一种玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法技术

本发明专利技术涉及一种玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，首先将鸡冠酶解液用活性炭吸附过滤，然后，调节离子强度，使CPC与玻璃酸钠最大限度的进行络合沉淀，络合物解离后，用乙醇将玻璃酸钠沉淀出来。利用本方法制备玻璃酸钠，可有效提高玻璃酸钠的收率，提高生产效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
玻璃酸(Hyaluronic acid，简称HA)，是由(1 — 3) _2_乙酰氨基_2_脱氧-β _D_葡萄糖-(1 — 4) -0- β -D-葡糖醛酸双糖重复单位所组成的直链多聚糖，分子式为(C14H21NO11) η,依据组织来源不同，分子量变化范围为2 X IO5 7 X 106，双糖单位数为300 11000对。商品玻璃酸一般为钠盐形式，为白纤维状或粉末状固体，有较强的吸湿性，溶于水，不溶于有机溶剂。玻璃酸钠的大分子网状结构通过与H2O形成氢键结合大量的水，在体内具有构成多种基质、调节渗透压、调控大分子物质的转运、在细胞周围形成物理屏障以及调节细胞功能等作用。玻璃酸钠可作为眼科手术辅助用药及变形性膝关节病和肩关节周围炎的辅助治疗，还在组织生成、创伤愈合、肿瘤入侵和调节细胞功能诸方面具有重要的生理功能。玻璃酸钠制剂中残留的蛋白质和核酸等杂质是导致其致炎症性的主要原因。长期以来，在生物分离纯化
，寻求生物物质的分离纯化的新技术新方法，减少杂质含量成为业界关注的重点。在以往的公开的文献中，提取法生产玻璃酸钠的纯化工艺，对于用季铵盐沉淀及解离这一步，一般都是一次活性炭吸附过滤后的滤液直接加入络合剂进行络合，而缺少诸如离子强度，PH等控制指标，此种方法有如下缺点1.离子强度偏高或者偏低，络合沉淀不完全，对收率造成影响。2.离子强度不正常，造成络合沉淀性状不好，上清液粘稠，收集络合沉淀困难。以上方法会造成玻璃酸钠在纯化过程中造成不必要的浪费，降低生产效率；会使在实际大生产中排空上清液困难，增加能耗，不利于大生产操作。
技术实现思路
本专利技术的目的提供玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，以克服上述生产玻璃酸钠工艺方法的不足，该方法能使络合沉淀完全且性状好，便于生产操作，收率高。为实现本专利技术的目的，本专利技术的技术方案是，其特征在于，包括以下步骤(1)鸡冠酶解液用活性炭吸附过滤；(2)将步骤(1)所得的滤液用纯化水或者氯化钠调节电导率至600uS/cm-3. 6ms/ cm,再加入CPC水溶液进行络合沉淀，络合完毕后收集络合物，用解离液将络合物搅拌解 1 ；(3)将步骤( 所得的解离后的液体用乙醇沉淀，所得玻璃酸钠，脱水，干燥。在本专利技术的一更优选实施例中，调节滤液的电导率为1. 3ms/cm-l. 7mS/cm。在本专利技术的一优选实施例中，每升滤液加入CPC的量为3_5g，络合时间为30min。在本专利技术的一优选实施例中，解离液为0. 4mol/L的氯化钠溶液，用量为步骤(1) 所得的滤液体积的8-12%。在本专利技术的一优选实施例中，解离时间为3-5小时。在本专利技术的一优选实施例中，步骤(3)中，所述乙醇是95%乙醇，其用量是解离后的液体体积的2-3倍。在本专利技术的一更优选实施例中，所述乙醇的用量是解离后的液体体积的2倍。本专利技术的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法中，在纯化阶段，CPC与HA的特异性结合形成络合沉淀，从而去除大部分的杂质，提高HA的纯度，而络合是否完全，直接关系到玻璃酸钠的收率。所以需要调节离子强度在一定的范围内CPC才能与HA最大限度的结合， 有效防止络合沉淀步骤发生重大偏差的情况发生，特别适合工业化生产的玻璃酸钠纯化方法，并能最大限度的提高其收率，其余步骤与现有制备玻璃酸钠的方法相同，利用本方法制备玻璃酸钠，可有效提高玻璃酸钠的收率，提高生产效率。具体实施例方式通过下面给出的本专利技术的具体实施例可以进一步清楚地了解本专利技术，但它们不是对本专利技术的限定。实施例1 以现有提取法制备玻璃酸钠，取鸡冠酶解液一次活性炭吸附过滤后滤液MOOml， 平均分成6份，分别编号A，B, C，D，E，F。将滤液分别用纯化水或者氯化钠调节电导率至如下A_600us/cm，B-1. 2ms/cm，C-L 8ms/cm，D-2. 4ms/cm，E-3. Oms/cm，F-3. 6ms/cm，分别取 1. 6g的CPC加适量水溶解后，与上述6份滤液在条件完全相同的条件下络合沉淀，络合完毕后收集沉淀，配制^OmlO. 4mol/L的解离液将络合沉淀解离证左右，再用2倍体积的95% 乙醇将HA醇沉出来后脱水三次，再抽真空干燥，得HA，比较收率。实施例2 以现有提取法制备玻璃酸钠，取鸡冠酶解液一次活性炭吸附过滤后滤液2000ml， 平均分成6份，分别编号A，B, C，D，E，F。将滤液分别用纯化水或者氯化钠调节电导率至如下A_600us/cm，B-L 2ms/cm，C-L 8ms/cm，D-2. 4ms/cm，E-3. Oms/cm, F-3. 6ms/cm，分别取 1. 7g的CPC加适量水溶解后，与上述6份滤液在条件完全相同的条件下络合沉淀，络合完毕后收集沉淀，配制230ml0. 4mol/L的解离液将络合沉淀解离证左右，再用2倍体积的95% 乙醇将HA醇沉出来后脱水三次，再抽真空干燥，得HA，比较收率。实施例3 以现有提取法制备玻璃酸钠，取鸡冠酶解液一次活性炭吸附过滤后滤液4800ml， 平均分成6份，分别编号A，B, C，D，E，F。将滤液分别用纯化水或者氯化钠调节电导率至如下A_600us/cm，B-1. 2ms/cm，C-L 8ms/cm，D-2. 4ms/cm，E-3. Oms/cm，F-3. 6ms/cm，分另Ij取 3. 2g的CPC加适量水溶解后，与上述6份滤液在条件完全相同的条件下络合沉淀，络合完毕后收集沉淀，配制520ml0. 4mol/L的解离液将络合沉淀解离证左右，再用2倍体积的95% 乙醇将HA醇沉出来后脱水三次，再抽真空干燥，得HA，比较收率。以上每批实验过程中观察络合沉淀性状，记录最终成品的收率，具体如下实施例1 表 权利要求1.，其特征在于，包括以下步骤(1)鸡冠酶解液用活性炭吸附过滤；(2)将步骤(1)所得的滤液用纯化水或者氯化钠调节电导率至600US/Cm-3.6mS/cm，再加入CPC水溶液进行络合沉淀，络合完毕后收集络合物，用解离液将络合物解离；(3)将步骤( 所得的解离后的液体用乙醇沉淀，所得玻璃酸钠，脱水，干燥。2.根据权利要求1所述的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，其特征在于，调节滤液的电导率为 1. 3ms/cm-l. 7ms/cm。3.根据权利要求1所述的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，其特征在于，步骤(2) 中，每升滤液加入CPC的量为3-5g，络合时间为30min。4.根据权利要求1所述的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，其特征在于，步骤(2) 中，解离液为0. 4mol/L的氯化钠溶液，用量为步骤(1)所得的滤液体积的8-12%。5.根据权利要求1所述的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，其特征在于，步骤(2) 中，解离时间为3-5小时。6.根据权利要求1所述的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，其特征在于，步骤(3) 中，所述乙醇是95%乙醇，其用量是解离后的液体体积的2-3倍。7.根据权利要求6所述的玻璃酸钠二次络合沉淀纯化的方法，其特征在于，所述乙醇的用量是解离后的液体体积的2倍。全文摘要本专利技术涉及，首先将鸡冠酶解液用活性炭吸附过滤，然后，调节离子强度，使CPC与玻璃酸钠最大限度的进行络合沉淀，络合物解离后，用乙醇将玻璃酸钠沉淀出来。利用本方法制备本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张云，陈亮，汪洋，
申请(专利权)人：上海景峰制药有限公司，
类型：发明
国别省市：