本发明专利技术属中药领域，提供从白屈菜中制备木兰花碱的方法：(1)提取：取白屈菜，70％乙醇提取，滤过，滤液浓缩，加入乙醇至含乙醇量80％，滤过，滤液回收至无醇味，加水稀释，滤过，弃去不溶物，滤液调节pH为1～3，得备用液Ⅰ；(2)第一次树脂纯化：取备用液Ⅰ，通过大孔树脂色谱柱，用水洗脱后，再以10％乙醇洗脱，收集洗脱液，滤过，滤液调节pH为8～10，得备用液Ⅱ；(3)第二次树脂纯化：取备用液Ⅱ，通过大孔树脂色谱柱，水洗脱至色浅，再以40％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得粗品；(4)精制：取粗品，水溶解，通过C-18填料色谱柱，以水洗脱，水液弃去，再以5％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得木兰花碱。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药领域，涉及。
技术介绍
白屈菜为罄粟科白屈菜属植物白屈菜Chelidonium majus L.的全草。味苦，性凉。 有毒。具有清热解毒，止痛，止咳之功。白屈菜含多种化学成分，可将其分为非生物碱及生物碱两大类。木兰花碱，又称木兰碱(magnoflorine)是其中的一个主要活性成分，为阿朴菲型生物碱，具有抗炎、抗微生物和细胞毒作用。在现有的技术中，对白屈菜的提取方法主要有索氏提取、搅拌萃取、超声波萃取、 超临界萃取、微波辐射技术提取以及醇提取等，采用这些方法主要是用来制备白屈菜的总生物碱，未见有从白屈菜中直接提取制备木兰花碱的报道。在现有技术中，有报道从裂叶星果草、青藤及辛夷中提取制备木兰花碱的方法，但这些木兰花碱的制备方法主要是有机溶剂萃取、反复硅胶柱层析。本专利技术提供了一种不同于现有技术的木兰花碱的制备方法，可以从白屈菜中直接制备得到木兰花碱，而且该方法该操作简便，有机溶剂耗费小，克服了现有技术中有机溶剂耗费量高，硅胶柱层析工艺烦琐、收率低等弊端。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从白屈菜中制备木兰花碱的方法。本专利技术的目的是通过以下方式实现的—种从白屈菜中提取制备木兰花碱的方法，该方法包括以下步骤(1)提取取白屈菜，切断，加入6 15倍量60 80%的乙醇回流提取1 5次， 合并提取液，滤过，滤液减压浓缩，搅拌加入乙醇至含乙醇量为70 90%，静置，滤过，滤液减压回收至无醇味，加水稀释，静置，滤过，弃去不溶物，滤液调节PH为1 3，加水稀释，得备用液I ；(2)第一次树脂纯化取备用液I，通过大孔树脂色谱柱，用水洗脱后，再以10 40%乙醇洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩，滤过，滤液调节pH为8 10，浓缩，得备用液II ；(3)第二次树脂纯化取备用液II，通过大孔树脂色谱柱，水洗脱至色浅，再以 30 50%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得木兰花碱粗品，备用；(4)精制取木兰花碱粗品，适量水溶解，通过C-18或C-8填料色谱柱，先以水洗脱，水液弃去，再以2 20%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥，得到木兰花碱。所述的制备方法，在提取步骤中，加入乙醇回流提取的量优选依次为12倍量、10 倍量、8倍量，提取3次，乙醇的浓度为70%。所述的制备方法，在提取步骤中，滤液减压浓缩后的药液浓度优选为每毫升含1 克药材。所述的制备方法，在提取步骤中，优选搅拌加入乙醇至含乙醇量为80%。所述的制备方法，在提取步骤中，滤液减压回收至无醇味，加水稀释，稀释后的药液浓度优选为每毫升含2克药材。所述的制备方法，在提取步骤中，滤液调节PH为1 3，加水稀释，稀释后的药液浓度优选为每毫升含1克药材。所述的制备方法，在第一次树脂纯化步骤中，大孔树脂选择DlOl大孔吸附树脂或 DlOlB大孔吸附树脂或XDA-I大孔吸附树脂或XDA-IB大孔吸附树脂或XDA-7均孔脱色树脂或HPD-100大孔吸附树脂或HPD-450大孔吸附树脂或AB-8大孔吸附树脂中的任意一种，其中优选为DlOl大孔吸附树脂。所述的制备方法，在第一次树脂纯化步骤中，用水洗脱的用水量以不将木兰花碱洗脱出为准，即洗脱液Molish反应为阴性，或纸斑反应或薄层色谱检测不得检出木兰花碱。所述的制备方法，在第一次树脂纯化步骤中，乙醇洗脱液的浓度优选为10%。所述的制备方法，在第一次树脂纯化步骤中，减压浓缩，浓缩后的药液浓度优选为每毫升含2克药材。 所述的制备方法，在第一次树脂纯化步骤中，滤液调节pH为8 10，浓缩，浓缩后的药液浓度优选为每毫升含2克药材。所述的制备方法，在第二次树脂纯化步骤中，大孔树脂选择DlOl大孔吸附树脂或 DlOlB大孔吸附树脂或XDA-I大孔吸附树脂或XDA-IB大孔吸附树脂或XDA-7均孔脱色树脂或HPD-100大孔吸附树脂或HPD-450大孔吸附树脂或AB-8大孔吸附树脂中的任意一种，其中优选为DlOl大孔吸附树脂。所述的制备方法，在第二次树脂纯化步骤中，优选40%乙醇洗脱。所述的制备方法，在精制步骤中，以水洗脱的用水量以除去365nm下蓝色荧光杂质为准。所述的制备方法，在精制步骤中，优选5%乙醇洗脱。所述的制备方法，第一次树脂纯化与第二次树脂纯化的步骤可以交换，即可以先进行第二次树脂纯化，再进行第一次树脂纯化。对本专利技术提供的木兰花碱的制备方法的研究与说明专利技术人对本专利技术的提供的技术方案进行了实验研究，用来证明本专利技术的技术效果，下述实验用于进一步说明本专利技术的技术效果，但不限制本专利技术。实验例1 1.仪器与材料白屈菜(罂粟科白屈菜Chelidonium majus L.的全草)、木兰花碱(天津中新药业中药现化代技术工程中心，供含量测定用)D-101、HPD-100、HPD-450大孔吸附树脂(天津农药总厂)；AB-8大孔树脂(南开大学化工厂)；R30030B反相C-18填料0Ο-63μπι，上海安普科学仪器有限公司)；甲醇(色谱纯，TEDIA，USA)；水(重蒸馏，自制)；盐酸、氢氧化钠、 磷酸二氢钾、药用95%乙醇(南京化学试剂有限公司)；Agilent 1100高效液相色谱仪，配自动进样器，四元泵，VffD检测器；电子分析天平(Mettler AE240)。2.色谱条件色谱柱AgilentZORBAX Eclipse XDB-18 Q50mmX 4. 6mm，5 μ m)，流动相乙5腈-0.2%磷酸二氢钾溶液比例为15 85，流速dmL.mirT1，柱温30°C，VWD检测器 278nm03.方法与结果3. 1提取工艺取白屈菜，切断，加入12倍、10倍、8倍70%乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过， 滤液减压浓缩至1 1(药液浓度为1克药材/毫升，下同)。搅拌加入乙醇至含乙醇量为 80 %，静置，滤过，滤液减压回收至无醇味，加水稀释药液浓度为2克药材/毫升，静置，滤过，弃去不溶物，滤液调节PH为1 3，加水稀释至1 1，备用。3. 2纯化工艺3. 2. 1第一次树脂纯化取3. 1项下备用液通过D-101大孔树脂色谱柱，适量水洗脱后，再以10%乙醇洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩至2 1(药液浓度为2克药材/毫升， 下同)，滤过，滤液调节PH为8 10，备用。3. 2. 2第二次树脂纯化取3. 2. 1项下备用液，通过D-101大孔树脂色谱柱，水洗脱至色浅，40 %乙醇洗脱，收集40 %乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得木兰花碱粗品，备用。3. 3 精制 取3. 2. 2项下粗品，水溶解，通过C-18色谱玻璃小柱，先以适量水洗脱，水液弃去， 再以5%乙醇洗脱，收集醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得到木兰花碱。结果木兰花碱保留时间为8. %iin，色谱图见附图1、附图2、附图3、附图4、附图5。4.讨论4. 1本实验以白屈菜为原料，采用乙醇提取、醇沉、水沉、大孔吸附树脂色谱制备木兰花碱，克服了现有方法耗费大量有机溶剂，工艺烦琐，收率低等弊端。4. 2实验中考察大孔吸附树脂上样溶液pH，结果表明酸性条件下，树脂吸附量小， 10%乙醇即可洗脱木兰花碱；碱性条件下树脂吸附量大，洗脱液中木兰花碱含量高，以pH 为8 10最佳。故采用两次大孔吸附树脂工艺纯化制备木兰花碱。对D-101、HPD-100, HPD-450、AB本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，王振中，张桥，许永升，尚强，毕宇安，章晨峰，陈凤龙，徐海娟，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。