本发明专利技术涉及一种植物乳杆菌(Lactobacillus?plantarum)N13及其用途。本发明专利技术植物乳杆菌N13具有耐酸性、耐胆盐能力，对肠上皮细胞株HT-29细胞具有很高的粘附性，具有抑制EIEC生长、抑制EIEC对肠上皮细胞株HT-29细胞的粘附和侵袭的能力。用本发明专利技术植物乳杆菌N13制备的酸豆乳、发酵燕麦饮料、发酵蔬菜、发酵青贮饲料、乳酸菌乳饮料以及发酵乳具有非常好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
ー种植物乳杆菌NI 3及其用途
本专利技术属于微生物
更具体地，本专利技术涉及ー种植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)N13,还涉及所述植物乳杆菌N13的用途。背景技木肠侵袭性大肠杆菌(EnteroinvasiveEscherichia coli. , EIEC)是一组能侵入大肠上皮细胞，使宿主肠上皮细胞发生炎症或形成溃疡，引起痢疾样症状的大肠杆菌菌株。 EIEC致病毒力強，繁殖速度快，只要有10 100个EIEC细菌就可以引发疾病，它污染食品和水源，造成爆发流行，从而引起大規模性腹泻疾病。EIEC的毒力取决于侵入细胞的能力， 侵入过程包括原发和扩散两个过程。EIEC入侵肠道上皮细胞分为四个过程(I)EIEC通过 M细胞到达肠黏膜下层；(2)在巨噬细胞中复制；(3)侵入到结肠细胞的基底外侧；(4)侵入到结肠上皮细胞，并在其中繁殖，扩散，引发炎症和痢疾症状反应。治疗EIEC所引起的肠道疾病,通常的治疗方法是使用抗生素治疗。抗生素治疗方法具有以下作用1、能有效控制EIEC引起的临床和亚临床感染；2、抗生素可以抑制肠道细胞壁的增生，从而提高肠道细胞对营养成分的吸收；3、起着选择肠道微生物菌群的作用，主要是通过減少有害微生物对必须营养物质的消耗，増加有益细菌的大量繁殖；4、影响动物的某些生理代谢，从而影响动物的生长。抗生素治疗具有见效快，治疗时间短等优点，但是随着人类大量使用和滥用抗生素，同时也给环境和社会带来了一系列问题，这主要包括1、 抗生素能够导致肠道菌群失调，耐药性菌株增加，从而使得抗生素治疗愈发困难；2、长期使用抗生素造成机体免疫力下降；3、易感染情况增加，引起机体二重感染；4、抗生素等药物在畜产品和环境中的残留，威胁人类的身体健康。为了克服抗生素的副作用，越来越多的研究选用益生菌来治疗EIEC对机体的损害。Resta—Lenert 等人(Resta-Lenert, S. , &Barrett, K. E. (2006). Live probiotics protect intestinal epithelial cells irom the effects oi infection with enteroinvasive Escherichia coli (EIEC). Gut, 52,988-997.)利用活的 Streptococcus thermophilus和Lactobacillus acidophilus干预EIEC,发现联合使用这两种乳酸菌能够明显的降低EIEC对宿主的粘附和侵袭，并降低EIEC引起的宿主生理功能障碍；Medici等人(Medici, M. , Vinderola, C. G. , Weill, R. , &Perdigon, G. (2005). Effect of fermented milk containing probiotic bacteria in the prevention of an enteroinvasive Escherichia coli infection in mice. Journal of Dairy Research,72,243-249.)用含有干酪乳杆菌、德氏乳杆菌的发酵牛奶来治疗EIEC引起的感染，发现益生菌能够通过增强小鼠的肠道粘膜的免疫反应来避免EIEC的感染。这些研究表明根据细菌之间的拮抗作用，主要通过不同菌株之间的竞争性抑制作用，不仅能够控制EIEC对肠道上皮细胞的损害，还能够有益于肠道上皮细胞上细菌群落的正常分布，更加有效地发挥肠道的生理功能。 这些研究仅从所选乳酸菌菌株对EIEC的拮抗和治疗方面进行考虑，并未考察这些乳酸菌的益生菌特性。益生菌应该具有以下几个主要特性I.能够耐受胃肠道的极端环境；2.对机体肠道具有很好的粘附能力；3.能够调节机体肠道的生态平衡。本专利技术通过体外实验筛选出了不仅具有拮抗EIEC能力，而且还具有优良益生菌特性的乳酸菌，并考察乳酸菌对 EIEC粘附和侵袭结肠上皮细胞的抑制作用。与报道的治疗EIEC感染的乳酸菌相比，本专利技术的植物乳杆菌N13具有更好的耐胆盐能力和对结肠上皮细胞更高的粘附能力。鉴于益生菌对肠道病原菌具有显著的生物拮抗抑制作用和其独特的优点，因此筛选对肠侵袭性大肠杆菌具有抑制和拮抗作用的益生菌具有十分广阔的应用前景。为此，本专利技术人在总结现有技术的基础上进行了大量实验研究工作，完成了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)NI3。本专利技术的另ー个目的是提供所述植物乳杆菌N13的用途。本专利技术是通过下述技术方案实现的。本专利技术涉及一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)N13,该菌菌株已于2011 年11月29日在北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCC No. 5495。植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)NI3同时还保藏于江南大学食品微生物菌种保藏中心，保藏编号为CCFM 233。因此在本申请中，术语“CCFM 233”也指代植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)N13,两者为同一株菌株。所述的植物乳杆菌N13具有下述性质(I)对致病菌肠侵袭性大肠杆菌(Enteroinvasive Escherichia coli.，EIEC, ATCC 43893)具有显著的抑制作用；(2)具有耐酸性，在pH 2. 0的条件下可以生长；(3)具有耐胆盐能力，在1_3%。胆盐条件下能够生长；(4)对肠上皮细胞株HT-29细胞具有很高的粘附能力；(5)能够明显抑制EIEC对肠上皮细胞株HT-29细胞的粘附；(6)能够明显降低EIEC对肠上皮细胞株HT-29细胞的侵袭。本专利技术涉及所述的植物乳杆菌N13在制备酸豆乳、燕麦发酵饮料、发酵青贮饲料、 发酵蔬菜、乳酸菌乳饮料以及发酵乳制品中的用途。所述的含植物乳杆菌N13的酸豆乳是采用下述方法制备的按照软水与大豆的体积比2-4在温度75_85°C下用软水浸泡大豆l_2h，去除大豆皮，去掉浸泡水，再按照大豆与沸水的重量比I : 6-10加沸水磨浆，其浆料在温度80-85°C 的条件下保持10-15min，然后用150目筛网过滤，得到ー种豆乳；先往该豆乳中加入以豆乳重量计5% -10%的蔗糖，再使用均质机在压カ15-25MPa下进行均质，随后在温度95°C下进行杀菌处理lOmin，其温度降至36-38°C时，再按照以豆乳重量计0. 04-0. 05%的接种量接入商业干粉发酵剂保加利亚乳杆菌、商业干粉发酵剂嗜热链球菌和下述制备的植物乳杆菌 N13发酵剂，其重量比例为I : I : 1，在温度35-42°C下发酵6-8小时，然后在4°C冷藏保存即得到含植物乳杆菌N13活菌的酸豆乳；植物乳杆菌N13发酵剂干粉制剂是按照如下方法制备的植物乳杆菌N13以MRS 液体培养基体积计1-3%接种于MRS液体培养基中，在温度37°C下培养20-28h，使植物乳杆菌N13活菌数达到108Cfu/mL以上，然后其培养液在转本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈卫，刘小鸣，田丰伟，张灏，赵建新，宋元达，刘文玉，范大明，王刚，张秋香，陈海琴，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：
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