以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体及其培育方法技术

本发明专利技术涉及一种以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体及其培育方法。所述的培育方法具体步骤为：将蛹虫草子实体消毒、清洗后，切成段后接种于固体培养基中培养得到菌块；将所得的菌块接种至一级液体菌种培养基中培养得到一级液体菌种；将所得的一级液体菌种用无菌水稀释得到一级液体菌种稀释液；将珍珠岩和轾石混合，灭菌后与上述的一级液体菌种稀释液混合，得到虫草混合培养土；将4～5龄家蚕幼虫用酒精擦虫体后，用一次性针筒吸入所得的一级液体菌种，注射到家蚕体内；将接种后的家蚕幼虫插进所得的虫草混合培养土中，幼虫头部朝上，培养后采收，得到以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体。本发明专利技术头部子实体长度2cm以上，有效成分含量高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
1、蛹虫草Cordyc印s militaris (La. :Fr)，又名北冬虫夏草，为麦角菌目，麦角菌科，真菌，是我国医药学宝库中的冬虫夏草一类珍稀药用真菌，经医药科学工作者多年研究证明，蛹虫草所含虫草素、虫草多糖、虫草酸、SOD酶等生理活性物质和营养成份的含量都高于或接近冬虫夏草，现已被卫生部批准为新资源食品。人工培育蛹草大都以大米或虫蛹为培养基，由于家蚕虫草的人工培养尚无真正形成虫体内僵化和形成子实体长度2cm以上的相关报导。对我国养蚕业的开发具有广阔的应用前景。2、中国专利技术专利申请200510101348. O公开了一种以黄粉虫蛹为寄主的蛹虫草子实体及其培育方法，采用蛹虫草菌向黄粉虫蛹前胸注入0. 05-0. 2ml后，将受侵感染的黄粉虫蛹置于无菌的培养基当中进行保湿培养50-60天，其在黄粉虫上长出子实体。3、中国专利技术专利94112056. 2公开了一种快速高产人工培育蚕蛹虫草的方法。其实蛹草菌的分生孢子悬浊液，用昆虫针等提取菌液刺入蚕蛹，待营养菌在体内充分生长，蚕蛹僵硬后，在适当温度、光线下培养即可获得大量蛹虫草。以上2、3都是以昆虫蛹为寄主培育蛹虫草子实体而本专利用蚕幼虫为寄主，所用的昆虫材料不同，家蚕虫草难度更大。4、中国专利技术专利申请200910049298. 4公开了以幼虫为寄主人工培育的活体虫草及其培育方法。采用大麦虫幼为寄主的蛹虫草子实体培育方法，通过蛹虫草菌的分离，培养大麦虫的养殖，喂养虫草菌液，在一定温度下，使其虫体僵化，并在其头部长出虫草子实体。以上4专利是用大麦虫、幼虫与本专利用家蚕幼虫是不同科目，所以有本质的不同。5、食用菌2007 (1)《活虫体人工培养泰山蛹虫草技术试验》文章，“蛹虫菌采用泰安农科院在泰山采得野生虫草，分离纯化，人工复壮，对不同桑蚕幼虫3-5龄幼虫、蛹，采用活虫体喷菌液，桑叶喷菌液，菌液注射、活体扎孔等6种接种方法，不同虫龄幼虫接种感染效果，由表2可知，4龄幼虫利用喷菌液和带桑叶喂食都能感菌且感染率较5龄虫高，但虫体感菌后迅速缩小，无利用价值，注射活体扎孔接种后，4龄5龄蚕都能感菌，但感染率都低于 50%，无开发价值，活虫体灭菌接种能达到100%的感染率，但形成的子实体短，“全草”利用， 外观商品性差。”上述5文章中家蚕幼虫体内都没有形成僵化，所以感染后迅速缩小，无开发利用价值。灭菌的幼虫也没有形成体内僵化，形成子实体短，以上文章所述实验不能算家蚕幼虫虫草感染虫草菌稼接成功，本专利技术的家蚕幼虫被虫草菌感染后，形成体内僵化，虫体整齐饱满。头部子实体2cm以上，是真正的家蚕幼虫虫草。6、中国专利技术专利200810013831. 7用原产于青藏高原的野生天然“冬虫夏草菌株” 孢子接种到有机活体蚕蛹上人工培育而成蚕蛹虫草。上诉6培育蚕蛹虫草是用的青藏高原“冬虫夏草菌株”与本专利所用“蛹虫草菌株”产于东北，两种菌珠不同，菌株产地不同，所以有本质区别。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种。为了达到上述目的，本专利技术提供了一种以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体的培育方法，其特征在于，具体步骤为第一步将蛹虫草子实体消毒、清洗后，切成段后接种于固体培养基中于18°C 25°C 培养10 20天得到菌块；将所得的菌块接种至一级液体菌种培养基中培养于18°C 25°C 培养4 7天得到一级液体菌种；第二步将第一步所得的一级液体菌种按体积比1 :5 20用无菌水稀释得到一级液体菌种稀释液；将珍珠岩和轾石按重量比1 :0. 5 1. 5混合，灭菌后与上述的一级液体菌种稀释液混合，得到虫草混合培养土 ；第三步将4 5龄家蚕幼虫用酒精擦虫体后，用一次性针筒吸入第二步所得的一级液体菌种，注射到家蚕体内；将接种后的家蚕幼虫插进第二步所得的虫草混合培养土中，幼虫头部朝上，露出0. 5 1. 5厘米，在温度为18°C 、湿度为70% 90%、每天光照不少于 10小时的条件下培养50 60天后采收，得到以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体。优选地，所述第一步中的固体培养基由马铃薯过滤液、琼脂、葡萄糖、蛋白胨、 KH2PO4^MgSO4 · TH2O^VB1 和无菌水按比例 200ml :20g :20g :10g :3g :2g :0. Ig :1000ml 混合， 121°C灭菌20 50分钟得到。优选地，所述第一步中的一级液体菌种培养基由马铃薯过滤液、琼脂、葡萄糖、蛋白胨、KH2P04、MgSO4 .7H2CKVB1 和无菌水按比例 200ml :0. Ig :20g :10g :3g :2g :0. Ig :1000ml 混合，121°C灭菌20 50分钟得到。本专利技术还提供了采用上述培育方法培育得到的以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体，其特征在于，其长度大于2cm以上。优选地，所述的以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体中包含腺苷0. 07 0. 09wt%, 多糖8 9. 8wt%。与现有技术相比，本专利技术的优点是1、本专利技术采用了珍珠岩和轾石构成虫草混合培养土基质，其具有透气、松软、保湿等优点，能够模拟大自然外部环境，利于虫草生长，所述的混合培养土中添加有菌种稀释液，有利于虫草的培养；2、本专利技术采用了家蚕幼虫，其无毒，可入药，营养成分高；3、本专利技术的家蚕幼虫被虫草菌感染后，形成体内僵化，虫体整齐饱满，头部子实体长度2cm以上，有效成分含量高。附图说明图1为以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体示意图。具体实施方式下面结合实施例来具体说明本专利技术。 实施例一种以家蚕幼虫为寄主的蛹虫草子实体的培育方法，具体步骤为(1)将上海农科院自主培养的蛹虫草(Cordyc印Smilitaris (La. :Fr)Link)子实体用75voW)的酒精消毒、用灭菌水冲洗后，切成小段后，接种于固体培养基中于20°C培养15 天得到菌块；所述固体培养基由马铃薯过滤液200ml、琼脂20g、葡萄糖20g、蛋白胨10g、 KH2P043g、MgSO4 · 7H20 2g、VB1O. Ig 和 1000ml 无菌水混合，121°C灭菌 30 分钟得到，所述的马铃薯过滤液的制备方法为将200g马铃薯切成小块，加入无菌水IOOOmL,烧开30分， 用纱布过滤后备用；将长势好、转势快的菌块接种至一级液体菌种培养基中培养于20°C培养5天得到一级液体菌种；所述的一级液体菌种培养基由马铃薯过滤液200ml、琼脂0. lg、 葡萄糖 20g、蛋白胨 10g、KH2P043g、MgSO4 · 7H20 2g、VB1O. Ig 和 1000ml 无菌水混合，121 °C 灭菌30分钟得到，所述的马铃薯过滤液的制备方法为将200g马铃薯切成小块，加入无菌水 IOOOmL,烧开30分，用纱布过滤后备用；(2)将第一步所得的一级液体菌种按体积比1:10用无菌水稀释得到一级液体菌种稀释液；将珍珠岩和轾石按重量比1 :1混合，灭菌后与上述的一级液体菌种稀释液混合，得到虫草混合培养土，装在一次性塑料杯内备用；(3 )将4 5龄家蚕幼虫用75vd%酒精擦虫体后，用25ml —次性针筒吸入一级液体菌种，注射到家蚕(鳞翅目，蚕蛾科，Bombyxmori Linaeus)体内；将接种后的家蚕幼虫插进第二步所得的虫草混合培养土中，幼虫头部朝上，露本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐正华，沈金德，沈娟丽，徐窕，
申请(专利权)人：桐乡市中泰虫草专业合作社，
类型：发明
国别省市：