索氏-微波联合提取豚草杀虫活性物质的方法技术

本发明专利技术提供一种索氏-微波联合提取豚草杀虫活性物质的方法。步骤包括：将干燥后的豚草植株粉碎成豚草粉末；用滤纸包成封闭药包置于索氏提取器中，乙醇溶剂反复3次缓缓淋向包有豚草粉末的封闭药包；设置提取温度为80℃，提取时间为1小时；将提取后的药液用0.45μm微孔膜过滤；过滤后旋转蒸发，在40℃下减压浓缩至油膏状；用稀释后的吐温-80表面活性剂溶液将旋转蒸发仪中的膏状物质溶出；加蒸馏水定容至100ml，将此溶液作为原药液。本发明专利技术具有检测精度很高的传感器报警，在有机气体体积浓度达到一定值时系统停止微波辐射，有效地保护操作人员的安全和实验室工作环境。生产线组成简单，节省投资。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物活性物质提取技术，具体说就是一种。
技术介绍
植物是生物活性化合物的天然宝库，它在生长、发育过程中，特别是在长期与昆虫协同进化过程中，产生防御昆虫的次生代谢产物如生物碱、类黄酮、萜烯类、酚类、特异性的氨基酸和多糖等超过40万种，其中大多数具有杀虫活性。《中国有毒植物》一书列入有毒植物1300多种，其中许多种类具有杀虫(菌)作用或已被作为植物源农药利用。目前对植物中活性物质的提取方法的报道屡见不鲜，常用的提取方法有浸溃提取法、渗漉提取法、煎煮提取法、回流提取法、超声波提取法、索氏提取法、微波提取法等，每种提取方法均有自身的优缺点。浸溃提取法是将处理过的植物材料用适当的溶剂在常温或温热的情况下浸溃以溶出其中成分。该法一般是在常温下进行，对热敏性物质的提取很有利，但所需时间长，效率低，尤其是水作溶剂时易发霉变质。渗漉提取法是往植物粗粉中不断添加溶剂使其渗过粗粉，从渗流筒下端流出浸提液的方法。此方法浸出效果优于浸溃法，适用于有效成分含量低或贵重药材的提取。但提取时间较长，所用溶剂量比较大而且操作麻烦。煎煮提取法是将植物粗粉加水加热煮沸，将杀虫植物成份提取出来的方法。此法简便，植物中大部分成分可被不同程度的提出，但含挥发性及有效成分遇热易破坏的杀虫植物不宜用此法。回流提取法其最大的特点在于通过溶剂的蒸发与回流，使得每次与原料接触的溶剂都是纯溶剂，从而大大提高了萃取动力，达到提高萃取速度和效果的目的。但提取效率不高，受热易破坏的成分不宜使用此方法。索氏提取法是利用索氏提取器，多次提取活性物质，可以反复利用溶剂，提取效率高，且操作方便。提取液受热时间长，因此对受热易分解的成分也不适用。传统的索氏提取法就是利用溶剂回流及虹吸原理，使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取，既节约溶剂，萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎，以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内，置于提取器中，提取器的下端与盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管上升，被冷凝后滴入提取器中，溶剂和固体接触进行萃取，当溶剂面超过虹吸管的最高处时，含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶，因而萃取出一部分物质，如此重复，使固体物质不断为纯的溶剂所萃取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。索氏提取法的缺点①目前现有的索氏提取设备中常用的加热装置有水浴锅和电热套等，这些加热装置对在加热温度的精确性上不够准确。②在提取过程中一些有毒溶剂若发生泄漏将对实验人员造成极大伤害。③仅仅是以有机溶剂将目标成分溶解出来，对一些存在于细胞内部的活性物质提取率很低。④耗时长。超声波提取法主要通过压电换能器产生的快速机械振动波来减少目标萃取物与样品基体之间的作用力从而实现固一液萃取分离。但超声波提取法在工业化应用中受超声波衰减因素的制约，超声有效作用区域为一环形，如果提取罐的直径太大，在罐的周壁就会形成超声空白区，并且在提取罐的中央也会形成超声空白区，影响药材的提取。微波提取法微波提取法是指用微波提取器对目标物质进行微波提取的方法，微波萃取的机理可从两方面考虑，一方面微波辐射过程是高频电磁波穿透萃取介质，到达物料的内部维管束和腺胞系统。由于吸收微波能，细胞内部温度迅速上升，使其细胞内部压力超过细胞壁膨胀承受能力，细胞破裂。细胞内有效成分自由流出，在较低的温度条件下萃取介质捕获并溶解。通过进一步过滤和分离，便获得萃取物料。另一方面，微波所产生的电磁场加速被萃取部分成分向萃取溶剂界面扩散速率，例如用水作溶剂时，在微波场下，水分子高速转动成为激发态，这是一种高能量不稳定状态，或者水分子汽化，加强萃取组分的驱动力；或者水分子本身释放能量回到基态，所释放的能量传递给其他物质分子，加速其热运动，缩短萃取组分的分子由物料内部扩散到萃取溶剂界面的时间，从而使萃取速率提高数倍，同时还降低了萃取温度，最大限度保证萃取的质量。由于微波的频率与分子转动的频率相关联，所以微波能是一种由离子迁移和偶极子转动引起分子运动的非离子化辐射能。当它作用于分子上时，促进了分子的转动运动，分子若此时具有一定的极性，便在微波电磁场作用下产生瞬时极化，并以2. 45亿次/秒的速度做极性变换运动，从而产生键的振动、撕裂和粒子之间的相互摩擦、碰撞，促进分子活性部分(极性部分)更好地接触和反应，同时迅速生成大量的热能，促使细胞破裂，使细胞液溢出来并扩散到溶剂中。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种。本专利技术的目的是这样实现的步骤如下步骤一将采回的新鲜豚草植株清洗干净，于通风处阴干，50°C干燥箱烘干6h至恒重；然后转移至干燥器中，以免受潮，影响试验效果；步骤二 用植物粉碎机将干燥后的豚草植株粉碎成豚草粉末，然后储存于密闭容器中备用；步骤三称取粉碎备用的豚草粉末20g，用滤纸包成封闭药包，务必封好口，防止粉末漏出；步骤四将封闭药包置于索氏提取器中，将200ml 80%乙醇溶剂反复3次缓缓淋向包有豚草粉末的封闭药包，使封闭药包完全浸透，注意最后一次乙醇溶剂不能超过虹吸管上端，以保证索氏提取器中浸泡封闭药包的乙醇溶剂不往下流；步骤五将剩余的乙醇溶液倒入一圆底烧瓶中；步骤六将冷凝管、索氏提取器和三颈接口依次连接好，并将它们与微波提取器相连；步骤七打开微波提取器舱门，将盛有乙醇溶液的圆底烧瓶放置在烧瓶底座上，将升降管拉下，使其与长颈圆底烧瓶相连接；步骤八打开自来水开关，使冷凝管中的水开始流动；步骤九接通微波提取器电源，设置提取温度为80°C，提取时间为I小时，并启动设备进行提取；步骤十将提取后的药液用0. 45 y m微孔膜过滤；步骤十一将过滤后的药液置于旋转蒸发仪中，在40°C下减压浓缩至油膏状；步骤十二 取5ml吐温-80表面活性剂，加蒸馏水至50ml稀释为10%浓度；步骤十三用稀释后的吐温-80表面活性剂溶液将旋转蒸发仪中的膏状物质溶出；步骤十四将溶出的溶液倒入IOOml容量瓶内，加蒸馏水定容至100ml，将此溶液作为原药液，密封保存在棕色瓶中，放入4°C冰箱中供试验使用。本专利技术一种，弥补了索氏提取法和微波提取法在单独进行豚草杀虫抑菌活性成分提取时存在的缺点和不足，并且结合两种提取方法的优点，达到最终提取的活性成分不论在药效和产量上都优于其中任意一种方法， 从而得到一种优化后的提取方法即微波-索氏联合提取法。本专利技术使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取，节约了溶剂，有效地减少了废液的处理量，萃取率较高。能有效提取细胞内部的有效成分，微波辐射使细胞内部温度迅速上升，使其细胞内部压力超过细胞壁膨胀承受能力，细胞破裂，细胞内有效成分自由流出。控制温度精确，省时，可节省50% 90%的时间。微波提取设备安全较高，微波提取器是一个密闭的环境，具有良好的密闭效果。若发生有机溶剂泄漏处理起来较容易。并且目前一些微波提取设备都具有挥发性有机试剂检测系统，具有检测精度很高的传感器报警，在有机气体体积浓度达到一定值时系统停止微波辐射，有效地保护操作人员的安全和实验室工作环境。生产线组成简单，节省投资。本专利技术，使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取，在节约了溶剂的同时还保证了提取效果；克服了常用索氏提取设备中加热装置不够精确的缺点；提高了试验过程的安全性；有效提升了胞内有效成分的提取率；解决了索氏提取法提取时间过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张国财，张欣倩，张国珍，王月杰，邹传山，包颖，张秋爽，
申请(专利权)人：东北林业大学，张国财，张欣倩，
类型：发明
国别省市：