一种从芦根中提取游离氨基酸的方法技术

本发明专利技术提供了一种从芦根中提取游离氨基酸的方法，该方法为将新鲜芦根用水冲洗干净，烘干，粉碎；称取粉碎后的芦根粉末，加入提取溶剂，水浴回流提取；提取液过滤，加入95%乙醇至终浓度为75%；离心，上清液沸水浴蒸干得浸膏，用乙醚脱脂和色素；沉淀加水加热溶解，趁热过滤除脂肪；滤液定容，加入活性炭，过滤，即得游离氨基酸提取液，4℃保存备用，茚三酮比色法检测游离氨基酸含量。该方法采用水浴回流提取的方法从芦根中获得了游离氨基酸，具有操作简单、制作简单和样品用量少等特点，为芦根游离氨基酸的研究打下了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地涉及。
技术介绍
芦根为禾本科多年生草本植物芦苇的地下根茎，是一种较常用的中药材。性寒、味甘，归肺、胃经，具有清热、生津、除烦、止呕、利尿之功效。临床主要用于发烧、尿路感染、肺脓疡、支气管炎等病的治疗。芦根提取物对化学性肝损伤有良好的保护和恢复作用，近来有报道，其具有疏肝解郁的作用，所以研究其提取分离方法具有现实的意义，在保健品、饮食方面的运用极具潜力。我国适宜种植芦根的地域广阔，春末夏初或秋季均可采挖，洗净，切段，鲜用或晒干用，芦根产品市场很大，但芦根深加工技术还比较薄弱。氨基酸是构成生物体蛋白质并同生命活动有关的最基本的物质，是在生物体内构成蛋白质分子的基本单位，与生物的生命活动有着密切的关系。它在抗体内具有特殊的生理功能，是生物体内不可缺少的营养成分之一。氨基酸在医药上主要用来制备复方氨基酸输液，也用作治疗药物和用于合成多肽药物。目前用作药物的氨基酸有一百几十种，其中包括构成蛋白质的氨基酸有20种和构成非蛋白质的氨基酸有100多种。由多种氨基酸组成的复方制剂在现代静脉营养输液以及“要素饮食”疗法中占有非常重要的地位，对维持危重病人的营养，抢救患者生命起积极作用，成为现代医疗中不可少的医药品种之一。谷氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、L 一多巴等氨基酸单独作用治疗一些疾病， 主要用于治疗肝病疾病、消化道疾病、脑病、心血管病、呼吸道疾病以及用于提高肌肉活力、 儿科营养和解毒等。此外氨基酸衍生物在癌症治疗上出现了希望。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，该方法具有操作简单、制作简单和样品用量少等特点。本专利技术提供了，该方法步骤如下(1)将新鲜芦根用自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗一次，淋干水后，60°c恒温鼓风干燥箱内烘干ωτι !，然后剪成小段，用粉碎机粉碎，过滤后的粉末备用；(2)称取粉碎后的芦根粉末，加入一定比例的提取溶剂，水浴回流提取；(3)提取液过滤，加入95%乙醇至终浓度为 75%，除去水溶性多糖和蛋白质；(4)离心，上清液沸水浴蒸干得浸膏，用乙醚脱脂和色素； 沉淀加水加热溶解，趁热过滤除脂肪；(5)滤液定容至50ml，加入5g活性炭搅拌lOmin，过滤，即得游离氨基酸提取液，4°C保存备用，茚三酮比色法检测游离氨基酸含量。本专利技术提供的从芦根中提取游离氨基酸的方法，所述步骤(1)中粉碎的芦根经40 目筛子过滤，用过滤后的较细粉末进行提取以保证所需物质有效地提取出来。本专利技术提供的从芦根中提取游离氨基酸的方法，所述步骤(2)中提取溶剂为水、95%乙醇溶液、75%乙醇溶液、50%乙醇溶液中的一种或多种(提取溶剂优选为水)；芦根粉末与提取溶剂的比例(料液比)为1:15-1:30 (料液比优选为水)；水浴回流提取的条件为 50-90°C水浴回流提取1- (优选为60°C水浴回流提取池)。本专利技术提供的从芦根中提取游离氨基酸的方法，所述步骤(5)中茚三酮比色法检测芦根中游离氨基酸的含量，以天冬氨酸为对照品。本专利技术的有益效果是通过本专利技术，获得了芦根游离氨基酸，经茚三酮比色法测定，游离氨基酸含量为8. 24mg/go本专利技术采用回流提取的方法，首次从芦根中提取出游离氨基酸。 附图说明图1是各因素对芦根游离氨基酸含量的影响。 具体实施例方式下面的实施例将对本专利技术予以进一步的说明，但并不因此而限制本专利技术。实施例11.芦根的前处理(1)将新鲜芦根用自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗一次，淋干水后，60°c恒温鼓风干燥箱内烘干6h。(2)然后剪成小段，用粉碎机粉碎，粉碎的芦根经40目筛子过滤，过滤后的粉末备用。2.提取溶剂的选择水95%乙醇溶液 75%乙醇溶液 50%乙醇溶液3.提取游离氨基酸的步骤a)将新鲜芦根用自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗一次，淋干水后，60°C恒温鼓风干燥箱内烘干MTiai，然后剪成小段，用粉碎机粉碎；b)称取一定量的芦根粉末，加入一定比例的提取溶剂，水浴回流提取；c)提取液过滤，加入95%乙醇至终浓度为75%，除去水溶性多糖和蛋白质；d)离心，上清液沸水浴蒸干得浸膏，用乙醚脱脂和色素；沉淀加水加热溶解，趁热过滤除脂肪；e)滤液定容至50ml，加入5g活性炭搅拌lOmin，过滤，即得游离氨基酸提取液。 4°C保存备用。4.检测茚三酮比色法检测游离氨基酸含量。标准曲线制备准确吸取lmg/mL的天冬氨酸标准溶液0. 0,0. 05,0. 1,0. 2,0. 3、 0.4、0.5mL (相当于0、50、100、200、300、400、500μ g氨基酸)，分别置于5mL刻度试管中，各加水补充至体积为800 μ 1，然后加入洲茚三酮乙醇溶液和磷酸盐缓冲溶液(pH为 8. 04)各200 μ 1，混合均勻，于沸水浴上加热15min，冷却至室温，静置15min，加水定容至 5ml，摇勻。在570nm波长下，以试剂空白为对照测定其余各溶液的吸光度Α。得回归方程Y=O. 2669X+0. 0041 (R2 =0. 9974)，结果表明在10(Γ500μβ范围内呈良好的线性关系。 5.正交试验设计本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从芦根中提取游离氨基酸的方法，其特征在于该方法步骤如下(1)将新鲜芦根用水冲洗干净，淋干水后，烘干，然后剪成小段，用粉碎机粉碎，过滤，过滤后的粉末备用；(2)称取粉碎后的芦根粉末，加入一定比例的提取溶剂，水浴回流提取；(3)提取液过滤，加入高浓度乙醇至终浓度为75%，除去水溶性多糖和蛋白质；(4)离心，上清液沸水浴蒸干得浸膏，用乙醚脱脂和色素；沉淀加水加热溶解，趁热过滤除脂肪；(5)滤液定容，加入活性炭搅拌，过滤，即得游离氨基酸提取液，4°C保存备用，茚三酮比色法检测游离氨基酸含量。2.按照权利要求1所述的从芦根中提取游离氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(1) 中烘干条件为60°C恒温鼓风干燥箱内烘干MTiai。3.按照权利要求1所述的从芦根中提取游离氨基酸的方法，其特征在于所述步骤(1) 中粉碎的芦根经40目筛子过滤，过滤后的粉末备用。4.按照权利要求1所述的从芦根中提取游离氨基酸的方法，其特征在于所述步...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏生，赵健，邵丽杰，朱俊丰，
申请(专利权)人：辽宁仙鹤矿泉水有限公司，
类型：发明
国别省市：