一种基于PCR-ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法技术

技术编号：7364879 阅读：215 留言：0更新日期：2012-05-27 00:22

本发明专利技术提供一种基于PCR-ELISA的结核分枝杆菌耐药基因检测方法，包括以下步骤：（1）针对rpoB基因突变位点设计11个探针，并将之点样于96微孔板；（2）每一个检测样本的DNA均分3个反应管同时扩增，每管加入rpoB-F和rpoB-R两种引物，每对引物中的下游引物5’端均用地高辛标记，经PCR扩增出大量含有地高辛标记的结核分枝杆菌相应的基因片段产物；（3）将扩增产物与探针进行杂交，杂交后带有地高辛标记的目标基因与探针结合在一起，洗去未结合的片段，通过ELISA反应，测量OD值得出结果。本方法提供了一次杂交实验即可快速获得结核分枝杆菌对多个临床分离株的药物耐受信息，使得结核分枝杆菌分离株耐药性检测缩短到6－8h，充分显示了该方法的优越性。