一种从万寿菊残渣中提取黄酮类化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种从万寿菊残渣中提取黄酮类化合物的方法。该方法包括如下步骤：(1)用丙酮水溶液对所述万寿菊残渣进行提取得粗提液；(2)将所述粗提液进行浓缩得浓缩液；所述浓缩液经冷却得粗提物；(3)所述粗提物经正己烷洗脱得到除脂溶性杂质的粗提物；所述除脂溶性杂质的粗提物经磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液洗脱即得产品。本发明专利技术以万寿菊残渣为原料，将原料粉碎过筛，经有机溶剂水溶液快速、有效提取黄酮类物质，经过浓缩、沉淀、干燥、提纯得到黄酮类化合物含量90g?RE/100g以上黄色状物质；本发明专利技术提供的方法的工艺参数合理，工艺路线简单，操作简单安全，收率高，设备和生产成本低，具有较大的实用价值和社会经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。技术背景万寿菊是我国主要栽培的草本盆花之一，且广泛用于室内外环境布置。随着营养健康产业发展，国际上对万寿菊的需求量越来越多。万寿菊不但具有观赏价值外，而且还有很好的药用价值，其起药理作用的主要成分是黄酮类物质、类胡萝卜素类、萜类及精油等成分。万寿菊以及其同属植物中含有槲皮素、山萘酚、杨梅素等常见的黄酮，更多的黄酮是以苷的形式存在，如万寿菊苷、槲皮万寿菊苷、山萘酚苷。黄酮类物质具有清除自由基的抗氧化活性，较强的抗肿瘤作用，抗癌作用，降血脂、降血糖、预防心脑血管等疾病的作用，在食品、化妆品、保健品和医药等行业有广泛应用。万寿菊残渣是万寿菊加工生产油树脂的副产物，其含有丰富的活性功能成分尤其是黄酮类物质，除了提取万寿菊中的叶黄素外，每年都有大量的万寿菊残渣被当成工业下脚料丢弃，或作为饲料使用。这对环境造成一定的影响， 而且还造成很大的资源浪费。因此，对万寿菊残渣中的黄酮类物质进行提取纯化，有利于万寿菊资源的综合利用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。本专利技术提供的，包括如下步骤(1)用丙酮水溶液对所述万寿菊残渣进行提取得粗提液；(2)将所述粗提液进行浓缩得浓缩液；所述浓缩液经冷却得粗提物；(3)所述粗提物经正己烷洗脱得到除脂溶性物质的粗提物；所述除脂溶性物质的粗提物经磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液洗脱即得产品。上述的方法中，所述万寿菊残渣可为经超临界二氧化碳萃取后的残渣；所述万寿菊残渣的粒度可为20目 80目，具体为20目、30目、40目或60目；所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液的PH值可为2. 2 6，具体可为2. 2、4或5。上述的方法中，步骤(1)中所述丙酮水溶液中丙酮的质量百分含量可为20% 95%，具体可为40^^50^^60%或70% ；所述万寿菊残渣与所述丙酮水溶液的配比可为 每Ig所述万寿菊残渣需(9 35)ml所述丙酮水溶液，如每Ig所述万寿菊残渣需10ml、20ml 或30ml所述丙酮水溶液。上述的方法中，步骤(1)中所述提取可在恒温水浴摇床中进行，所述提取的温度可为20°C 70°C，具体可为40 V、50°C或60 V，所述提取的时间可为20min 120min，具体可为 40min、60min、80min 或 120min。上述的方法中，步骤O)中所述提取液与所述浓缩液的体积份数比可为G 8) 1，具体可为5 1 ；所述冷却的温度可为0°C 20°C，如4°C，所述冷却的时间可为 IOmin 180min，如120min ；所述冷却后所述方法还可包括离心处理、冷冻干燥或真空干燥的步骤。上述的方法中，步骤(3)中，所述粗提物与正己烷的配比可为每Ig所述粗提物需 (9 35) ml正己烷，如每Ig所述粗提物需9ml、12ml或15ml所述正己烷；所述除脂溶性物质的粗提物与磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液的配比可为每Ig所述除脂溶性物质的粗提物需(9 35)ml所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，如每Ig所述除脂溶性物质的粗提物需 9ml、12ml或15ml所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液。上述的方法中，步骤C3)中，所述正己烷洗脱和磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液洗脱均可在恒温水浴摇床中进行；所述正己烷洗脱和磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液洗脱的次数均可为1 5，具体可为1、3或5。上述的方法中，步骤(3)中，所述正己烷洗脱的温度可为20°C 60°C，具体可为 40°C、50°C或60°C，所述洗脱的时间可为20min 70min，具体可为30min、40min或50min。上述的方法中，步骤(3)中，所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液洗脱的温度可为 30 V 90°C，具体可为40V、50°C或60V，所述洗脱的时间可为20min 90min，具体可为 30min、40min 或 50mino本专利技术提供的方法提取的黄酮类化合物可为芦丁。本专利技术以万寿菊残渣为原料，将原料粉碎过筛，经有机溶剂水溶液快速、有效提取黄酮类物质，经过浓缩、沉淀、干燥、提纯得到黄酮类化合物含量90g RE/100g以上黄色状物质；本专利技术提供的方法的工艺参数合理，工艺路线简单，操作简单安全，收率高，设备和生产成本低，具有较大的实用价值和社会经济效益；因此，本专利技术的以万寿菊残渣为原料提取纯化黄酮类化合物的方法具有很强的实用性特点，适宜推广应用。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中所用的万寿菊残渣均为经过超临界二氧化碳萃取后的残渣。下述实施例中黄酮类化合物的含量测定的具体方法为取适当浓度的样品 0. 5mL，加入15mL刻度试管中，用去离子水补充至4mL，加入0. 3mL 5% (w/v)的亚硝酸钠水溶液摇勻，5min后加入3mL 1% (w/v)氯化铝水溶液摇勻，6min后加入2mL的lmol/L的氢氧化钠水溶液，再加去离子水至10mL，IOmin后510nm处测定吸光值；空白对照以去离子水代替样品进行反应；黄酮类化合物的含量以芦丁当量(Rutin Equivalent, RE/g干基)表7J\ ο标准溶液的配制精确称取芦丁标品0. 075g，至于25mL的容量瓶中，用甲醇将其定容至刻度。然后用移液管分别移取5mL、4mL、3mL、2mL和ImL于IOmL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到浓度分别为1. 5,1. 2,0. 9、0. 6和0. :3mg/mL的溶液，按照上述方法进行测定， 在510nm处有最大吸收，得到510nm处的吸光度值与芦丁标品的浓度之间的标准曲线。将实施例1 4得到的提取物按照上述方法进行测定，依据得到的标准曲线即可得到提取物中黄酮类化合物的含量。实施例1、黄酮类化合物的提取(1)准备好万寿菊残渣原料，并将其粉碎过20目筛；(2)将IOOg混合粒径的万寿菊残渣按照质量体积比为1 10(g/ml)加入至丙酮的质量百分含量为40%的丙酮水溶液中，在40°C下恒温水浴摇床中(lOOr/min)提取 40min，抽滤得到黄酮类物质的粗提液；(3)将粗提液浓缩5倍得浓缩液；将浓缩液于4°C静置冷却2h，去掉上清液，干燥得到粗提物6. 27g ；(4)重复上述步骤制取30g粗提物，按照质量体积比为1 9(g/ml)加入至正己烷中，在40°C下恒温水浴摇床中(100r/min)30min洗脱1次，得到除去脂溶性物质的粗提物 29. 04g ；(5)将得到的除去脂溶性物质的粗提物按照质量体积比为1 9(g/ml)加入至pH 值为2. 2的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中，在40°C下恒温水浴摇床中(lOOr/min) 30min 洗脱1次，干燥精制得到24. 06g，含量为84. 15g RE/100g的黄酮类化合物。实施例2、黄酮类化合物的提取(1)准备好万寿菊残渣原料，并将其粉碎过40目筛；(2)将IOOg混合粒径的万寿菊残渣按照质量体积比为1 20(g/ml)加入至丙酮的质量百分含量为60%的丙酮水溶液中，在50°C下恒温水浴摇床中(lOOr/min)提取 80min，抽滤得到黄酮类物质的粗提液；(3)将粗提液浓缩5倍得浓缩液；将浓缩液于4°C静置冷却2h，去掉上清液，干燥得到粗提物7. 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高彦祥，蒋俊平，袁芳，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：