一种齐墩果酸三糖皂苷类成分的制备工艺制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，提供了齐墩果酸皂苷类成分3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，主要是通过溶剂提取法、碱水解法、大孔树脂吸附法、小孔树脂吸附法、ODS反向硅胶、动态轴向柱色谱法等任意一种方法，或这些方法的任意组合制备获得。本发明专利技术的齐墩果酸三糖皂苷类成分含量高达95％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药、兽药
，涉及西南银莲花中的一种齐墩果酸皂苷类成分3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法。该类成分可以通过溶剂提取法、碱水解法、大孔树脂吸附法、小孔树脂吸附法、ODS反向硅胶、动态轴向柱色谱法等任意一种方法，或这些方法的任意组合制备获得。所制得的齐墩果酸三糖皂苷类成分含量高达95 %以上。
技术介绍
西南银莲花(Anemone davidii Franch)，又名铜钱草(湖北)、铜骨七(四川) 和钻骨风(贵州)，来源于毛茛科银莲花属西南银莲花的干燥根状茎，生长于海拔950 3500m的山地中，分布于西南及湖北西部和湖南西北部。具有活血止痛、祛瘀消肿和补肾之功效，可用于治疗跌打损伤、风湿痛、劳伤、阳痿和腰痛。现代药理研究表明西南银莲花具有祛风湿、消痈肿、抗癌、抗肿瘤、抗菌等多种功效。该植物富含五环三萜皂苷，尤以齐墩果酸糖苷和常春藤配基糖苷为主，在体外可以明显抑制肺癌、结肠癌、卵巢癌、乳腺癌、肾癌、前列腺癌、黑素瘤以及白血病等癌细胞的生长。
技术实现思路
本专利技术利用现代分离技术及鉴定手段对西南银莲花进行系统的化学成分分离， 从中分离得到一种齐墩果酸皂苷类成分3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -a_L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷，通过与西南银莲花的水提物和醇提物成分比较分析发现，碱水解后产物中3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的含量较水解前大大提高。西南银莲花药材资源丰富，3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -α-L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备工艺简单易行，适合工业化大量生产，具有广阔的市场前景和开发价值。本专利技术的具体技术方案如下1,3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法，包括以下步骤第一步，将西南银莲花药材粉碎成粗粉，用水或0. 1-95%乙醇浸泡0.5-池，6_12 倍量加热回流提取2-3次，每次l-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至 0. 5-1. Og生药材/mL，无醇味，0-4°C冷藏过夜，析胶，滤过，即得西南银莲花提取物。第二步，西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13，加热沸腾4-10小时，每30-60分钟测PH，保持在PH10-13，放冷，加盐酸溶液，调PH3-7，离心，去沉淀， 即得西南银莲花提取物水解液。第三步，西南银莲花提取物水解液，经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附，依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱，收集50-80%乙醇洗脱部分，蒸干，用水溶解后经过小孔树脂吸附，收集甲醇-水6 4洗脱部分，即得XNY58组分。第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱，用甲醇和水(6 4-9 1)的混合液进行梯度洗脱，梯度洗脱液依次有五组，其体积配比分别为第一组甲醇6份水4份； 第二组甲醇7份水3份；第三组甲醇8份水2份；第四组甲醇85份水15份；第五组甲醇9份水1份；第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分，经kphadex LH-20柱甲醇-水 7 3洗脱，经ODS动态轴向色谱柱制备，甲醇-水8 2洗脱得到化合物I，经对照品比较及LC/MS/MS测试，该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) _α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷，用高效液相色谱法测定化合物I含量。液相条件为乙腈0. 1 %磷酸水=45 55，检测波长为203nm，柱温25 V，色谱柱C0SM0SIL4. 6^50mm。本专利技术所述的齐墩果酸皂苷类成分是单一成分的化合物，其化学名称为3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷。附图说明图1是3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -α-L-口比喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的分子结构式；图2是3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -a-L-口比喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的HPLC分析图；图3是3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -a-L-口比喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的核磁共振氢谱图； 图4是3-0- a -L-吡喃鼠李糖_ (1 — 2) - a -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的核磁共振碳谱具体实施例3-0- a -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) - a -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷的制备方法为实施案例1第一步，将西南银莲花药材粉碎成粗粉，用水浸泡0.5-池，6-12倍量加热回流提取2-3次，每次l-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/ mL, 0-4°C冷藏过夜，析胶，滤过，即得西南银莲花提取物。第二步，西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13，加热沸腾4-10小时，每30-60分钟测PH,保持在PH10-13,放冷，加盐酸溶液，调PH3-7,离心，去沉淀，即得西南银莲花提取物水解液。第三步，西南银莲花提取物水解液，经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附，依5次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱，收集50-80%乙醇洗脱部分，蒸干，用水溶解后经过小孔树脂吸附，收集甲醇-水6 4洗脱部分，即得XNY58组分。第四步、西南银莲花XNY58组分经ODS反相硅胶柱，用甲醇和水(6 4-9 1)的混合液进行梯度洗脱，梯度洗脱液依次有五组，其体积配比分别为第一组甲醇6份水4份；第二组甲醇7份水3份；第三组甲醇8份水2份； 第四组甲醇85份水15份；第五组甲醇9份水1份；第五步、收集甲醇85份水15份的洗脱部分，经kphadex LH-20柱甲醇-水 7 3洗脱，经ODS动态轴向色谱柱制备，甲醇-水8 2洗脱，得到化合物I，经对照品比较及LC/MS/MS测试，该化合物为3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) -α -L-吡喃阿拉伯糖齐墩果酸皂苷，高效液相色谱法测定含量为96%。实施案例2第一步，将西南银莲花药材粉碎成粗粉，用10%乙醇浸泡0.5-池，6_12倍量加热回流提取2-3次，每次l-3h，过滤，合并滤液。上述滤液于50-70°C减压浓缩至0. 5-1. Og生药材/mL，无醇味，0-4°C冷藏过夜，析胶，滤过，即得西南银莲花提取物。第二步，西南银莲花提取物水溶液中加入氢氧化钠溶液调到PH10-13，加热沸腾 4-10小时，每30-60分钟测PH，保持在PH10-13，放冷，加盐酸溶液，调PH3-7，离心，去沉淀， 即得西南银莲花提取物水解液。第三步，西南银莲花提取物水解液，经过DlOl或AB-8或ADS-17大孔树脂吸附，依次用水、30-40%乙醇、50-80%乙醇、95%乙醇洗脱，收集50-80%乙醇洗脱部分，蒸干，用水溶解后经过小孔树脂吸附，收集甲醇-水6 4洗脱部分，即得XNY58组分。第四步、XNY58组分经ODS反相硅胶柱，用甲醇和水(6 4-9 1)的混合液进行梯度洗脱，梯度洗脱液依次有五组，其体积配比分别为第一组甲醇6份水4份；第二组甲醇7份水3份； 第三组甲醇8份水2份；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨世林，范玫玫，许琼明，冯育林，刘艳丽，陈兰英，刘江云，李俊，
申请(专利权)人：江西本草天工科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：