本发明专利技术涉及用于诊断和/或预后受试者中的心力衰竭的方法，该方法包括下列步骤：测定获自所述受试者的体液样品中的至少一种遗传标志物的水平，其中所述至少一种遗传标志物是miRNA。本发明专利技术还涉及治疗或预防受试者中的心力衰竭的方法，该方法包括下列步骤：降低所述受试者中的至少一种miRNA的表达、数量和/或活性，或降低所述受试者中的至少一种miRNA与其mRNA靶标之间的相互作用，或增加所述受试者中的至少一种miRNA的mRNA靶标的表达、数量和/或活性。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及生物学和医学领域。更具体而言，本申请涉及用于诊断和治疗心力衰竭的miRNA。
技术介绍
微RNA(miRNA)是植物和动物的基因组中编码的小RNA。它们存在于编码蛋白的基因的内含子中、编码多个miRNA的多顺反子转录物中和单个miRNA基因中。这些长度为大约21-23个核苷酸的高度同源的RNA通常通过结合特定mRNA的3’ -非翻译区(3’ -UTR) 而调节基因的表达。人们认为每个miRNA调节多个基因，由于据预测在高等真核生物中存在数百种miRNA基因，所以miRNA所赋予的潜在的调节线路是巨大的。数个研究小组已经提供了证据证明miRNA是多种过程的关键调节者，如早期发育、细胞增殖和细胞死亡、调亡和脂肪代谢，以及细胞分化。据推论在高等真核生物中，miRNA在调节基因表达中的作用可能与转录因子同样重要。目前已经验证了超过540种人类的miRNA ；然而，计算机模型提示可能还有数千种。人们相信多达30%的人类基因受到miRNA的调节。编码miRNA的基因是通过RNA聚合酶II从DNA转录而来的，但不翻译成蛋白质。 初级转录物一般具有数千碱基的长度，被称作pri-miRNA。pri_miRNA在细胞核中被加工为较短的70-100个核苷酸的茎-环结构，其被称作pre-miRNA。该过程在动物中是通过RNA 酶III核酸内切酶Drosha进行的。然后，pre-miRNA被转运至细胞质，在那里它们被第二种 RNA酶III核酸内切酶DICER加工为长度为21-23个核苷酸的双链miRNA。随后，miRNA双链体的一条链被掺入到RNA诱导的沉默复合体(RISC)中。作为RISC的一部分，靶基因的基因表达通过抑制翻译和/或通过切割mRNA而被阻抑。成熟的miRNA与一种或多种mRNA 分子部分互补。如果miRNA和mRNA在同一细胞中表达，则它们能够以序列特异性方式杂交， 从而阻止mRNA翻译成蛋白质，因此调节特定蛋白质的水平。miRNA作为可能的临床参与者的关注和信赖水平可由下列事实证明最近已经建立起了多个基于miRNA的生物技术公司。数种miRNA与癌症和心脏疾病相关。表达分析研究揭示相对于正常组织，肿瘤中的miRNA表达是紊乱的。在乳腺癌、肺癌和结肠癌中，微RNA下调；而在Burkitt氏和其它人类B-细胞淋巴瘤中，微RNA上调。因此，人miRNA可能作为生物标志物有很大的用途，尤其是用于将来的癌症诊断，并且正迅速成为疾病干预的受关注的靶标。除了它们与癌症的关联之外，微RNA在控制心脏功能和紊乱的多个方面具有重要作用，包括肌细胞生长、心室壁的完整性、收缩性、基因表达和心律的维持。已经证明miRNA的表达失调对于多种形式的心脏疾病是必要的和足够的。最近描述了 miRNA也存在于血液中。在血清、血浆、血小板、红细胞以及有核血细胞中可以检测到相对高水平的数种miRNA。已经描述了具有镰状细胞贫血或前列腺癌的受试者的血液中的miRNA的异常表达谱。虽然已经确定遗传因素与易于发生心力衰竭的倾向相关，但是，鉴于该病症的复杂性质，此类遗传因素的鉴定仍然是有疑问的。已经描述了用于诊断急性冠状动脉综合征、包括心力衰竭的方法，尤其是 W0/2002/083913.W02002/089657和W02006/120152。所有这些方法使用例如血液或尿液中的脑钠肽(brain natriuretic peptide, BNP)的水平作为急性冠状动脉综合征的标志物。 然而，该多肽是由心脏的心室响应于心肌细胞的过度伸展而分泌的，因此其是反映心脏状况的生理标志物。需要更精确地反映受试者患心力衰竭的遗传倾向性的遗传标志物。此类标志物也允许更早地进行诊断。因此，预测患心力衰竭的遗传标志物的获得是十分理想的。目前，不存在此类标志物。
技术实现思路
现在发现在心脏疾病中，血液中的miRNA谱被改变。不希望被任何理论所限， 相信细胞、包括心肌细胞通过外来体将这些miRNA分泌进入血液，在疾病中，分泌模式被改变。因此，本专利技术人证明，血液中的miRNA谱可用作心力衰竭的新的诊断工具或生物标志物方法。本专利技术的目标是提供用于治疗、预防或测定心力衰竭(其风险)的工具和方法。因此，在第一个方面，本专利技术提供了用于治疗或预防受试者中的心力衰竭的方法， 该方法包括下列步骤-降低所述受试者中的至少一种miRNA的表达、数量和/或活性；或-降低所述受试者中的至少一种miRNA与其mRNA靶标之间的相互作用；或-增加所述受试者中的至少一种miRNA的mRNA靶标的表达、数量和/或活性，其中所述至少一种miRNA 选自 miR-423_5p，miR-191*，miR-15b, miR-1228*, miR-181a, miR-18a*, miR-107, miR-299-3p, miR-342-3p, miR-652, miR-675, miR-129-5p, miR18b*, miR-1254, miR-622, HS_202. l，miR_302d 和 solexa-3927-221。在另一个方面，本专利技术提供了用于治疗或预防受试者中的心力衰竭的方法，该方法包括下列步骤-增加所述受试者中的至少一种miRNA的表达、数量和/或活性；或-增加所述受试者中的至少一种miRNA与其mRNA靶标之间的相互作用；或 -降低所述受试者中的至少一种miRNA的mRNA靶标的表达、数量和/或活性，其中所述至少一种miRNA 选自 miR-191，miR_30e，miR-744, miR-142_3p 和 solexa-2952-306。在上述方面的优选实施方式中，所述的增加所述miRNA的表达、数量和/或活性或相互作用的方法包括向所述受试者施用所述miRNA以作为功能性miRNA，作为前体微 RNA(pre-miRNA)，或作为微 RNA 初级转录物(pri_miRNA)。在另一个方面，本专利技术提供了选自miR-191, miR_30e，miR-744, miR-142_3p 和 solexa-2952-306,或其前体微RNA (pre_miRNA)或微RNA初级转录物，其用作药物，优选用于治疗或预防心力衰竭。在另一个方面，本专利技术提供了能够与至少一种选自miR-423-5p，miR-191*, miR-15b, miR-1228*, miR-181a, miR-18a*, miR-107, miR-299-3p, miR-342-3p, miR-652, miR-675, miR-129_5p，miR-18b*, miR-1254, miR-622, HS_202. 1，miR-302d 和 solexa-3927-221的miRNA及其前体微RNA (pre_miRNA)或微RNA初级转录物特异性结合、 从而抑制其活性和/或功能的化合物、优选核酸，其用作药物，优选用于治疗或预防心力衰竭。本文中的术语“功能”特别是指所述miRNA抑制靶mRNA的翻译的能力。因此，核酸优选能够以序列特异性方式抑制miRNA与其mRNA靶标之间的杂交。在本文定义的核酸的上下文中，术语“特异性结合”特别是指，核酸能够在严格条件下与所述miRNA杂交。在优选的实施方式中，所述核酸具有与如图3中本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：E·E·J·M·克里莫斯，YM·品托，A·J·M·迪吉森，
申请(专利权)人：阿姆斯特丹大学学术医学中心，
类型：发明
国别省市：
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