本发明专利技术公开了包含咖啡酰莽草酸、原儿茶酸、水合酪氨酸和水杨酸的组合物，所述咖啡酰莽草酸及它们的衍生物从油棕的任一部分提取得到，所述油棕的任一部分包含但不限于棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液；以及在制备包含咖啡酰莽草酸、原儿茶酸、水合酪氨酸、水杨酸、所述咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的组合物中使用的方法，所述方法包括预浓缩包含咖啡酰莽草酸、原儿茶酸、水合酪氨酸、水杨酸、咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的提取物的步骤、和通过液相色谱从所述提取物中分离所述咖啡酰莽草酸、原儿茶酸、水合酪氨酸、水杨酸、咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的步骤；其中，所述咖啡酰莽草酸、原儿茶酸、水合酪氨酸、水杨酸、咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的洗脱活性根据固定相和流动相的组成而改变。在本发明专利技术的实施例中，采用C18柱和包含0.1％TFA(水中)和乙腈的梯度流动相，包含咖啡酰莽草酸的组分的洗脱发生在40和48分钟之间。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术通常涉及包含至少5种主要化合物的组合物以及从油棕制备相同组合物的方法，所述主要化合物包含咖啡酰莽草酸的同分异构体、对羟基苯甲酸、原儿茶酸和水合酪氨酸，所述油棕包含但不限于棕榈油研磨的植物液。这包含咖啡酰莽草酸从液态植物液的分离和纯化。
技术介绍
某些植物中天然存在的莽草酸及它的衍生物在植物和微生物中发挥生化中间体的重要作用。已知的是，在许多其他前体中，它是合成芳香族氨基酸、酚类物质和生物碱类的重要前体。与莽草酸在制药行业的利用有关的最相关进展之一是特敏福的生产，其为近年来用于对抗禽流感的一类药物。随着世界人口的增长、以及因此的各种工业和制药使用的需求的增长，例如，如果流感爆发、则制造特敏福或其他抗病毒药物的莽草酸的使用的增长，对莽草酸的需求有望显著增长。目前，中国大茴香的果实可以满足莽草酸的世界需求。但通常发现它的浓度基本较低。大茴香的低可利用率阻碍了特敏福的生产，并使莽草酸的其他来源的需求变紧张。 因此，需要开发莽草酸的其他来源，从而满足全球需求。包含棕榈油研磨的植物液的油棕提供了莽草酸的来源。已知的是，油棕是马来西亚和东南亚几个国家最重要的经济作物。已经确定的是， 从油棕提取的酚类化合物体现出各种健康益处。因此，正努力进一步开发油棕的这些化合物和其他提取物，所述这些化合物和其他提取物包含近来用于开发功能食品、医疗、营养食品和药物制剂的研磨过程的植物液和棕榈油研磨废液(mill effluent) (POME)。本专利技术集中于实现来自棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液(POME)作为莽草酸来源的价值和潜力，以及进一步实现将来自油棕的提取物、棕榈油研磨的植物液和POME 用作功能食品、医疗、营养食品和药物制剂的可能性。
技术实现思路
在一个实施例中，本专利技术涉及至少5种主要酚类化合物的组合物，所述主要化合物包含但不限于来自油棕的任一部分、棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液的咖啡酰莽草酸的同分异构体、羟基苯甲酸、原儿茶酸和水合酪氨酸。在另一实施例中，本专利技术涉及包含咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的组合物的分离和纯化方法。所述方法包括预浓缩包含所述咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的提取物的步骤、以及然后通过制备液相色谱从所述提取物中分离所述咖啡酰莽草酸及它们的衍生物的步骤。根据流动相和固定相的条件，包含所述咖啡酰莽草酸的组分的洗脱时间可改变。附图说明3将通过本专利技术的非限制性实施例并结合附图描述本专利技术，附图中图1是基于本专利技术实施例的包含获得的峰6、7和8的色谱图；图2(a)至图2(c)分别是基于本专利技术实施例获得的峰6、7和8的分析色谱图；图3是峰6、7和8的基质辅助激光解吸电离(MALDI)图谱；图4是峰6、7和8的紫外(UV)光谱图；图5是咖啡酰莽草酸或莽草酸的3. 4-对羟基肉桂酸酯的示意图；图6是碳和氢的化学位移(chemical shift)的示意图；图7是选择的异核多键相关谱(HMBC)相关分析的示意图；图8是标记化合物的示意图；以及图9是组合物的HPLC曲线(profile)(指纹)。具体实施例方式与以上
技术实现思路
的描述一致，说明书和实施例的和溶剂使用油棕的以及来自棕榈油研磨过程的植物液的提取物、以治疗和/或预防疾病的形式涉及用于各种健康相关目的的组合物、其使用和方法。这一专利技术中有用的棕榈植物液的生物活性提取物是从棕榈油研磨过程的植物液中获得的那些提取物，根据(基于但不限于)申请号为No. 20030031740的美国专利申请中公开的方法所涉及的步骤获得所述提取物。虽然提取物可包括包含有酚类化合物、果酸、果糖和甘油、淀粉、纤维和半纤维的各种化合物，但是为了标准化，根据酚类物质的含量(即没食子酸等价物)测量所使用的提取物的浓度。本专利技术的实施例部分以组合物为基础，所述组合物包括从油棕的任一部分(包含棕榈油过程的植物液和棕榈油研磨废液)获得的咖啡酰莽草酸和其他主要的酚类化合物。 依照方法的数个步骤制备本专利技术的组合物，所述方法是本专利技术的另一方面。预期的是，该制备安全，而且所述组合物适合于但不限于在每日消费中使用，所述每日消费包含食品强化剂、营养食品、健康促进目的、治疗应用、免疫刺激、免疫系统强化、神经保护、抗癌、抗炎、抗氧化以及作为抗衰老剂。进一步应该注意的是，基于本专利技术的优选实施例获得的咖啡酰莽草酸以及它们的衍生物疑似体现出血管保护、抗糖尿病作用以及降低血压。对本领域技术人员而言明显的是，为了本专利技术，从油棕的任一部分、棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液获得的粗提物可包含除了主要的标记化合物咖啡酰莽草酸以外的各种其他酚类化合物，这些化合物可包含羟基苯甲酸、水合酪氨酸、没食子酸、原儿茶酸、 2. 3-二羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、黄酮、微量营养素和其他天然植物成分(包含纤维素和半纤维素、淀粉、糖、脂肪、氨基酸和蛋白质)。事实上发现咖啡酰莽草酸及它们的衍生物浓度低。本专利技术的方法目的在于为本专利技术的组合物的制备以基本纯化的形式提供咖啡酰莽草酸及它们的衍生物。当依照本专利技术的方法经受分离和纯化时，发现从油棕(包含棕榈油研磨的植物液和棕榈油研磨废液)获得的提取物包含以下化合物的至少一种水合酪氨酸、对羟基苯甲酸、5-0-咖啡酰莽草酸、4-0-咖啡酰莽草酸以及3-0-咖啡酰莽草酸。因此，本专利技术扩展到纯化的咖啡酰莽草酸的制备方法，其中所述方法的主要步骤4是对从油棕的任一部分、棕榈油研磨的植物液以及棕榈油研磨废液获取的粗提物的预处理，以及咖啡酰莽草酸从所述粗提物的分离。这一实施例包含分离的或基本纯化的咖啡酰莽草酸。应该注意的是，“分离的”或“纯化的”咖啡酰莽草酸或其生物活性部分大致上摆脱了其他的细胞物质或其他成分、或者大致上摆脱了化学前体或其他化学品。以下的实施例仅用于解释制备咖啡酰莽草酸和相关化合物的不同方法，并不对其进行限制。组合物的制备方法的第一步是粗提物的预处理、从而获得预浓缩或部分纯化的提取物。在通过高效液相色谱的制备之前，这可能结合低严格条件(stringent condition) 下的使提取物经历快速色谱或类似测量、或者替代性地使所述提取物经乙醇沉淀。第一方法涉及的主要步骤是装填沃特世的固相萃取柱(“S印-pak”型柱)、去除杂质、采用甲醇或乙醇洗脱所述提取物以及在旋转蒸发仪中的浓缩所述提取物。第二方法包括向三倍体积 (three volumes)的冷乙醇中添加一定量的提取物、所述混合物在_20°C的优选温度储存过夜、以1500Xg离心至少15分钟、采用适量蒸馏水溶解从先前的步骤获得的沉淀以及通过旋转蒸发仪在50°C浓缩，从而获得优选的3ml的最终体积。应该提及的是，可采用本领域已知的(然而是实现相似目标的)标准程序的选择性步骤替代两种方法的这些步骤。组合物(包括咖啡酰莽草酸及它们的衍生物)的制备方法的下一重要步骤涉及咖啡酰莽草酸从部分纯化的提取物的分离和纯化。基于制备5 μ m颗粒大小的液相色谱柱(阿尔泰克，econosil C18)的低严格条件或参数，这可采用传统的高效液相色谱(HPLC)，结合优选的25cm的柱长X IOmm的内径、每分钟3ml的流速得以实施。优选的流动相梯度包括两种溶剂，包含0. 的三氟乙酸(TFA)与一定量水的至少一种溶剂，添加有包含0-1%的 TFA/乙腈(ACN) (TF本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：T·J·萨姆班丹，熊祖坚，J·杏斯奇·安东尼，拉维加德维·沙姆巴沙穆提，谭友爱，卡里亚纳·桑德拉姆·P马尼卡姆，莫哈末·巴斯利·瓦西德，
申请(专利权)人：马来西亚棕榈油协会，
类型：发明
国别省市：
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