一种抗人精胺氧化酶的单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种高特异性、高效价的抗人精胺氧化酶的单克隆抗体、其制备方法及其应用。所述单克隆抗体由杂交瘤细胞株CCTCC?C201159产生。该单克隆抗体能识别包含人、小鼠和猴的哺乳动物的精胺氧化酶，并可以进行定性或定量分析，还可以广泛应用于免疫印迹、ELISA、免疫组织化学分析、免疫荧光分析、流式细胞术、免疫沉淀等实验研究中，用来检测精胺氧化酶。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及单克隆抗体领域，更具体的，本专利技术涉及一种抗人精胺氧化酶的单克隆抗体，本专利技术还涉及该单克隆抗体的制备方法、检测或鉴定方法，本专利技术还涉及该单克隆抗体的应用，属于免疫化学

技术介绍
多胺，包括腐胺，精脒，精胺，是广泛存在于生物体组织中的一类多价阳离子小分子化合物，它们能与带负电荷的大分子如DNA，RNA和蛋白质等结合，进而参与染色体生成、基因转录活化、信号传递和细胞程序性凋亡等多种重要的生理病理过程(Heather MW, Alison VF, Alun HA. A perspective of polyamine metabolism. Biochem J, 2003, 376(1):1-14. ； Moinard C, Cynober L, De Bandt JP. Polyamine:metabolism and implications in human diseases. Clinical Nutrition, 2005, 24(2):184-197.)。 多胺不仅为正常细胞生长所必须，还与肿瘤的发生和快速生长密切相关。由此多胺代谢途径逐渐成为抗肿瘤治疗的新靶点(Casero RA and Pegg AE. Polyamine catabolism and AiseaseW]-Biochem J, 2009，421 (3) :323-338. ； Casero RA, Marton LJ. Targeting polyamine metabolism and function in cancer and other hyperproliferative diseases . Nat Rev Drug Discov, 2007, 6 (5) : 373-390. ； Casero RA and Woster PM. Recent advances in the development of polyamine analogues as antitumor agents, Medical Chemistry, 2009， 52(15):4551-4573.)。精胺氧化酶(spermine oxidase, SM0)是新近被成功克隆和鉴定、主要参与多胺分解代谢途径的关键酶，该酶以精胺为首选底物，将其分解为精脒和氨基丙醛，同时产生过氧化氧(Wang Y，Devereux W，Woster P，Stewart T，Hacker A，Casero R Jr. Cloning and characterization of a human polyamine oxidase that is inducible by polyamine analogue exposure. Cancer Res, 2001 ； 61:5370 - 5373. )。SMO 表达水平可以被各种剌激诱导而上调，包括抗肿瘤多胺类似物(Casero RA md Woster PM. Recent advances in the development of polyamine analogues as antitumor agents. Medical Chemistry, 2009, 52(15):4551-4573. ； Wang Y， Devereux W, Woster P， Stewart T，Hacker A，Casero R Jr. Cloning and characterization of a human polyamine oxidase that is inducible by polyamine analogue exposure. Cancer Res, 2001;61:5370 - 5373. ； Hacker A，Marton LJj Sobolewski M，Casero RA Jr. In vitro and in vivo effects of the conformationalIy restricted polyamine analogue CGC-I1047 on small cell and non-small cell lung cancer cells. Cancer Chemother Pharmacol 2008;63:45 - 53. ； Zahedi K, Bissler JJj Wang Zj Josyula A，Lu L，Diegelman P，Kisiel N，Porter CWj Soleimani M. Spermidine/ spermine Nl-acetyltransferase overexpression in kidney epithelial cells disrupts polyamine homeostasis, leads to DNA damage, and causes G2 arrest. AmJ Physiol Cell Physiol 2007 ； 292 C1204 - 1215. )0 研究发现，SMO 不仅在抗肿瘤研究中具有潜在的应用价值，而且在许多疾病的发生中发挥着非常重要的作用，如炎症，感染，缺血再灌注损伤，肿瘤等。由此，SMO成为许多疾病化学预防和治疗的一个潜在靶点。作为多胺分解代谢的关键酶之一，SMO有作为抗肿瘤分子靶点的重要潜在应用价值。鉴于目前国内外尚未见商品化的人SMO单克隆抗体供应，限制了组织、细胞和分子水平上对SMO的研究。为了填补这一空白，我们采用原核表达获得重组人精胺氧化酶，并以此重组蛋白作为抗原制备出鼠抗人精胺氧化酶单克隆抗体，该抗体可广泛用于生物科学和医学的相关研究领域。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种特异性强、免疫效果好、可大量生产、且针对人精胺氧化酶的单克隆抗体，该单克隆抗体能识别或检测源自哺乳动物的精胺氧化酶，为人精胺氧化酶的进一步研究提供了有力的工具，如以精胺氧化酶(SMO)为靶点的抗肿瘤基础和临床研究。本专利技术还有一个目的是提供一种分泌抗人精胺氧化酶的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 SP2/0-SM0。所述杂交瘤细胞株SP2/0-SM0于2011年7月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC C201159，保藏地址为中国湖北省武汉市武汉大学(邮编430072)。所述杂交瘤细胞株能合成和分泌高效价的抗SMO单克隆抗体，经间接Elisa法测定，其效价达到 1:512 000。本专利技术还有一个目的是提供一种制备抗人精胺氧化酶的单克隆抗体的方法。本专利技术还有一个目的是提供一种能识别哺乳动物精胺氧化酶的单克隆抗体的应用，所述单克隆抗体可以检测或鉴定源自哺乳动物的精胺氧化酶，其中哺乳动物为人、小鼠或猴，所述检测或鉴定是定性分析或定量分析。本专利技术还有一个目的是提供一种利用抗人精胺氧化酶的单克隆抗体在检测精胺氧化酶的应用，其中包括所述单克隆抗体在免疫印迹检测精胺氧化酶的应用、所述单克隆抗体在ELISA分析检测精胺氧化酶的应用，所述单克隆抗体在免疫组织化学分析检测精胺氧化酶的应用、所述单克隆抗体在免疫荧光分析检测精胺氧化酶的应用、所述单克隆抗体在免疫沉淀检测精胺氧化本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种杂交瘤细胞株ＳＰ２／Ｏ－ＳＭＯ，其保藏编号为：ＣＣＴＣＣ　Ｃ２０１１５９。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王艳林，李春红，杨建林，韩钰，蔡富强，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：42