本发明专利技术提供了一种提高粘红酵母油脂含量的培养基及其发酵生产粘红酵母的方法。本发明专利技术提供的培养基是将麦芽汁培养基离心后，保留上清液，再将沉淀部分进一步溶解，将溶解部分与前一步离心后的上清液合并作为粘红酵母的培养基，在温度25-33℃、转速120-160r/min条件下培养96-192h，发酵粘红酵母，结果发现粘红酵母的油脂含量比传统方法的油脂含量增加30％～40％，本发明专利技术方法具有很高的实际应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物发酵领域，具体地，涉及一种提高粘红酵母油脂含量的培养基及其应用。
技术介绍
粘红酵母(Rhodotorula glutinis)是产油微生物种类之一，其含油量25 % 40%以上。近年来，全球面临应对气候变化、能源危机的挑战，生物燃料包括微生物油脂成为研究热点之一，对于粘红酵母的研究也倍受关注。粘红酵母产油量的多少取决于两个方面，一是粘红酵母的生物量，二是其含油量。生物量的提高是粘红酵母在发酵过程中细胞快速增殖的结果，说明培养基更适合其生长。粘红酵母在具有一定生物量的基础上，其油脂含量高低直接关系着产油量的多少，因此，如何提高粘红酵母的油脂含量是研究者和产业界追求的热点。可见，研究提高粘红酵母油脂含量的方法对研究其物质转化和生产应用均具有重要的价值。粘红酵母传统培养方法是应用葡萄糖培养基和麦芽汁培养基。葡萄糖培养基配制比较复杂，需要有机物和无机物十余种，而麦芽汁培养基配制简单，即将麦芽浸粉水溶，离心后的上清液就是粘红酵母培养基。传统的做法是将其离心沉淀废弃，这不仅浪费了资源而且也增加了培养成本。葡萄糖培养基和麦芽汁培养基培养粘红酵母的不足之处是细胞增殖速率较慢，油脂含量较低，难以适应粘红酵母的工业化生产，因此，研究一种提高粘红酵母油脂含量的方法势在必行，具有重要的实际意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种提高粘红酵母油脂含量的培养基及其制备方法；本专利技术的另一个目的在于提供一种提高粘红酵母油脂含量的方法。粘红酵母细胞圆形、卵形或长形。多边芽殖，有明显的红色或黄色色素，很多种因生荚膜而形成粘质状菌落。在麦芽汁斜面上培养一个月以上，菌苔颜色呈现珊瑚红到橙红或微带橘红色。常因由荚膜而形成粘质状菌落，产胡萝卜素和L-苯丙氨酸。空气、水、 花、土壤、鳟鱼肠道、泡菜水等处均可分离到粘红酵母。本专利技术使用的粘红酵母菌种购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号为 CGMCC 2.704。本专利技术提供的粘红酵母培养基，通过以下步骤制备(1)将麦芽浸粉溶于蒸馏水中，离心，取上清液进行高压灭菌；(2)将步骤(1)中的离心沉淀物和灭菌过程中形成的沉淀物合并，用蒸流水搅拌或超声波处理，再离心，取上清液与步骤(1)的上清液合并，调节溶液PH值5. 0-5. 5，经高压再次灭菌，得到粘红酵母培养基。具体地，所述步骤(1)麦芽浸粉与蒸馏水的质量体积比为100g/L。所述步骤(1)离心条件为3000 6000r/min离心15 20min。所述步骤( 对合并的沉淀物用2-5倍体积量的蒸流水800 2600r/min搅拌 20min 60min 或 400 900W 超声波处理 15_20min，3000 6000r/min 离心 15 20min后的上清液与步骤(1)的上清液合并，得到粘红酵母培养基。所述步骤( 对合并的沉淀物用4倍体积量的蒸流水1500r/min搅拌30min或 800W超声波处理15min，4000r/min离心20min后的上清液与步骤(1)的上清液合并，调节溶液PH值5. 3，得到粘红酵母培养基。在本专利技术的一个实施例中所用的超声波细胞粉碎仪额定频率为18 22KHz，本领域技术人员可以通过调节超声波仪的功率来控制超声处理的强度。本专利技术提供了一种提高粘红酵母油脂含量的方法，是将粘红酵母接种于本专利技术的粘红酵母培养基上，置于摇床中进行培养。本专利技术提供的粘红酵母培养基IL中接种浓度为50X IO6 80 X IO6个/ml的粘红酵母50ml。本专利技术提供的粘红酵母培养基IL中接种浓度为70X 106个/ml的粘红酵母50ml。具体地，培养温度为25-33°C ；摇床转速为120-160r/min ；培养时间为96_192h。优选地，培养温度为30°C。优选地，摇床转速为140r/min。优选地，培养时间为144h。本专利技术提供了上述培养基在提高粘红酵母油脂含量中的应用。本专利技术还提供了上述培养基和培养方法在生物发酵中的应用。本专利技术是将传统的麦芽汁培养基配制过程中，废弃沉淀的部分经过高速搅拌和超声波处理使其进一步的溶解。高速搅拌和超声波处理是广泛应用在化学等相关领域常用的方法，本专利技术的本质就是用最普通的方法处理传统麦芽汁配制过程中废弃的部分，使其培养基的营养组份更加全面，使原本没有外力难以溶解的物质从而溶解出来，部分大分子转化成小分子物质，更利于粘红酵母的吸收和利用，获得了粘红酵母生长因子，从而达到了大幅度提高了其油脂含量的效果。本专利技术提供的粘红酵母培养基和发酵方法能够大幅度降低粘红酵母规模化培养生产油脂的成本，又能获得大量的粘红酵母产油脂量，利用本专利技术方法培养粘红酵母的油脂含量比用传统法方法培养的油脂含量增加30% -40%以上。附图说明图1为不同培养基对粘红酵母油脂含量的影响图，其中横坐标1为麦芽汁培养基， 2为葡萄糖培养基，3为实施例1制得的培养基，4为实施例2制得的培养基，5为实施例3 制得的培养基，纵坐标代表培养基发酵粘红酵母结束后测得的粘红酵母油脂含量。具体实施例方式以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1粘红酵母培养基制备(1)将IOOg麦芽浸粉溶于IL蒸馏水中，4000r/min离心15min，滤纸过滤，将上清液1 X IO5Pa高压灭菌15min ；(2)将步骤(1)中的离心沉淀物和灭菌过程中形成的沉淀物合并，用4倍体积量的蒸流水进行高速1500r/min搅拌30min，离心4000r/min 20min后的上清液与步骤(1)离心的上清液合并，调节溶液pH值5. 0，然后经1 X IO5Pa高压再次灭菌15min，得到粘红酵母培养基。实施例2粘红酵母培养基制备(1)将IOOg麦芽浸粉溶于IL蒸馏水中，3000r/min离心15min，滤纸过滤，将上清液1 X IO5Pa高压灭菌30min ；(2)将步骤(1)中的离心沉淀物和灭菌过程中形成的沉淀物合并，用2倍体积量的蒸流水超声波800W处理15min，3000r/min离心15min后的上清液与步骤(1)离心的上清液合并，调节溶液PH值5. 5，然后经IX 105 高压再次灭菌30min，得到粘红酵母培养基。实施例3粘红酵母培养基制备(1)将IOOg麦芽浸粉溶于IL蒸馏水中，6000r/min离心15min，滤纸过滤，将上清液1 X IO5Pa高压灭菌20min ；(2)将步骤1)中的离心沉淀物和灭菌过程中形成的沉淀物合并，用5倍体积量的蒸流水进行高速800r/min搅拌60min，6000r/min离心15min后的上清液与步骤(1)离心的上清液合并，调节溶液pH值5. 3，然后经1 X IO5Pa高压再次灭菌20min，得到粘红酵母培养基。实施例4粘红酵母菌种的发酵培养1、从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买的粘红酵母菌种(编号 CGMCC2. 704)保藏在安瓿管中，处于冻干状态，在实验之前需要恢复菌种活性。在超净工作台中，用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管，将安瓿管顶端在火焰上加热，向加热处滴几滴无菌水使玻璃开裂。用镊子本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李博生，王政，
申请(专利权)人：北京林业大学，
类型：发明
国别省市：
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