【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及,其更具体地说涉及糖基化结构的生产,所述结构耐受酶促降解,因而调节其一个或多个生物特性或整合它们的治疗部分的生物特性。更具体地说,本专利技术涉及使活化的含氟糖底物(例如,3-氟唾液酸化合物)与糖接受体 (sugar acceptor)反应以产生糖接受体与一种或多种所述唾液酸化合物的共价缀合物。
技术介绍
多数天然多肽含有糖部分,所述部分在一级多肽链的一些氨基酸残基处共价连接至所述多肽。在本领域中,这些多肽一般称为糖肽或糖蛋白。还已知,当多肽存在于生物系统(例如,细胞或个体)时,任何给定多肽上的糖基化模式的性质可影响其特性,所述特性包括蛋白酶抗性、细胞内运输、分泌、组织靶向、生物半衰期和抗原性。多肽的糖基化是翻译后修饰的天然形式,其改变多肽的结构和功能。在自然界中, 通过酶促的过程引入糖基化,导致不同类型糖基化多肽的位点特异性修饰。在N-连接的糖基化中,聚糖被连接至天冬酰胺侧链的酰胺氮,而在0-连接的糖基化中,聚糖连接至丝氨酸和苏氨酸侧链的羟基氧。其他形式的糖基化包括糖胺聚糖(其连接至丝氨酸的羟基氧)、 糖脂(其中聚糖连接至神经酰胺)、透明质烷(其不连接至蛋白或脂质)和GPI锚(其通过聚糖连接将蛋白连接至脂质)。本领域中的普遍问题是糖基化通常加至真核细胞中的多肽,但很少加至经常用于治疗性多肽重组表达的原核宿主中所表达的多肽。原核宿主中产生的多肽中糖基化的缺乏可导致所述多肽被识别为外源物,或者意味着其具有其他不同于其天然形式的特性。还有一个问题是,在试图在没有天然糖基化的位置将糖基化改造进入多肽来调节肽特征时,发现其非常困难。因此,例如在多肽的 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.06.16 US 61/187,4341.一种方法,其包括在糖接受体和3-氟唾液酸化合物之间形成共价缀合物,所述方法包括将所述糖接受体和3-氟唾液酸化合物相接触,所述接触步骤在适于使所述3-氟唾液酸化合物与所述糖接受体反应并共价键合的条件下进行,其中所述3-氟唾液酸化合物不包含胞嘧啶一磷酸(CMP)基团。2.权利要求1的方法,其中所述方法包括将所述糖接受体、所述3-氟唾液酸化合物和能够将所述3-氟唾液酸化合物转移至所述糖接受体的酶相接触,所述接触步骤在适合转移所述3-氟唾液酸化合物并使其共价键合至所述糖接受体的条件下进行。3.权利要求1的方法,其中所述3-氟唾液酸化合物与所述糖接受体的共价键合是通过合成化学反应进行的。4.权利要求1至3中任一项的方法,其中与3-氟唾液酸化合物的共价缀合物的形成调节糖接受体或包含所述糖接受体的治疗性部分的生物特性。5.权利要求4的方法,其中所述生物特性是对酶水解的抵抗、生物稳定性或药代动力学特性。6.前述权利要求中任一项的方法,其中所述方法是体外无细胞方法。7.前述权利要求中任一项的方法,其中所述3-氟唾液酸化合物表示为以下通式(I)8.权利要求7的方法,其中R1是甲磺酸酯/盐、4-甲苯磺酸酯/盐、三氟甲基磺酸酯/ 盐、三氟甲基甲苯磺酸酯/盐、咪唑磺酸酯/盐或卤素(F、Cl.Br, I)。9.前述权利要求中任一项的方法,其中所述转移反应是酶促的,伴有在3-氟唾液酸化合物和糖接受体之间异头连接处的倒转。10.前述权利要求中任一项的方法,其中所述糖接受体是糖基化结构的一部分。11.权利要求10的方法,其中所述糖基化结构包含单触角结构、双触角结构、三触角结构或复合糖基化结构。12.权利要求10或权利要求11的方法,其中所述糖基化结构包含天然的或合成的单糖、寡糖或多糖。13.权利要求10至12中任一项的方法,其中所述糖基化结构包含N连接的或0连接的糖基团。14.权利要求10至13中任一项的方法,其中所述方法还包括从糖基化结构中除去末端糖基基团以形成糖接受体基团。15.权利要求14的方法,其中所述末端糖基基团的除去是通过使用唾液酸酶酶促进行的。16.前述权利要求中任一项的方法,其中所述方法包括将多个3-氟唾液酸化合物转移至糖接受体。17.权利要求16的方法,其中所述多个3-氟唾液酸化合物是作为寡聚体或通过重复所述缀合反应而转移的。18.前述权利要求中任一项的方法,其中所述糖接受体存在于或用于连接至治疗性部分,例如多肽。19.前述权利要求中任一项的方法,其还包括将所述缀合物连接至治疗性部分。20.前述权利要求中任一项的方法,其中所述方法包括将多个3-氟唾液酸基团转移至多肽上存在的糖基化结构的一个或多个末端糖基残基。21.前述权利要求中任一项的方法,其中用于转移所述3-氟唾液酸基团的酶是唾液酸转移酶。22.前述权利要求中任一项的方法,其中用于转移所述3-氟唾液酸基团的酶是转唾液酸酶。23.权...
【专利技术属性】
技术研发人员:安德鲁·格雷厄姆·沃茨,阿曼达·芭芭拉·麦肯齐,特伦斯·坎特纳,
申请(专利权)人:巴斯大学,
类型:发明
国别省市:
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