供生理注射用的半胱氨酸制造技术

本申请描述了一种制备和使用可用于逆转神经肌肉阻断的生理半胱氨酸溶液的方法，所述逆转神经肌肉阻断是由半胱氨酸可逆性神经肌肉阻断剂导致的，其克服了半胱氨酸沉淀和二聚化的问题。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】供生理注射用的半胱氨酸本申请要求2009年8月19日提交的美国临时专利申请(申请号为61/235,191)以及2010年3月17日提交的PCT申请(申请号为PCT/US2010/000796)的优先权。各申请的整体内容在此参考并入。本申请还与2007年12月5日提交的申请号为11/951,114的美国申请；2004年10月28日提交的申请号为10/975,197的美国申请；2004年10月28日提交的申请号为PCT/US2004/035869的PCT申请；2004年10月28日提交的申请号为60/515,048的美国申请；以及2009年3月19日提交的申请号为61/160,915的美国临时专利申请相关，这些申请的内容在此整体参考并入。专利技术背景在某些外科手术中，必须使用神经肌肉阻断剂。然而，当神经肌肉阻断剂产生作用时，其会使患者完全麻痹。因此，神经肌肉阻断剂的使用仅限于肌肉松弛对于有效治疗患者是必需的情况，例如，包括气管插管的特定外科操作。由于麻痹会干扰基本的身体功能(例如，呼吸)，因此医师选择的神经肌肉阻断剂仅具有需要的活性但不能超过此需要的活性。例如，当必须对患者进行气管插管时，使用神经肌肉阻断剂松弛气道肌肉，以便插管。但是，神经肌肉阻断剂也使胸部肌肉松弛，从而导致患者停止呼吸。麻醉科医师必须迅速将呼吸管插入患者的气管，开始肺部通气。如果无法尽快插管，医师必须采取某些形式的人工复苏措施进行干涉，否则患者可能遭受缺氧，以及因缺氧所致的相关组织和脑损伤。利用迅速起效的拮抗剂快速逆转神经肌肉阻断剂可以使患者脱离危险，并避免或将人工复苏持续过程降至最低。本专利技术人开发了神经肌肉阻断剂，通过注射硫醇如氨基酸，半胱氨酸，能够出乎意料的且迅速逆转该神经肌肉阻断剂。但是，有效浓度的生理半胱氨酸溶液不稳定，容易氧化或二聚化。专利技术概述因此，本专利技术的一方面为一种制备用于生理给药的半胱氨酸溶液的方法，包括：(a)获得pH为约1.80至约2.20的半胱氨酸水溶液；以及(b)将半胱氨酸水溶液与缓冲溶液混合，制备用于生理给药的pH约4.5至约5.5的半胱氨酸溶液，其中半胱氨酸水溶液、缓冲溶液和/或用于生理给药的半胱氨酸溶液中的氧基本上被除去。在某些实施方式中，半胱氨酸水溶液的pH约1.90至约2.00。半胱氨酸水溶液可以使用生理上可接受的溶剂制备，例如，水、生理盐水、糖溶液及其组合。如本文所使用的，除非另有说明，术语“半胱氨酸”包括L-半胱氨酸和D-半胱氨酸，或其任意混合物，例如外消旋化合物。如下文所描述的，在某些情况下，半胱氨酸L或D异构体的使用可以带来益处。例如，L-半胱氨酸一般更便宜且更易于获得。但是，当给药大量半胱氨酸时，可以优选半胱氨酸的D-异构体，因为其同样具有活性且具有使副作用降至最低的趋势(例如，心血管不良反应)。溶液中使用的用于制备生理给药的半胱氨酸溶液的缓冲溶液可以包括弱碱。能够用于缓冲溶液的化合物的例子包括三(羟甲基)甲胺(Tris)、N，N-二(2-羟乙基)甘氨酸(Bicine)、N-三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)、4-2-羟基乙基-1-哌嗪基乙磺酸盐(HEPES)、{[三(羟甲基)甲基]氨基}乙磺酸盐(TES)、3-(N-吗啉基)丙磺酸盐(MOPS)、哌嗪基-N，N′-二(2-乙磺酸盐(PIPES)、2-(N-吗啉基)乙磺酸盐(MES)或其组合。如本文所描述的，含50mg/ml以上半胱氨酸的半胱氨酸溶液难于制备，但是本文所述的供生理给药的半胱氨酸溶液的半胱氨酸浓度为约100至约300mg/ml，或约150-250mg/ml。半胱氨酸水溶液和/或半胱氨酸的稳定溶液可以包含其他成分，例如谷胱甘肽。当包含谷胱甘肽时，其浓度可以为100至200mg/ml。半胱氨酸水溶液和/或半胱氨酸稳定溶液中也可以包含L-半胱氨酸和D-半胱氨酸的混合物。半胱氨酸水溶液和/或半胱氨酸稳定溶液中可以包含其他成分，例如抑菌剂、螯合剂、抗氧化剂或其组合。半胱氨酸水溶液和/或半胱氨酸稳定溶液中存在的抗氧化剂的例子包括维生素、辅因子及其组合。例如，抗氧化剂可以是抗坏血酸、维生素A、维生素E、辅酶Q10、黄酮和/或其组合。半胱氨酸水溶液和/或半胱氨酸稳定溶液中存在的螯合剂的例子包括柠檬酸、二羧甲基-谷氨酸、乙二胺二琥珀酸(EDDS)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二乙烯三胺五(甲叉膦酸)的肝素钠盐(DTPMP·Na7)、苹果酸、氮基三乙酸(NTA)、甲硫氨酸、草酸、磷酸、极性氨基酸(例如，精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、赖氨酸、和鸟氨酸)、铁载体(例如，去铁草酰胺B)、琥珀酸及其组合。本专利技术的另一方面为一种制备在生理给药前可以保存的稳定半胱氨酸溶液的方法，该方法涉及：(a)将氧从一定体积的生理盐水或水中除去；(b)将足量半胱氨酸加入生理盐水或水中，制备150-250mg/ml的半胱氨酸溶液；(c)调节150-250mg/ml半胱氨酸溶液的pH，使其pH为约1.90至约2.00，制备pH为约1.90至约2.00的半胱氨酸溶液；(d)在pH为约1.90至约2.00的半胱氨酸溶液中通入不含氧的气体，制备去氧半胱氨酸溶液；以及(e)将去氧半胱氨酸溶液装入容器中并将容器密封，从而制备在生理给药前可以保存的稳定半胱氨酸溶液。这种稳定的半胱氨酸溶液，例如，最多可以贮存约1年，而没有明显的沉淀或半胱氨酸二聚化现象。在某些实施方式中，稳定的半胱氨酸冷冻保存。当欲给药半胱氨酸时，可将稳定半胱氨酸溶液调整至pH为约4.4至约5.5，以制备半胱氨酸的生理溶液。这样，可以按照下述步骤调整稳定半胱氨酸溶液的pH：f)将缓冲溶液加入稳定半胱氨酸溶液中，以调整pH为约4.4至约5.5，不能将稳定半胱氨酸溶液显著暴露于氧气中；g)将缓冲溶液与稳定半胱氨酸溶液混合，以制备供生理给药的pH为约4.5至约5.5的半胱氨酸溶液，其中混合时不能将稳定半胱氨酸溶液或缓冲溶液基本上暴露于氧气中。在多个实施方式中，建议在将缓冲溶液加入至稳定半胱氨酸溶液前基本除去缓冲溶液中的氧。本专利技术的另一个方面为一种试剂盒，其包括：(a)含有pH为约1.8至约2.1的半胱氨酸稳定溶液的第一个容器；(b)含有用于提高半胱氨酸稳定溶液的pH的缓冲溶液的第二个容器；以及(c)试剂盒保存、使半胱氨酸稳定溶液的pH升高至适宜pH和/或给药半胱氨酸的生理溶液以逆转神经肌肉阻断的说明书。试剂盒还可以包括其他组分。例如，试剂盒可以包括用于转移适量缓冲液至半胱氨酸的稳定溶液和/或用于向患者给药半胱氨酸的生理溶液的一个或多个注射器和针头。此外，试剂盒还可以包括含有神经肌肉阻断剂的第三个容器，其中神经肌肉阻断剂在主体内产生的神经肌肉阻断可以被半胱氨酸逆转。在多个实施方式中，建议基本除去第一个容器和/或第二个容器中的氧。可以采用本文所述的任意方法和程序制备半胱氨酸的稳定溶液。本专利技术的另一方面为一种逆转患者神经肌肉阻断的方法，包括给药患者有效量的半胱氨酸生理溶液，其中半胱氨酸生理溶液通过一种方法制备，所述制备方法包含：(a)将氧从一定体积的生理盐水或水中除去；(b)将足量半胱氨酸加入生理盐水或水中，制备150-250mg/ml的半胱氨酸溶液；(c)调节150-250mg/ml半胱氨酸溶液的pH，使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.08.19 US 61/235,191...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·J·萨瓦雷塞，P·M·黑特，
申请(专利权)人：康奈尔大学，
类型：发明
国别省市：