一种芸薹属植物对根肿病抗性的鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种芸薹属植物对根肿病抗性的鉴定方法，属于芸薹属作物抗病性鉴定技术领域。该方法用酸性水浸泡后的珍珠岩与打碎的芸薹根肿菌菌根按1升：10～15克比例混合成培养基质，培养基质填充在冷冻盒格内，待鉴定品种的种子和感根肿病的感病品种种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，冷冻盒置于瓷盘内，用1/2MS培养基作和打碎的芸薹根肿菌菌根制成pH为5.5，病菌孢子含量为1×108个/毫升以上的接种菌液；接种菌液注入瓷盘内，置入人工气候箱内培养，根据调查的病情指数鉴定待鉴定品种对根肿病的抗性。该方法可规模化鉴定根肿病的抗性，节省大量土地，保证鉴定条件一致，省时省工，鉴定结果准确可靠，操作简便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属芸薹属作物抗病性鉴定
，具体涉及对根肿病抗性的鉴定方法。
技术介绍
根月中病(club root)是由芸蔓根月中 HPlasmodiophora brassicae)侵染植物引起的一种世界性病害。芸薹根肿菌属真菌界鞭毛菌亚门根肿菌纲根肿菌属 G^aswoi/ioMora)，是专一侵染芸薹属植物的致病性病原菌，该病原菌侵入植物根毛、皮层、形成层，产生含有植物生长激素的病菌分泌物，刺激薄壁细胞的异常分裂增大，在增生部位膨大形成瘤状的肿根。肿根的出现一方面降低了根系吸收和供给水份及养份的能力， 造成地上部分失水、枯黄和死亡；另一方面使植物根系失去了外层的保护作用，易被其它杂菌入侵而引起腐烂。芸薹属植物Mra^ica)是根肿菌的专一性寄主，在高温、高湿和酸性的环境条件下，有利于病害发生，可导致作物产量严重下降，甚至绝收。云南是典型的高原红壤，酸性较重，夏天的时候气温高、湿度大，根肿病发生严重。虽然经过了诸多年药剂防治的研究，但根肿病有“植物的癌症”之称，药剂防治效果不突出。应用抗病品种预防根肿病的发生是最安全而又十分经济的一种方法。但应用抗病品种，首先需要建立品种抗病能力的检测方法。芸薹根肿菌是寄生性真菌，目前尚不能人工培养，所以无法进行人工接种鉴定。传统的方法是将品种种植在根肿病严重的地块进行检测，或将根肿病病根、菌土带回单位，搭建小拱棚种植品种，进行鉴定。这两种方法都难以保证鉴定条件的一致性，而且费工、费时，难以完成规模化的品种鉴定需求。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术对根肿病的抗性鉴定存在难以保证鉴定条件的一致性，费工、费时，难以完成规模化的品种鉴定的缺陷和不足，其目的是提供。为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案来实现的 ，其步骤如下(1)培养基质的制备用珍珠岩和打碎的芸薹根肿菌菌根混合而成的混合物作为培养基质，珍珠岩在使用前用PH为5. 0 5. 5的酸性水浸泡72 96小时以上，珍珠岩与打碎的芸薹根肿菌菌根混合的比例为1升10 15克；(2)培养基质的填充用冷冻盒作为培养器皿，将冷冻盒的每一格底部打一个孔，将培养基质填充在冷冻盒的格内，培养基质的高度低于格子高度2mm 3mm ；(3)播种将待鉴定品种的种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，播种后再覆盖一层培养基质，使培养基质的高度与冷冻盒的格子高度一致，盖上盒盖，将冷冻盒置于瓷盘内或不锈钢盘内；(4)接种菌液的制备用1/2MS培养基作为培养液，将打碎的芸薹根肿菌菌根和所述的培养液混合，制成病 菌孢子含量为IX IO8个/毫升以上的溶液，用lmol/L的盐酸溶液调节溶液的pH为5. 5即 制成接种菌液；(5)将接种菌液注入所述的瓷盘内或不锈钢盘内，使接种液的高度为0.5^1. Ocm ；(6)每ー鉴定批次用感根肿病的感病品种作为对照；(7)将注入了接种菌液的瓷盘或不锈钢盘及其盘内的冷冻盒一起置入人工气候箱内， 30°C暗培养3天，保持空气湿度在48 52%，3天后，打开盒盖和气候箱光源，转入光照生 长，光照时间12 h/d，光照强度5300 55001x，调节空气湿度在75% 80%，调节人工气候 箱的温度为 洸で；(8)病情指数的调查统计对照材料在培养基质以上的叶片萎蔫和根部肿大时，按单株病症分级标准进行调查统 计，计算病情指数，根据调查的病情指数，按群体抗性分级标准鉴定出待鉴定品种对根肿病 的抗性；所述的单株病症分级标准是 病级病症 0级根不膨大，1级根膨大，根直径< 0. 3厘米， 2级根膨大，0. 3厘米<根直径< 0. 6厘米， 3级根膨大，根直径> 0. 6厘米； 病情指数的计算公式是权利要求1. ，其特征在于步骤如下(1)培养基质的制备用珍珠岩和打碎的芸薹根肿菌菌根混合而成的混合物作为培养基质，珍珠岩在使用前用PH为5. 0 5. 5的酸性水浸泡72 96小时，珍珠岩与打碎的芸薹根肿菌菌根混合的比例为1升10 15克;(2)培养基质的填充用冷冻盒作为培养器皿，将冷冻盒的每一格底部打一个孔，将培养基质填充在冷冻盒的格内，培养基质的高度低于格子高度2mm 3mm ；(3)播种将待鉴定品种的种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，播种后再覆盖一层培养基质，使培养基质的高度与冷冻盒的格子高度一致，盖上盒盖，将冷冻盒置于瓷盘内或不锈钢盘内；(4)接种菌液的制备用1/2MS培养基作为培养液，将打碎的芸薹根肿菌菌根和所述的培养液混合，制成病菌孢子含量为IX IO8个/毫升以上的溶液，用lmol/L的盐酸溶液调节溶液的pH为5. 5即制成接种菌液；(5)将接种菌液注入所述的瓷盘内或不锈钢盘内，使接种液的高度为0.5^1. Ocm ；(6)每一鉴定批次用感根肿病的感病品种作为对照；(7)将注入了接种菌液的瓷盘或不锈钢盘及其盘内的冷冻盒一起置入人工气候箱内， 30°C暗培养3天，保持空气湿度在48 52%，3天后，打开盒盖和气候箱光源，转入光照生长，光照时间12 h/d，光照强度5300 55001x，调节空气湿度在75% 80%，调节人工气候箱的温度为 ；(8)病情指数的调查统计对照材料在培养基质以上的叶片萎蔫和根部肿大时，按单株病症分级标准进行调查统计，计算病情指数，根据调查的病情指数，按群体抗性分级标准鉴定出待鉴定品种对根肿病的抗性；所述的单株病症分级标准是 病级病症 0级根不膨大，1级根膨大，根直径< 0. 3厘米， 2级根膨大，0. 3厘米<根直径< 0. 6厘米， 3级根膨大，根直径> 0. 6厘米； 病情指数的计算公式是全文摘要本专利技术公开了，属于芸薹属作物抗病性鉴定
该方法用酸性水浸泡后的珍珠岩与打碎的芸薹根肿菌菌根按1升10～15克比例混合成培养基质，培养基质填充在冷冻盒格内，待鉴定品种的种子和感根肿病的感病品种种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，冷冻盒置于瓷盘内，用1/2MS培养基作和打碎的芸薹根肿菌菌根制成pH为5.5，病菌孢子含量为1×108个/毫升以上的接种菌液；接种菌液注入瓷盘内，置入人工气候箱内培养，根据调查的病情指数鉴定待鉴定品种对根肿病的抗性。该方法可规模化鉴定根肿病的抗性，节省大量土地，保证鉴定条件一致，省时省工，鉴定结果准确可靠，操作简便。文档编号A01G7/06GK102511368SQ20111045872公开日2012年6月27日 申请日期2011年12月31日 优先权日2011年12月31日专利技术者和江明, 杨红丽, 汪骞, 田志梅, 胡靖锋, 钟利 申请人:云南省农业科学院园艺作物研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：和江明，胡靖锋，汪骞，钟利，杨红丽，田志梅，
申请(专利权)人：云南省农业科学院园艺作物研究所，
类型：发明
国别省市：