一种可吸收的载骨诱导多肽微球及其制备方法技术

本发明专利技术一种可吸收的载骨诱导多肽微球，包括水溶性壳聚糖载体和BMP-2活性多肽，水溶性壳聚糖载体和BMP-2活性多肽的重量比为0.1～1000∶1。在24个小时内，即可制备，方法简单，生物相容性好，并具有低温、低真空、低能耗、低污染的特点，符合“软加工”（SoftProcessing）方式进行材料的合成要求。本发明专利技术方法制备的微球形态上呈规则球形，粒径分布在10～100μm，体外降解实验发现生长因子呈持续缓慢释放，制备工艺对活性肽的生物学功能没有显著影响。?

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医用材料
，尤其是涉及一种制备简单，生物相容性好，可吸收的具有骨诱导活性多肽缓释功能的微球及其制备方法。
技术介绍
骨缺损一直是骨科面临的一个难题。近年来，通过在骨修复材料上复合骨生长因子越来越受到各国学者的关注，已成为当今生物材料的研究热点之一。骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMP)属于转化生长因子β超家族成员，是一种多功能的细胞生长因子，BMP具有促进骨折愈合的能力，缩短了骨折的愈合周期。目前国内外对BMP在临床的骨诱导作用给予了很高的评价。其中ΒΜΡ-2是最主要的骨形成调控因子之一。但天然ΒΜΡ-2数量有限，且生活活性难以发挥。按ΒΜΡ-2核心功能区氨基酸序列合成的含I条24个核苷酸的短肽——ΒΜΡ-2活性多肽，相关研究表明ΒΜΡ-2 活性多肽具有良好的诱导成骨能力。然而ΒΜΡ-2活性多肽在体内容易扩散稀释，利用度低。为了更好的发挥ΒΜΡ-2活性多肽的生物学功能，实现其在骨修复部位的持续缓慢释放，本专利技术以水溶性壳聚糖为载体材料，制备具有ΒΜΡ-2活性肽控释功能的壳聚糖微球， 从而为骨修复领域提供具有生长因子控释功能的载体系统。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种制备简单，生物相容性好，效果显著的可吸收的载骨诱导多肽微球。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案一种可吸收的载骨诱导多肽微球，包括水溶性壳聚糖载体和ΒΜΡ-2活性多肽。水溶性壳聚糖载体和ΒΜΡ-2活性多肽的重量比为O. I 1000 :1。更优的方案是所述的水溶性壳聚糖为羧甲基壳聚糖、山梨酰壳聚糖、对氨基苯甲酰壳聚糖等的一种。本专利技术的另一目的在于提供一种可吸收的载骨诱导多肽微球的制备工艺。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案步骤一将O. Ig IOg水溶性壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;步骤二 将O. Olg 5g BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ;步骤三将5ml 20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘_80 (Span80) 的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加5mf50mL 5% (质量分数) 的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽 (BMP-2活性多肽)微球。本制备方法配方简单，制备工艺易行。在24个小时内，即可制备，制备简单，生物相容性好。并具有低温、低真空、低能耗、低污染的特点。符合“软加工”(Soft Processing) 方式进行材料的合成要求。本专利技术方法制备的微球形态上呈规则球形，粒径分布在10 100 μ m,体外降解实验发现生长因子呈持续缓慢释放，制备工艺对活性肽的生物学功能没有显著影响。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步详细说明实施例II - I - - ISK SK SK骚骚骚步步步将Ig羧甲基壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;将O. Ig BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ; :将20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加IOmL 5% (质量分数)的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、 异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽(BMP-2 活性多肽)微球。实施例2步骤一将2g羧甲基壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;步骤二将O. Ig BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ;步骤三:将20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加25mL 5% (质量分数)的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、 异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽(BMP-2 活性多肽)微球。实施例3步骤一将2g水溶性壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ；步骤二将O. 2g BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ;步骤三将IOml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加25mL 5% (质量分数)的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、 异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽(BMP-2 活性多肽)微球。实施例4步骤一将将2g羧甲基壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;步骤二O. 1g BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ; 步骤三:将20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加25mL 5% (质量分数)的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、 异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽(BMP-2 活性多肽)微球。实施例5步骤一将Ig山梨酰壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;步骤二 将O. 4g BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ; 步骤三将20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加25mL 5% (质量分数)的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、 异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽(BMP-2 活性多肽)微球。实施例6步骤一将3g山梨酰壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;步骤二 将O. 4g BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ; 步骤三将20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加25mL 2% (质量分数)的三聚磷酸钠(TPP)水溶液，使羧甲基壳聚糖发生交联。滴加完毕，继续搅拌2h。沉淀，石油醚、 异丙醇反复漂洗，最后将沉淀物冷冻干燥至恒重即得到所需的可吸收载骨诱导多肽(BMP-2 活性多肽)微球。实施例7步骤一将2g对氨基苯甲酰壳聚糖溶于20ml水中至完全溶解得到溶液A ;步骤二 将O. 2g BMP-2活性多肽加入溶液A中，机械搅拌至混合均匀得到混合溶液B ; 步骤三将20ml混合溶液B加入含2% (质量分数)乳化剂斯盘-80 (Span80)的液体石蜡溶液IOOmL中，室温下机械搅拌2h，然后向其中滴加15本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：甘少磊，
申请(专利权)人：北京博恩康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：