水体水质检测方法技术

本发明专利技术适用于水体水质检测技术领域，提供了一种水体水质检测方法及费氏弧菌在水体水质检测中的应用。本发明专利技术水体水质检测方法，包括制备费氏弧菌悬液、测定参考水中费氏弧菌的发光强度、测定待测水中费氏弧菌的发光强度、确定待测水中费氏弧菌发光强度抑制率等步骤。本发明专利技术水体水质检测方法，操作简单，成本低廉，检测结果准确度高，并且不会产生污染环境的物质，对环境友好。

【技术实现步骤摘要】
水体水质检测方法
本专利技术属于环境检测
，尤其涉及一种水体水质检测方法。
技术介绍
近年来，我国重大水质污染事件频繁发生，对饮用水安全造成了严重威胁。目前水样毒性监测可以划分为两大类：一种采用理化分析法监测，它能定量分析污染物中的主要成分，但不能直接、全面地反映各种有毒物质对环境的综合影响。因水中有毒物质的多样性和未知性，实际中不可能对全部物质都分别实施检测，更不可能考虑到各种化学物质之间的拮抗、抑制和协同作用。另一种是生物监测法，它可以综合多种有毒物质的相互作用，判定有毒物质的质量浓度和生物效应之间的直接关系，为水质的监测和综合评价提供科学依据，因而得到了迅速发展。但是，检测方法操作复杂，检测准度不够，阻碍了生物检测法的应用范围。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术实施例提供一种水体水质检测方法，解决现有技术中检测方法操作复杂、准确度不高的技术问题。本专利技术是这样实现的，一种水体水质检测方法，包括如下步骤：将费氏弧菌冻干菌加入至复苏缓冲液中，混匀得到费氏弧菌悬液；将体积为4.5mL的参考水和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合，加入10-50uL该费氏弧菌悬液，调节pH值为6.0-8.5，在温度为15-20℃条件下，测定参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5，15分钟反应时间发光强度IR15；将体积为4.5mL的待测水和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合，加入10-50uL该费氏弧菌悬液，调节pH值为6.0-8.5，在温度为15-20℃条件下，测定待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5，15分钟反应时间发光强度IS15；根据上述参数IS5、IR5、IR15、IS15，得出待测水中费氏弧菌发光强度抑制率，判断待测水是否被污染；该测定参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5步骤中和该测定待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5的步骤中，所加入的费氏弧菌悬液体积相同。本专利技术实施例水体水质检测方法，通过将费氏弧菌用于检测水体水质，操作简单，成本低廉，检测结果准确度高，并且不会产生污染环境的物质，对环境友好。附图说明图1是本专利技术实施例水体水质检测方法流程图；图2是本专利技术实施例一水体水质检测方法流程图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。请参阅图1，图1显示本专利技术实施例水体检测方法流程图，包括如下步骤：步骤S01，制备费氏弧菌悬液将费氏弧菌冻干菌加入至复苏缓冲液中，混匀得到费氏弧菌悬液；步骤S02，测定参考水中费氏弧菌的发光强度将体积为4.5mL的参考水和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合(体积比为9∶1)，加入10-50uL该费氏弧菌悬液，调节pH值为6.0-8.5，在温度为15-20℃条件下，测定参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5，15分钟反应时间发光强度IR15；步骤S03，测定待测水中费氏弧菌的发光强度将体积为4.5mL的待测水和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合，加入10-50uL该费氏弧菌悬液，调节pH值为6.0-8.5，在温度为15-20℃条件下，测定待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5，15分钟反应时间发光强度IS15；步骤S04，确定待测水中费氏弧菌发光强度抑制率根据上述参数IS5、IR5、IR15、IS15，得出待测水中费氏弧菌发光强度抑制率，判断待测水是否被污染。具体地，本专利技术实施例中使用的测光仪为德国BERTHODLB9509生物测光仪。具体地，该费氏弧菌冻干菌(Vibriofischeri)为市售产品，一般是指，将处于对数生长期的费氏弧菌制成冻干粉，使菌种保持干燥并快速进入休眠状态。步骤S01中，该费氏弧菌冻干粉的用量为0.2g，该复苏缓冲液的体积为10mL；将费氏弧菌冻干粉加入至复苏缓冲液中，摇匀，即可实现费氏弧菌活化；然后将活化后的费氏弧菌在0-4℃的细菌室中保藏；该缓冲液的由如下重量百分含量(质量体积比)的组分组成：渗透稳定剂(3％-5％)、氯化钠(2％)、乙醇(1.5％)；氯霉素和环己酰亚胺混合物0.05％-0.1％，优选为0.1％；本专利技术实施例中，该氯霉素和环己酰亚胺作为抗生素而使用。该渗透稳定剂是碳源由氮源及水组成(渗透稳定剂如下组分组成：酵母膏1％；蛋白胨0.5％；葡萄糖0.5％；KCl0.1％；CaCl2·2H2O0.1％；MgCl2·6H2O0.5％；MgSO4·7H2O0.3％；NaHCO30.01％。)。进一步，步骤S01后，还包括对费氏弧菌悬液进行选择的步骤，具体为：将体积为9mL的参考水和体积为1mL的氯化钠溶液混合，然后加入10-50uL步骤S01中得到的费氏弧菌悬液，将使得费氏弧菌悬液被稀释，在温度为15-20℃条件下保存5分钟后将稀释后的费氏弧菌悬液吸入分析室测定费氏弧菌悬液的初始发光强度I0值；该氯化钠溶液的浓度没有限制，只要使终浓度小于5％即可，例如200g/L，经过测定，I0值在100000RLU以上的费氏弧菌为正常的费氏弧菌，可以被应用于本专利技术中，I0值小于100000RLU的，可能是在运输、储存过程中，该费氏弧菌已经受到损害，或者该费氏弧菌冻干菌复苏状态不是很好，需要再等待一段时间。具体地，步骤S02中，将参考水和氯化钠溶液混合后，加入步骤S01所制备的费氏弧菌菌液，在15-20℃条件下，首先测定参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5，然后测定15分钟参考水中费氏弧菌发光强度IR15；具体地，步骤S03中所使用的费氏弧菌悬液的体积和步骤S02中所使用的费氏弧菌悬液的体积相同，例如，步骤S02中使用50uL费氏弧菌悬液，步骤S03中使用的待测水的体积也为50uL费氏弧菌悬液；步骤S03中，该氯化钠溶液的浓度没有限制，只要使终浓度小于5％即可，例如200g/L；将待测水和氯化钠溶液混合后，加入步骤S01所制备的费氏弧菌菌液，在温度为15-20℃条件下，首先测定待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5，然后测定15分钟待测水中费氏弧菌发光强度IS15；进一步，本专利技术实施例水体检测方法中，还包括测试验证步骤，具体为：步骤S05，测定硫酸锌溶液中费氏弧菌发光强度将体积为4.5mL的硫酸锌和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合，加入10-50uL该费氏弧菌悬液，在温度为15-20℃条件下保存15分钟，测定费氏弧菌发光强度IA15，根据公式(IA15/IR15)·100％，得出硫酸锌溶液中费氏弧菌相对发光强度，如果硫酸锌测试溶液中费氏弧菌相对发光强度小于50％，则说明设备正常。该硫酸锌溶液的浓度为0.5mg/L；经检测，硫酸锌溶液中费氏弧菌相对发光强度小于50％时，说明本专利技术所使用的检测设备等具有可靠性。具体地，步骤S04中，将步骤S02、步骤S03所测定的数值进行修正，具体为：将参考水中费氏弧菌发光强度IR15除以参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5，得到参考水中费氏弧菌发光强度修正值FR15；将参考水中费氏弧菌发光强度修正值FR15乘以待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5，得到待测水中费氏弧菌发光强度修正值IC15；将待测水中费氏弧菌发光强度修正值IC1本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种水体水质检测方法，包括如下步骤：将费氏弧菌冻干菌加入至复苏缓冲液中，混匀得到费氏弧菌悬液；将体积为４．５ｍＬ的参考水和体积为０．５ｍＬ的氯化钠溶液混合，加入１０－５０ｕＬ所述费氏弧菌悬液，调节ｐＨ值为６．０－８．５，在温度为１５－２０℃条件下，测定参考水中费氏弧菌５分钟反应时间发光强度ＩＲ５，１５分钟反应时间发光强度ＩＲ１５；将体积为４．５ｍＬ的待测水和体积为０．５ｍＬ的氯化钠溶液混合，加入１０－５０ｕＬ所述费氏弧菌悬液，调节ｐＨ值为６．０－８．５，在温度为１５－２０℃条件下，测定待测水中费氏弧菌５分钟反应时间发光强度ＩＳ５，１５分钟反应时间发光强度ＩＳ１５；根据上述参数ＩＳ５、ＩＲ５、ＩＲ１５、ＩＳ１５，得出待测水中费氏弧菌发光强度抑制率，判断待测水是否被污染；所述测定参考水中费氏弧菌５分钟反应时间发光强度ＩＲ５步骤中和所述测定待测水中费氏弧菌５分钟反应时间发光强度ＩＳ５的步骤中，所加入的费氏弧菌悬液体积相同。

【技术特征摘要】
1.一种水体水质检测方法，包括如下步骤：将费氏弧菌冻干菌加入至复苏缓冲液中，混匀得到费氏弧菌悬液；将体积为4.5mL的参考水和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合，加入10-50uL所述费氏弧菌悬液，调节pH值为6.0-8.5，在温度为15-20℃条件下，测定参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5，15分钟反应时间发光强度IR15；将体积为4.5mL的待测水和体积为0.5mL的氯化钠溶液混合，加入10-50uL所述费氏弧菌悬液，调节pH值为6.0-8.5，在温度为15-20℃条件下，测定待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5，15分钟反应时间发光强度IS15；根据上述参数IS5、IR5、IR15、IS15，得出待测水中费氏弧菌发光强度抑制率，判断待测水是否被污染；所述测定参考水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IR5步骤中和所述测定待测水中费氏弧菌5分钟反应时间发光强度IS5的步骤中，所加入的费氏弧菌悬液体积相同；其中，所述复苏缓冲液包括如下重量百分含量的组分：3％-5％的渗透稳定剂、2％的氯化钠、1.5％的乙醇；0.05％-0.1％的氯霉素和环己酰亚胺混合物；所述待测水中费氏弧菌发光强度抑制率判断公式为：(IS5·IR15/IR5-IS15)/(IS5·IR15/IR5)·100％；所述渗透稳定剂由如下组分组成：酵母膏...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵忠欣，江涛，陈继红，
申请(专利权)人：宇星科技发展深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：94