荧光溶剂化变色色素制造技术

本发明专利技术提供一种新型荧光溶剂化变色色素，其具有以下性质(1)具有离子性的末端，从而易于在亲水性表面或者极性溶剂中使用；(2)能够利用广泛使用的氩激光(488nm)来高效地激发；(3)根据极性的变化发光波长发生位移，(4)可以有效地将细胞等生物体组织染色。本发明专利技术中发现，在中性型荧光溶剂化变色色素(日本特开2008-291210)的吸电子基上导入吡啶鎓基来合成荧光溶剂化变色色素时，该荧光溶剂化变色色素根据亲水性表面的极性变化而进行进行荧光波长响应，而且改变为阳离子型的荧光溶剂化变色色素能将细胞膜染色，可以用于其行为的观察。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及根据溶剂的极性而发光波长发生变化的荧光溶剂化变色 (solvatochromic)色素，更详细而言，涉及一种能够将细胞染色、且根据该细胞的环境而发光波长会发生变化的荧光溶剂化变色色素。
技术介绍
荧光溶剂化变色色素是根据分子周边的溶剂极性而变色的色素，现在主要被用作为了利用荧光显微镜实时地高感度观测生物体分子(特别是脂质分子)的动态的探针。由于其变色机理不需要与特定的化学物种接触，因此可以高感度识别对于其他荧光色素而言很难识别的抗原抗体反应、单核苷酸多态性。作为该荧光溶剂化变色色素，有NBD、danSyl、prodan、Dapoxyl等。其中性能最优的是Dapoxyl，作为溶剂化变色色素，其罕见地在长波长区域(370nm付近)具有能够光激发的吸收带，且斯托克斯位移(Stoke’s shift)显著，荧光的量子收率也高(非专利文献1)。作为使激发波长进一步长波长化的解决法，本专利技术人已经开发了以噻吩等作为母骨架的中性型荧光溶剂化变色色素，确认可以通过蓝色二极管激光来高效地激发(专利文献1) O另一方面，具有与该专利技术的荧光溶剂化变色色素近似结构的阳离子性荧光色素 DASPMI已经市售，可以用于线粒体的细胞膜行为的观察(专利文献2，非专利文献2)。现有技术文献专利文献专利文献1 日本特开2008-291210专利文献2 日本特表2003-506014非专利文献非专利文献 1 Photochemistry and Photobiology, 1997,66(4) :424-43非专利文献 2 =Biochimica et Biophysica Acta, 1976,423 :1-1
技术实现思路
专利技术要解决的课题以往的荧光溶剂化变色色素(专利文献1)由于脂溶性非常高，因此局限在细胞膜的疏水性核等中，在亲水性表面或者极性溶剂中，有难以使用的弱点。而且，为了不对细胞等的生物体组织产生坏影响，作为荧光显微镜的光源，希望能利用广泛使用的比蓝色二极管激光G05nm)更长波长的光源的氩激光G88nm)来高效地激发。另一方面，DASPMI (非专利文献2)是根据线粒体的活性而发光强度大幅变化但是发光波长不变，因此不能应用于化学计量比(ratio-metric)测定等的定量性的高的测定。因此，本专利技术的目的在于提供一种新型阳离子型荧光溶剂化变色色素，其具有以下性质(1)具有离子性的末端，从而使其易于在亲水性表面或者极性溶剂中使用；(2)能够利用广泛使用的氩激光G88nm)来高效地激发( 根据极性的变化发光波长发生位移， (4)可以有效地将细胞等生物体组织染色。解决课题的手段可用于线粒体的细胞膜行为的观察的阳离子性荧光色素DASPMI (专利文献2，非专利文献2)以下式表示，其吡啶鐺基是阳离子性的取代基、为非常强的吸电子基。权利要求1. 一种下式所表示的荧光溶剂化变色色素， 2.根据权利要求1所述的荧光溶剂化变色色素，其中，Y分别独立，其中至少一个表示-NwRki = ZH，其余的表示-CR9 =，式中，R9的定义与上述相同，Rltl表示氢原子、烃基、能与其他分子结合的结合基、或能与其他分子结合的结合基所结合的烃基，Z表示1价的阴离子种。3.根据权利要求1或2所述的荧光溶剂化变色色素，其中，R1 R6是氢原子。4.根据权利要求1 3中任一项所述的荧光溶剂化变色色素， R7和R8分别相同或不同，为碳数为3 7的烷基。5.一种细胞用染色剂，其包含权利要求2所述的荧光溶剂化变色色素。6.一种细胞用染色液，其是使权利要求2所述的荧光溶剂化变色色素溶解或分散于水系溶剂后的细胞用染色液。7.一种细胞染色液，其是使权利要求2所述的荧光溶剂化变色色素溶解于血清后的细胞用染色液。8.一种细胞，其被权利要求2所述的荧光溶剂化变色色素染色。全文摘要本专利技术提供一种新型荧光溶剂化变色色素，其具有以下性质(1)具有离子性的末端，从而易于在亲水性表面或者极性溶剂中使用；(2)能够利用广泛使用的氩激光(488nm)来高效地激发；(3)根据极性的变化发光波长发生位移，(4)可以有效地将细胞等生物体组织染色。本专利技术中发现，在中性型荧光溶剂化变色色素(日本特开2008-291210)的吸电子基上导入吡啶鎓基来合成荧光溶剂化变色色素时，该荧光溶剂化变色色素根据亲水性表面的极性变化而进行进行荧光波长响应，而且改变为阳离子型的荧光溶剂化变色色素能将细胞膜染色，可以用于其行为的观察。文档编号C09B57/00GK102439091SQ20108000672公开日2012年5月2日 申请日期2010年2月4日 优先权日2009年2月6日专利技术者孙尚铉, 山岸裕, 山田幸司, 平敏夫, 绫部时芳, 青柳麻衣子 申请人:国立大学法人北海道大学本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：山田幸司，山岸裕，绫部时芳，孙尚铉，青柳麻衣子，平敏夫，
申请(专利权)人：国立大学法人北海道大学，
类型：发明
国别省市：