纳米颗粒AuNPs的孵育在离心管中加入摩尔比为1:23的金纳米颗粒AuNPs和DNA PolyT55,,润混合均勻，室温反应5 -10 min ；(I. 3)然后再依次加入需要检测的奶制品和相当于溶液混合物总体积1/5的pH 7. 6 NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液，旋涡混合均匀后5_10 min ；(1.4)采用PRLS测定，在测定散射光谱时，设置激发波长和发射波长相等，即权利要求1.，所述方式是在水溶液的缓冲体系下，利用 PolyT55缠绕的金纳米颗粒聚集分散状态达到检测三聚氰胺的目的，所述方法的步骤如下(1)操作步骤(I. I)处理牛奶样品将牛奶样品先用纯净水溶解至总体为50 mL，之后再稀释10倍后用超滤膜超滤，20000 rpm离心30 min后，取上层清液稀释10000倍；(I. 2)DNA PolyT55与金纳米颗粒AuNPs的孵育在离心管中加入摩尔比为1:23的金纳米颗粒AuNPs和DNA PolyT55,,润混合均勻，室温反应5 -10 min ；(I. 3)然后再依次加入需要检测的奶制品和相当于溶液混合物总体积1/5的pH 7. 6 NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液，旋涡混合均匀后5_10 min ；(1.4)采用PRLS测定，在测定散射光谱时，设置激发波长和发射波长相等，即全文摘要本专利技术涉及，是基于三聚氰胺和胸腺嘧啶分子间三个氢键的原理，在水溶液的缓冲体系下，利用polyT55缠绕的金纳米颗粒，建立了一种快速灵敏地检测奶制品中三聚氰胺的方法。其中，三聚氰胺和polyT55间特异性的氢键作用使得缠绕着polyT55的金纳米颗粒发生聚集，从而引发了金胶的PRLS信号发生变化，从而实现对奶制品中三聚氰胺的检测。该方法设计巧妙，具有较高选择性和灵敏度，免修饰，操作简单，不需要大型仪器。文档编号G01N21/78GK102608073SQ201210060848公开日2012年7月25日 申请日期2012年3月9日 优先权日2012年3月9日专利技术者祁文静, 黄承志 申请人:西南大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黄承志，祁文静，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：
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