本发明专利技术公开了一种空柄牛肝素A的制备方法，方法是采用超临界CO2萃取和高速逆流色谱分离技术相结合，从空柄假牛肝中提取分离高纯度空柄牛肝素A。其制备方法为：将干燥空柄假牛肝粉碎，置于萃取釜中，加入夹带剂，进行超临界CO2萃取，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得空柄牛肝素A。本发明专利技术方法是一种环保、低耗能、快速有效的制备方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然药物提取
，涉及一种空柄牛肝素A的制备方法。
技术介绍
空柄牛肝素A (Cavipetin A)，分子式C3(1H4208，分子量530. 66，是二萜类化合物， mp. 137-138 。现代药理研究表明，空柄牛肝素A具有较强的抗真菌活性。空柄牛肝素A 来源于空柄假牛肝菌。空柄假牛肝菌，又名杂蘑，为真菌类担子菌纲伞菌目牛肝菌科空柄假牛肝 Boletinus cavipes (Opat. ) Kalchbr.，以子实体入药，微咸，性温，具有祛风散寒；舒筋活络的功效，主治风寒湿痹、腰腿疼痛、手足麻木等，主要活性成分为二萜酯类化合物。现有文献中，尚无大量空柄牛肝素A的制备方法报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种大量制备高纯度空柄牛肝素A的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采用下列技术方案以空柄假牛肝为原料，粉碎至20-60目，置于萃取釜中，加入夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2-5%，进行超临界(X)2萃取，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解， 过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得空柄牛肝素A。所述夹带剂为95%乙醇溶液。所述超临界(X)2萃取条件为萃取温度为40-60°C，萃取压力为^_40MPa，分离釜温度为30-45°C，压力为4-8MPa，CO2流量为2-%il/g生药/min，萃取时间为50_100min。所述溶剂系统体积比为(10-13):(22-25) :(25-27) (8-10)。下面将结合具体实施方式对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施例。具体实施例方式实施例1以空柄假牛肝为原料，粉碎至60目，取Ikg置于萃取釜中，加入95%乙醇溶液作为夹带剂，进行超临界(X)2萃取，萃取温度为60°C，萃取压力为40MPa，分离釜温度为45°C，压力为8MPa，CO2流量为％il/g生药/min，萃取时间为50min，收集萃取物，加入乙酸乙酯， 搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以体积比(12) :(25) :(26) (9)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为850rpm， 流速2ml/min，收集空柄牛肝素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得空柄牛肝素A128mg，经HPLC 检测，其含量为98. 8%。实施例23以空柄假牛肝为原料，粉碎至60目，取Ikg置于萃取釜中，加入95%乙醇溶液作为夹带剂，进行超临界CO2萃取，萃取温度为40°C，萃取压力为^MPa,分离釜温度为30°C，压力为 4MPa, CO2流量为2ml/g生药/min，萃取时间为lOOmin，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以体积比(11) :( ) :(25) (9)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为750rpm，流速 2. 5ml/min,收集空柄牛肝素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得空柄牛肝素A149mg，经HPLC检测，其含量为98. 1%。实施例3以空柄假牛肝为原料，粉碎至20目，取3kg置于萃取釜中，加入95%乙醇溶液作为夹带剂，进行超临界CO2萃取，萃取温度为50°C，萃取压力为30MPa，分离釜温度为35°C，压力为 6MPa, CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为80min，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以体积比(13) :(25) :(27) :(10)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为850rpm，流速 2ml/min,收集空柄牛肝素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得空柄牛肝素A445mg，经HPLC检测， 其含量为98. 3%。实施例4以空柄假牛肝为原料，粉碎至40目，取5kg置于萃取釜中，加入95%乙醇溶液作为夹带剂，进行超临界(X)2萃取，萃取温度为45°C，萃取压力为30MPa，分离釜温度为35°C，压力为5MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为70min，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以体积比(10) :(22) :(25): (8)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为800rpm，流速 2. 5ml/min,收集空柄牛肝素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得空柄牛肝素A631mg，经HPLC检测，其含量为98. 5%。实施例5以空柄假牛肝为原料，粉碎至20目，取IOkg置于萃取釜中，加入95%乙醇溶液作为夹带剂，进行超临界CO2萃取，萃取温度为50°C，萃取压力为35MPa，分离釜温度为35°C，压力为6MPa，CO2流量为3ml/g生药/min，萃取时间为60min，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以体积比(13) :(25) :(27): (8)正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为800rpm，流速 2ml/min,收集空柄牛肝素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得空柄牛肝素Al. 62g，经HPLC检测， 其含量为98. 0%。权利要求1.一种空柄牛肝素A的制备方法，其特征在于以空柄假牛肝为原料，粉碎至20-60 目，置于萃取釜中，加入夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2-5%，进行超临界CO2 萃取，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集流分减压浓缩， 冷冻干燥即得空柄牛肝素A。2.如权利要求1所述一种空柄牛肝素A的制备方法，其特征在于所述夹带剂为95%乙醇溶液。3.如权利要求1所述一种空柄牛肝素A的制备方法，其特征在于所述超临界(X)2萃取条件为萃取温度为40-60°C，萃取压力为^_40MPa，分离釜温度为30_45°C，压力为4_8MPa， CO2流量为2-%il/g生药/min，萃取时间为50_100min。4.如权利要求1所述一种空柄牛肝素A的制备方法，其特征在于所述溶剂系统体积比为(10-13):(22-25):(25-27):(8_10)。全文摘要本专利技术公开了一种空柄牛肝素A的制备方法，方法是采用超临界CO2萃取和高速逆流色谱分离技术相结合，从空柄假牛肝中提取分离高纯度空柄牛肝素A。其制备方法为将干燥空柄假牛肝粉碎，置于萃取釜中，加入夹带剂，进行超临界CO2萃取，收集萃取物，加入乙酸乙酯，搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩，注入高速逆流色谱仪，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得空柄牛肝素A。本专利技术方法是一种环保、低耗能、快速有效的制备方法。文档编号C07C69/732GK102503827SQ20111030371公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日专利技术者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，万冬梅，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。