十二卷类多肉植物的离体培养方法技术

本发明专利技术提供了一种十二卷类多肉植物的离体培养方法，其特征在于，步骤为：第一步：外植体的选择与消毒；第二步：无菌系的建立；第三步：无菌系丛生芽的继代增殖；第四步：生根培养；第五步：试管苗炼苗培养。本发明专利技术利用组织培养技术对十二卷属植物进行工厂化快速繁殖，具有用料少，繁殖快以及提纯复壮脱病毒等优点，可加快繁殖种苗速度，周年生产出优质种苗，对该品名花卉的开发生产具有积极意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种百合科十二卷属性植物的组织培养快速繁殖方法。
技术介绍
十二卷属植物(学名HaworthiafasciataHaw)又名锦鸡尾，为百合科十二卷属，原产非洲南部地区，世界各地广泛栽培，在我国干燥的沙漠地带亦有野生种类(耐寒性)分布。 喜温暖干燥和阳光充足的环境，怕低温和阴暗潮湿，生长适期3-10月，最适温度15-25度， 最高可忍受35-40度的高温。对土壤要求不严，但以疏松肥沃的沙壤土为宜。该类植物在世界上有150个种，多年生肉质草本，无茎，叶片肉质厚实，其叶片上有条纹，名贵品种上分布有红色、白色、金黄色条纹，非常美丽，是不可多得的观赏植物，作盆栽观赏，在居室、阳台、办公桌上摆放呈现清新高雅之态。目前在日本、美国、以色列等非常盛行，我国上海、北京、广州等大城市从国外进口种苗或直接进口商品盆花，价格昂贵，售价从数十元至上万元不等。但此植物繁殖主要靠分株，每年繁殖量仅3-5株，名贵品种更少，故制约了应用推广，造成种苗奇缺，供不应求，名贵种苗或商品盆花价格高昂，普通百姓很难消费。有关十二卷属植物的生产国内有些零星报道，但未见利用花枝嫩茎段离体培养及规模化生产的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种十二卷属植物的组织培养快速繁殖方法，以花枝嫩茎段为外植体，直接诱导无菌芽培育成试管苗。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案是提供了一种，其特征在于，步骤为第一步外植体的选择与消毒在春夏季节，选取十二卷多肉植物刚抽生的呈半木质化的花枝，自基部整枝剪下，清洗干净后，消毒；第二步无菌系的建立将消毒过的花枝切成0. 5-1. 5厘米的茎段，接种于发生培养基上，进行初始诱导培养； 第三步无菌系丛生芽的继代增殖将初始培养获得的无菌芽切下，接种于第二培养基进行增殖，待在基部叶腋间分化出腋芽后，该腋芽即为丛生芽，继续切割后不断增殖； 第四步生根培养将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基进行生根培养，在基部分分化出不定根后，试管苗培育成功；第五步试管苗炼苗培养将生根的十二卷试管苗在苗床上作炼苗培养。优选地，第一步中所述清洗的步骤为用洗洁精将剪下的花枝清洗两遍，用纱布包4裹后用水冲洗3小时后浙干。优选地，第一步中所述消毒在无菌室超净台上进行，其步骤为先用质量百分比浓度为75%乙醇的对清洗后的花枝处理60秒，然后用与水的质量比为1:50的洁尔敏溶液处理15分钟，最后用质量百分比浓度为0. 1%的氯化汞溶液处理15分钟，用无菌水冲洗三遍。优选地，第二步中所述发生培养基及第三步中所述第二培养基的成份相同，为加入了 0. 5-2. Omg/L的6-氨基腺嘌呤、0. 005-0. 2mg/L的荼乙酸、0. 05-0. lmg/L的赤霉素、质量百分比为3%的蔗糖及5. 5g/L琼脂粉的MS培养基。优选地，第二步中所述初始诱导培养、第三步中所述增殖及第四步中所述生根培养的培养温度为25度，光照强度为3000LX，光照时间为12小时/天。优选地，第三步中所述第三培养为加入了 0. 1-0. 2mg/L的荼乙酸、0. 05-0. lmg/L 的吲哚丁酸、质量百分比为1的蔗糖及5. 5g/L琼脂粉的1/2MS培养基。优选地，第五步中所述炼苗培养的培养基质为泥炭和珍珠岩，泥炭与珍珠岩之间的质量比为1:1，其具体步骤为将幼苗载入培养基质后浇足活棵水，用尼龙薄膜覆盖防止幼苗失水萎焉，3天后揭去尼龙薄膜逐步炼苗。优选地，所述逐步炼苗的步骤为在前7天内，每天叶面喷水2-3次，7天后早晚各喷一次，15天后用质量百分比浓度为0. 1%的硝酸铵加质量百分比浓度为0. 1%的磷酸二氢钾追肥，叶面及根际施肥同时进行，15天后根据基枝含水量适当浇水，保持不干不浇，浇则浇透，3个月后，试管苗可以移栽至各种容器内作盆栽培育。本专利技术利用组织培养技术对十二卷属植物进行工厂化快速繁殖，具有用料少，繁殖快以及提纯复壮脱病毒等优点，可加快繁殖种苗速度，周年生产出优质种苗，对该品名花卉的开发生产具有积极意义。具体实施例方式为使本专利技术更明显易懂，兹以优选实施例作详细说明如下。实施例1本专利技术提供了一种，其步骤为 第一步外植体的选择与消毒在春夏季节，选取十二卷多肉植物刚抽生的呈半木质化的花枝，自基部整枝剪下，用洗洁精清洗两遍，用纱布包裹后置于自来水龙头下冲洗3小时后浙干。在无菌室超净台上消毒，先用质量百分比浓度为75%的乙醇处理60秒，然后用与水的质量比为1 50的洁尔敏溶液处理15分钟，最后用质量百分比浓度为0. 1%的氯化汞处理15分钟，用无菌水冲洗三遍。第二步无菌系的建立在超净台上将消毒过的花枝切成1厘米左右的茎段，接种于发生培养基上，进行初始诱导培养。培养基为加入了 0. 5mg/L的6-氨基腺嘌呤(英文简称为6-BA)、0. 005mg/L荼乙酸(英文简称为NAA)、0. 05mg/L的赤霉素(英文简称为GA)、质量百分比为3%的蔗糖及 5. 5g/L琼脂粉的MS培养基，PH值为5. 8，培养温度为25度(M小时恒温)，光照强度为 3000LX，光照时间为12小时/天； 第三步无菌系丛生芽的继代增殖将初始培养获得的无菌芽切下，接种于第二培养基，30天后在基部叶腋间分化出腋芽(丛生芽)，继续切割后不断增殖，以后每30天增殖一次，增值率为1:2. 5-3。第二培养基为加入了 0. 5mg/L 的 6-BA、0. 05mg/L 的 GA、0. 005mg/L 的 NAA、质量百分比为 3% 的蔗糖及 5. 5g/ L的琼脂粉的MS培养基，PH值为5. 8，培养温度为25度，光照强度为3000LX，光照时间为12小时/天。第四步生根培养将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基，越3-4周后在基部分分化出不定根，试管苗培育成功。第三培养基为加入了 0. lmg/L的NAA、0. 05mg/L的吲哚丁酸(英文简称为IBA)、质量百分比为21的蔗糖、5. 5g/L的琼脂粉的1/2MS培养基，PH值为5. 8，培养温度为25度， 光照强度为3000LX，光照时间为12小时/天。第五步试管苗炼苗培养将生根的十二卷试管苗在苗床上作炼苗培养。培养基质为泥炭和珍珠岩，泥炭和珍珠岩之间的质量比为1:1，将幼苗载入后浇足活棵水，用尼龙薄膜覆盖防止幼苗失水萎焉，3 天后揭去尼龙薄膜逐步炼苗。前7天内，每天叶面喷水2-3次，7天后早晚各喷一次，15天后用质量百分比浓度为0. 1%的硝酸铵加质量百分比浓度为0. 1%的磷酸二氢钾追肥(叶面及根际施肥同时进行)。15天后可根据基枝含水量适当浇水，保持不干不浇，浇则浇透。3 个月后，试管苗可以移栽至各种容器内作盆栽培育。实施例2本专利技术提供了一种，其步骤为 第一步外植体的选择与消毒在春夏季节，选取十二卷多肉植物刚抽生的呈半木质化的花枝，自基部整枝剪下，用洗洁精清洗两遍，用纱布包裹后置于自来水龙头下冲洗3小时后浙干。在无菌室超净台上消毒，先用质量百分比浓度为75%的乙醇处理60秒，然后用与水的质量比为1 50的洁尔敏溶液处理15分钟，最后用质量百分比浓度为0. 1%的氯化汞处理15分钟，用无菌水冲洗三遍。第二步无菌系的建立在超净台上将消毒过的花枝切成1厘米左右的茎段，接种于发生培养基上，进行初始诱导培养。培养基为加入了 2. Omg/L的6-BA、0. 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姚德彪，顾建平，
申请(专利权)人：上海旭东园艺有限公司，
类型：发明
国别省市：